菊粉发酵物、其制备方法及在防治动物结肠癌中的用途技术

本发明专利技术公开了一种菊粉发酵物在制备预防和/或治疗结直肠癌药物中的用途。所述菊粉发酵物是以菊粉为底物，使用卵形拟杆菌发酵得到的产物。所述菊粉发酵物对人及哺乳动物有改进的营养特性，无肠道副作用，可以用于调节人及哺乳动物的肠道微生物组成，并具有预防结直肠癌的作用，同时对肿瘤的生长具有显著的抑制作用，因此可以为预防和治疗结直肠癌，特别是为治疗和/或预防结肠炎相关性结肠癌提供新的思路和选择，具有广泛的应用前景。具有广泛的应用前景。具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
菊粉发酵物、其制备方法及在防治动物结肠癌中的用途


[0001]本专利技术具体涉及一种菊粉发酵物、其制备方法及在防治动物结肠癌中的用途，属于生物工程领域。

技术介绍

[0002]结直肠癌是现代生活中常见的恶性肿瘤，在世界的发病率和死亡率分别位居所有恶性肿瘤第3
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4位，且发病率呈逐年上升趋势。结肠癌的形成与遗传、饮食、生活习惯和环境因素有关，多呈溃疡、息肉型等形态。目前已知治疗结肠癌的方法主要有如下4种，即：(1)手术切除，直接切除病变部位；(2)放射疗法，通过辐射杀死癌细胞；(3)药物治疗，主要包括化学药物和靶向药。但这些治疗会对机体会产生很大的毒副作用，且在杀伤肿瘤细胞的同时对正常细胞造成损伤，破坏机体免疫系统。因此，开发毒副作用小的治疗结肠癌的药物具有重大意义。

技术实现思路

[0003]本专利技术的主要目的在于提供一种防治动物结肠癌的菊粉发酵物，以克服现有技术的不足。
[0004]本专利技术的另一目的在于提供一种制备所述菊粉发酵物的方法。
[0005]本专利技术的再一目的在于提供所述菊粉发酵物在防治动物结肠癌中的用途。
[0006]为实现上述专利技术目的，本专利技术采用了如下技术方案：
[0007]本专利技术的一个方面提供的一种菊粉发酵物是由卵形拟杆菌对菊粉进行发酵所得。
[0008]进一步的，所述卵形拟杆菌为Bacteroides ovatus ATCC 8343。
[0009]本专利技术的另一个方面提供的一种菊粉发酵物的制备方法包括：
[0010]1)将菊粉与灭菌培养基按质量比1～10∶100混合，并调节pH值为6～7，得菊粉发酵培养基；
[0011]2)将卵形拟杆菌接种到所述菊粉发酵培养基，其中卵形拟杆菌的接种量为0.1％～10％，在35～38℃条件下厌氧发酵12～36h，获得菊粉发酵物。
[0012]在一个较为优选的实施例中，所述的制备方法具体包括：
[0013]1)将菊粉与灭菌培养基按质量比1∶20混合，并调节pH值为7，得菊粉发酵培养基；
[0014]2)将卵形拟杆菌接种到菊粉发酵培养基，其中卵形拟杆菌的接种量为10％，在37℃条件下厌氧发酵24h，获得菊粉发酵物。
[0015]在一个实施例中，所述卵形拟杆菌为Bacteroides ovatus ATCC 8343。
[0016]在一个实施例中，所述灭菌培养基包含1.5重量份胰蛋白胨、0.5重量份大豆蛋白胨、0.5 重量份氯化钠、0.5重量份菊糖、1
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10重量份去纤维羊血和100重量份蒸馏水。
[0017]在一个实施例中，所述菊粉发酵物为菊粉发酵液。
[0018]在本专利技术中，所述菊粉又称菊糖，是自然界植物中广泛存在的果聚糖，其结构由D
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呋喃果糖以β
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(1，2)糖苷键连接而成，每个分子末端以α
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(1，2)糖苷键连接一个葡萄糖残
基，通常聚合度为2
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60个果糖，平均聚合度为10个果糖。
[0019]在本专利技术中，所述卵形拟杆菌(Bacteroides ovatus)是一种肠道拟杆菌中常见的革兰氏阴性厌氧菌，有荚膜、无芽孢、不运动，对光敏感，可代谢利用多糖、参与胆汁及胆固醇代谢。
[0020]本专利技术的再一个方面提供了一种菊粉发酵物，它是由前述任一种方法制得。
[0021]本专利技术的又一个方面提供了所述菊粉发酵物在制备用于预防和/或治疗结肠癌的药物中的用途。
[0022]在一个实施例中，所述结肠癌为结肠炎相关性结肠癌。
[0023]在一个实施例中，所述结肠炎相关性结肠癌为氧化偶氮甲烷和葡聚糖钠药物(AOM/DSS) 诱导形成。
[0024]其中，所述菊粉发酵物预防和/或治疗动物结肠癌的机理主要在于：抑制肿瘤个数、原癌基因(C
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MYC)的表达和癌细胞增值，并修复肠道黏膜屏障和结肠长度。
[0025]相较于现有技术，本专利技术的优点包括：
[0026](1)提供的菊粉发酵物易于制备，稳定性好，较之含单一菊粉和卵形拟杆菌制剂的产品性能有显著提高；
[0027](2)提供的菊粉发酵物对人及哺乳动物有改进的营养特性，例如其中的小分子多糖(呋喃木糖)和有机酸(乳酸、甲酸和丁酸)明显增多，无肠道副作用，可以用于调节人及哺乳动物的肠道微生物组成，并有效修复肠道屏障，具有预防结直肠癌的作用，同时对肿瘤的生长具有显著的抑制作用，因此可以为预防和治疗结直肠癌，特别是为治疗和/或预防结肠炎相关性结肠癌提供新的思路和选择，具有广泛的应用前景。
附图说明
[0028]图1为本专利技术实施例中菊粉发酵物代谢组学图。
[0029]图2为本专利技术实施例中空白组、模型组、菊粉组、菊粉代谢(发酵物)组小鼠的结直肠的解剖图。
[0030]图3为本专利技术实施例中空白组、模型组、菊粉组、菊粉代谢组小鼠的肿瘤数目。
[0031]图4为本专利技术实施例中空白组、模型组、菊粉组、菊粉代谢组小鼠的结直肠长度。
[0032]图5为本专利技术实施例中空白组、模型组、菊粉组、菊粉代谢组小鼠的肠道黏膜HE染色图。
[0033]图6为本专利技术实施例中空白组、模型组、菊粉组、菊粉代谢组小鼠的肠道微生物丰度热点图。
[0034]图7为本专利技术实施例中空白组、培养基组、菊粉代谢组、菊粉组结肠癌细胞(HT29)的增殖图。
[0035]图8为本专利技术实施例中空白组、培养基组、菊粉代谢组、菊粉组结肠癌细胞(HT29)的胞内葡萄糖含量。
[0036]图9为本专利技术实施例中空白组、培养基组、菊粉代谢组、菊粉组结肠癌细胞(HT29)的油红染色图。
[0037]图10为本专利技术实施例中空白组、模型组、菊粉组、菊粉代谢组小鼠结肠的原癌基因C
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MYC 蛋白的western blot图。
[0038]图11a
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图11b分别为本专利技术实施例中空白组、培养基组、菊粉代谢组、菊粉组结肠癌细胞(HT29)的原癌基因C
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MYC和调节基因β
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catenin蛋白的western blot图。
具体实施方式
[0039]下面结合实施例及附图对本专利技术的技术方案作进一步说明。需要指出的是，若非特别说明，则如下实施例中所应用的各类试剂均可以从市场途径获取，以及，如下实施例中所应用的各类生产、测试设备及方法均是本领域技术人员习知的。
[0040]实施例1
[0041]1.菊粉发酵物的制备方法包括：将胰蛋白胨1.5g、大豆蛋白胨0.5g、氯化钠0.5g、菊糖 (菊粉)(源叶，S11143)0.5g混合，并加入100mL蒸馏水配成液体培养基，120℃灭菌20min，冷却后加入5％(索莱宝，TX0030)去纤维羊血)，接种卵形拟杆菌(Bacteroides ovatus)， 37℃厌氧培养48h后，5000r/min离本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种菊粉发酵物，其特征在于：所述菊粉发酵物是由卵形拟杆菌对菊粉进行发酵所得。2.根据权利要求1所述的菊粉发酵物，其特征在于：所述卵形拟杆菌为Bacteroides ovatus ATCC 8343。3.一种菊粉发酵物的制备方法，其特征在于，包括：1)将菊粉与灭菌培养基按质量比1～10∶100混合，并调节pH值为6～7，得菊粉发酵培养基；2)将卵形拟杆菌接种到所述菊粉发酵培养基，其中卵形拟杆菌的接种量为0.1％～10％，在35～38℃条件下厌氧发酵12～36h，获得菊粉发酵物。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括：1)将菊粉与灭菌培养基按质量比l∶20混合，并调节pH值为7，得菊粉发酵培养基；2)将卵形拟杆菌接种到菊粉发酵培养基，其中卵形拟杆菌的接种量为10％，在37℃条件下厌氧发酵24h，获得菊粉发酵物。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶晗，汪惠丽，朱雪锋，卢帆，方小憨，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：