一种炙枳实的质量检测方法技术

本发明专利技术属于中药分析领域，提供了一种适用于采用特定炮制方法制备的炙枳实的质量检测方法，该质量检测方法利用高效液相色谱(HPLC)能够测定针对大柴胡汤内泻阳明热结的功效的药效标志物(Q

【技术实现步骤摘要】
一种炙枳实的质量检测方法


[0001]本专利技术属于中药分析领域，具体涉及一种炙枳实的质量检测方法。

技术介绍

[0002]枳实是芸香科植物酸橙(Citrus aurantium L.)及其栽培变种或甜橙(Citrus sinensis Osbeck)的干燥幼果。植物形态为常绿小乔木，有长刺。单叶互生，革质，叶柄有狭长形或倒心脏形的翼；叶片长椭圆形，有半透明油点；花排列成总状花序；花萼杯状，5裂；花瓣5，白色，长椭圆形；柑果圆形而稍扁，成熟时橙黄色。花期4
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5月，果期6
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11月。枳实呈半球形，少数为球形，直径0.5
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2.5cm。外果皮黑绿色或暗棕绿色，具颗粒状突起和皱纹，有明显的花柱残迹或果梗痕，切面中果皮略隆起，厚0.3
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1.2cm，黄白色或黄褐色，边缘有1
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2列油室，瓤囊棕褐色，质地坚硬。气清香，味苦，微酸。主产于四川、江西、福建、江苏等地。枳实在《神农本草经》中作为中品收载，具有破气消积，化痰散痞的功效。主要用于积滞内停，痞满胀痛，泻痢后重，大便不通，痰滞气阻，胸痹，结胸，脏器下垂等。
[0003]枳实主要有效成分为生物碱，如辛弗林、N
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甲基酪胺等，黄酮类成分，如橙皮苷、柚皮素和柚皮苷等。炙枳实始载于《伤寒杂病论》的经典名方大柴胡汤中，炙枳实与大黄合用，发挥了内泻阳明热结的功效，但原方中并未明确炙法的工艺。枳实炮制后有缓和生品峻烈之性，免伤正气的作用，枳实历代有多种炮制方法，近代炮制方法主要有炒黄、炒炭、蜜炙、砂烫、酒炙、醋炙等，然而仅麸炒收载在《中国药典》(2020年版)中。
[0004]众所知周，中药的炮制对其相关产品的品质具有重大影响，是其工业化生产的关键步骤，也关系到产品后续的加工，不良炮制工艺导致有效成分流失严重，饮片质量不可控，影响饮片的临床疗效。为了解决这一问题专利技术人开发了一种大柴胡汤功效Q
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markers精准分析发现与特定功效对应的活性成分，进而以这些活性成分作为评价指标优化炙枳实炮制工艺的方法，并筛选出了能够最大程度保留炙枳实中与大柴胡汤内泻阳明热结的功效密切相关的活性成分的炙枳实制备方法。
[0005]但是，解决了上述问题，又导致一个新的问题随之而来，目前尚未建立针对采用上述特定炮制方法制备的炙枳实饮片的指标性成分含量测定方法与标准，没有定量质控指标，就不能对这种炙枳实饮片内在质量进行监控，也不能反映出这种炙枳实饮片质量的优劣，不利于对其进行质量控制。在《中国药典》(2020年版)中收载的枳实和枳实饮片的质量检测方法中仅对单一成分辛弗林的含量进行了检测，但根据本专利技术人的研究这种活性成分并不是炙枳实在大柴胡汤方剂中发挥作用的主要药效成分。
[0006]因此，如果能够建立一种炙枳实的质量检测方法，使得同时测定采用特定炮制方法制备的炙枳实中多种目标活性成分的含量，就能够更加全面、准确地评价该炙枳实的质量，从而最大限度地保证使用这种炙枳实的大柴胡汤的临床疗效。

技术实现思路

[0007]为了解决上述技术问题，本专利技术建立了一种适用于采用特定炮制方法制备的炙枳
实的质量检测方法，该质量检测方法利用高效液相色谱(HPLC)，测定所述炙枳实中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和辛弗林4种活性成分的含量，该质量检测方法简单、准确、重现性好，可为全面评价和控制大柴胡汤专用炙枳实饮片的质量提供依据。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0009]一种炙枳实的质量检测方法，所述方法包括：采用高效液相色谱(HPLC)测定橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和辛弗林的含量，
[0010]其中，所述炙枳实的制备方法包括以下步骤：
[0011](1)取生枳实片，净制，阴干后备用；
[0012](2)将适量生枳实切片平铺于烤盘上，预热烘箱，以150℃
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200℃的烘烤温度，烤制5
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30min，待枳实饮片卷翘，边缘隆起，穰囊突出，有油迹，颜色棕黄，闻之芳香，味苦，取出，放凉，即得。
[0013]作为可选方式，在上述质量检测方法中，所述炙枳实的制备方法为大柴胡汤用炙枳实的制备方法，采用所述方法制备得到的炙枳实显著增强大柴胡汤内泻阳明热结的功效。
[0014]作为可选方式，在上述质量检测方法中，所述烘烤温度为200℃，烤制时间为8min。
[0015]作为可选方式，在上述质量检测方法中，
[0016]柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、辛弗林含量测定的色谱条件包括：
[0017]采用ODS C
18
色谱柱，色谱柱规格4.6mm
×
250mm，5μm；
[0018]流动相：A相：乙腈，B相：乙腈：水(其中，水相制备方法如下：取十二烷基硫酸钠2.0g，溶于1000mL水中，滴加磷酸1滴)＝20∶80，流速：1mL/min；柱温：25℃；紫外检测器，检测波长为283nm；进样量10μL；
[0019]并且，洗脱梯度如下表所示：
[0020][0021]作为可选方式，在上述质量检测方法中，在橙皮苷、辛弗林的含量测定中：
[0022](1)对照品溶液的制备：精密称定柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、辛弗林标准品适量，置于10mL容量瓶中，加入甲醇溶解，定容，混匀，制得0.708mg/mL柚皮苷、0.374mg/mL橙皮苷、0.783mg/mL新橙皮苷与0.459mg/mL辛弗林的混合标准品溶液，备用；
[0023](2)供试品溶液的制备：取采用权利要求1至3中所述制备方法制备得到的并且过四号筛的炙枳实粉末0.2g，精密称定，置于锥形瓶中，加入25mL甲醇，称重后超声提取45min，超声功率150w，频率40Hz，待超声结束后，锥形瓶放置降至室温，再称定其质量，用溶剂补足减少的重量，摇匀，抽滤，滤液以0.45μm微孔滤膜滤过即为供试品溶液。
[0024]作为可选方式，在上述质量检测方法中，所述炙枳实按干燥品计算柚皮苷不得少于8.0％，橙皮苷不得少于2.4％，新橙皮苷不得少于6.4％，以及辛弗林不得少于1.2％。
[0025]本专利技术相对于现有技术，具有以下有益效果：
[0026]本专利技术首次建立了一种适用于特定炮制方法制备的炙枳实的质量检测方法，该检
测方法能够测定针对大柴胡汤内泻阳明热结的功效的药效标志物(Q
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markers)橙皮苷、柚皮苷和新橙皮苷，以及炙枳实中含量较高的活性成分辛弗林的含量，色谱峰峰形良好，分离度较高，检测时间较短。该质量检测方法简单、准确、重现性好，可为全面评价和控制大柴胡汤专用炙枳实饮片的质量提供依据。
附图说明
[0027]附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：
[0028]图1：大柴胡汤功效Q
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种炙枳实的质量检测方法，其特征在于：所述方法包括：采用高效液相色谱(HPLC)测定橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷和辛弗林的含量，其中，所述炙枳实的制备方法包括以下步骤：(1)取生枳实片，净制，阴干后备用；(2)将适量生枳实切片平铺于烤盘上，预热烘箱，以150℃
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200℃的烘烤温度，烤制5
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30min，待枳实饮片卷翘，边缘隆起，穰囊突出，有油迹，颜色棕黄，闻之芳香，味苦，取出，放凉，即得。2.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于：所述炙枳实的制备方法为大柴胡汤用炙枳实的制备方法，采用所述方法制备得到的炙枳实显著增强大柴胡汤内泻阳明热结的功效。3.根据权利要求1或权利要求2所述的质量检测方法，其特征在于：所述烘烤温度为200℃，烤制时间为8min。4.根据权利要求1至3中任一项所述的质量检测方法，其特征在于：柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、辛弗林含量测定的色谱条件包括：采用ODS C
18
色谱柱，色谱柱规格4.6mm
×
250mm，5μm；流动相：A相：乙腈，B相：乙腈：水＝20∶80，流速：1mL/min；柱温：25℃；紫外检测器，检测波长为283nm；进样量10μL。5.根据权利要求1至...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏胜利，张媛，赵婷，连天赐，王昕怡，王灵敏，张燕玲，张林，胡秀华，刘凤波，
申请(专利权)人：北京橘井健康科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：