具有抗皱功效的三重益生菌发酵复合物制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了具有抗皱功效的三重益生菌发酵复合物制备方法及其应用，属于微生物发酵技术领域。本发明专利技术将双歧杆菌Bicilia

【技术实现步骤摘要】
具有抗皱功效的三重益生菌发酵复合物制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及具有抗皱功效的三重益生菌发酵复合物制备方法及其应用，属于微生物发酵


技术介绍

[0002]真皮是皮肤的一层，位于表皮之下，主要由结缔组织组成，主要由纤维(胶原蛋白和弹性蛋白纤维)和纤维外基质(基质)组成。成纤维细胞是真皮中最常见的细胞类型，它们合成包括胶原蛋白和弹性蛋白在内的细胞外基质。胶原蛋白和弹性蛋白纤维在维持正常皮肤的紧致和弹性方面起着关键作用。一般来说，胶原蛋白和弹性蛋白纤维形成三维结构。胶原蛋白，尤其是I型胶原蛋白，约占皮肤结缔组织的90％。皮肤的结缔组织含有弹性蛋白和胶原蛋白。弹性蛋白仅占结缔组织的约3.4％，胶原蛋白和弹性蛋白起到保持皮肤的形状和紧致皮肤的效果。胶原蛋白酶的增加导致弹性蛋白的降解，而弹性蛋白酶会使得皮肤结缔组织中的弹性蛋白降解，从而影响皮肤的弹性，导致皱纹的产生。
[0003]因此，抑制胶原蛋白酶和弹性蛋白酶的活性，减少皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白的降解，可以对皮肤起到抗皱的效果。
[0004]益生菌被认为是一种非致病性的食品级微生物，通过调节肠道菌群为人体健康保驾护航。大量文献报道证明，活性益生菌以多种方式表现出抗氧化、螯合金属离子、产生抗氧化物、调节信号通路上调抗氧化活性、下调ROS诱导的酶作用。乳酸菌是益生菌的主要代表，益生菌的发酵产物对体内酶活的调节作用，具有很高的研究和应用价值。目前，益生菌主要应用在食品中，保护人体肠道的安全；在人体皮肤上的应用报道较少，对于益生菌在抗皱方面的研究更少。

技术实现思路

[0005][技术问题][0006]本专利技术要解决的技术问题是：单一的益生菌发酵物很难达到理想的抗皱效果。
[0007][技术方案][0008]本专利技术采用耐高渗筛选机制，筛选得到具有抑制胶原蛋白酶、弹性蛋白酶活性的三株乳酸菌。通过对三株菌的发酵物进行筛选和协同增效配比，得出具有显著抑制胶原蛋白酶和弹性蛋白酶的三重益生菌发酵复合物，增加了益生菌在人体皮肤抗皱研究中的应用实例。
[0009]本专利技术提供一种双歧杆菌Bicilia
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B01(Bifidobacterium sp.Bicilia
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B01)，于2021年4月27日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为：CCTCC NO:M 2021469。
[0010]所述双歧杆菌Bicilia
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B01具有耐受高渗的特性，在耐高渗(高盐、高糖)益生菌筛选培养基中于37℃条件下培养24h，OD
600
可以达到1.9。
[0011]所述双歧杆菌的培养方法是，于厌氧手套箱中，挑取双歧杆菌Bicilia
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B01单菌落
接种至装有400mL无菌益生菌培养基的摇瓶中，摇瓶规格为500mL，放置在厌氧培养箱中，37℃培养24h。
[0012]本专利技术提供一种植物乳杆菌Bicilia
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Lp01(Lactobacillus plantarum Bicilia
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Lp01)，于2021年4月27日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为：CCTCC NO:M 2021472。
[0013]所述植物乳杆菌Bicilia
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Lp01具有耐受高渗的特性，在耐高渗(高盐、高糖)益生菌筛选培养基中于37℃条件下培养24h，OD
600
可以达到2.58。
[0014]所述植物乳杆菌的培养方法是于厌氧手套箱中，挑取植物乳杆菌单菌落接种至装有400mL无菌益生菌培养基的摇瓶中，摇瓶规格为500mL，放置在厌氧培养箱中，37℃培养24h。
[0015]本专利技术提供一种嗜酸乳杆菌Bicilia
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La01(Lactobacillus acidophilus Bicilia
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La01)，于2021年4月27日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为：CCTCC NO:M 2021471。
[0016]所述嗜酸乳杆菌Bicilia
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La01具有耐受高渗的特性，在耐高渗(高盐、高糖)益生菌筛选培养基中于37℃条件下培养24h，OD
600
可以达到3.21。
[0017]所述嗜酸乳杆菌的培养方法是，于厌氧手套箱中，挑取嗜酸乳杆菌单菌落接种至装有400mL无菌益生菌培养基的摇瓶中，摇瓶规格为500mL，放置在厌氧培养箱中，37℃培养24h。
[0018]本专利技术还提供具有抗皱功能的组合物，所述组合物包含双歧杆菌Bicilia
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B01的溶胞物、植物乳杆菌Bicilia
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Lp01的发酵上清液、嗜酸乳杆菌Bicilia
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La01的溶胞物，三者的质量比例是1：1：1或1：2：3或1：3：2；所述溶胞物是指指液态培养结束后，除去发酵上清液，收集微生物菌体，将菌体破碎、过滤，收集滤清部分，即得到溶胞物；所述发酵上清液是指微生物液态培养结束后，除去菌体后得到的液体。
[0019]本专利技术还提供应用所述具有抗皱功能的组合物制备的化妆品、护肤品。将所述具有抗皱功能的组合物与其它溶剂、载体、赋形剂、美白剂、保湿剂、维生素、防晒霜、香水、染料、抗菌剂等以适当的比例调整使用。
[0020]所述组合物可以用纯化水稀释或不，都能够发挥抗皱功效。
[0021][有益效果][0022]本专利技术采用采用独特的抗皱靶点筛选具有抗皱功效的活性益生菌，通过相互复配协同增效来解决单一益生菌抗皱效果差的弊端，增添了益生菌发酵物在抗皱类护肤品原料中的应用新局面。
[0023]本专利技术以从人体内筛选到双歧杆菌、植物乳杆菌属、嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、唾液乳杆菌出发，采用高渗益生菌培养基诱导培养，待生长一段时间后分别测定对应益生菌的菌体浓度OD
600
。将耐高渗的菌株(表现为在筛选培养基中能大量增殖的菌株)筛选出来，再通过发酵后测定对应菌株发酵产物的胶原蛋白酶抑制率；分别分析发酵液、溶胞物、以及不同组分配比间的胶原蛋白酶抑制率差异，得出最佳的益生菌发酵物配比，组合形成具有抗皱功效的三重乳酸发酵复合物，再通过测定其作用在细胞上，使得成纤维细胞中丝聚蛋白含量升高的作用来验证抗皱活性。
[0024]生物材料保藏
[0025]双歧杆菌Bicilia
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B01(Bifidobacterium sp.Bicilia
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B01)，于2021年4月27日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为：CCTCC NO:M 2021469。
[0026]植物乳杆菌Bicilia
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Lp01(Lac本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.具有抗皱功能的组合物，其特征在于，含有双歧杆菌Bicilia
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B01的溶胞物、植物乳杆菌Bicilia
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Lp01的发酵上清液、嗜酸乳杆菌Bicilia
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La01的溶胞物，三者的质量比例是1：1：1或1：2：3或1：3：2；所述溶胞物是指液态培养结束后，离心除去发酵上清液，收集微生物菌体，将菌体破碎、过滤，收集滤清部分，即得到溶胞物；所述发酵上清液是指微生物液态培养结束后，除去菌体后得到的液体；所述双歧杆菌Bicilia
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B01(Bifidobacterium sp.Bicilia
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B01)，于2021年4月27日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为：CCTCC NO:M 2021469；所述植物乳杆菌Bicilia
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Lp01(Lactobacillus plantarum Bicilia
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Lp01)，于2021年4月27日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为：CCTCC NO:M 2021472；所述嗜酸乳杆菌Bicilia
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La01(Lactobacillus acidophilus Bicilia
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La01)，于2021年4月27日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏地址为：中国.武汉.武汉大学；保藏编号为：CCTCC NO:M 2021471。2.应用权利要求1所述所述具有抗皱功能的组合物制备的化妆品。3.根据权利要求2所述的化妆品，其特征在于，包括肤用化妆品、发用化妆品，包括：胭脂、口红、眼影、粉饼、头发染烫剂。4.应用权利要求1所述所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王斌，罗西，迟俐，
申请(专利权)人：无锡弘焕微生态科技有限公司，
类型：发明
国别省市：