修饰的环状RNA及其使用方法技术

本文提供的是生成包含至少一个N6

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】修饰的环状RNA及其使用方法
[0001]相关申请的交叉引用本申请要求于2019年8月28日提交的美国临时申请号62/892,776的优先权利益，所述美国临时申请在此通过引用整体并入。
[0002]关于序列表的声明与本申请相关的序列表以文本格式代替纸质副本提供，并且在此通过引用并入说明书内。含有序列表的文本文件的名称是STDU2_37833_101_SeqList_ST25.txt。该文件为~4kb，于2020年8月24日创建，且正以电子方式提交。


[0003]本申请涉及修饰环状RNA以减少或增加其免疫原性的方法，以及使用修饰的环状RNA的方法。

技术介绍

[0004]数以万计的环状RNA (circRNA)已在真核生物中得到鉴定。病毒如丁型肝炎病毒和植物类病毒具有环状RNA基因组，并且许多病毒产生环状RNA作为其复制周期的正常部分。最近的研究提示了部分基于circRNA的先天免疫系统正在出现的状况。某些外源性circRNA的引入可以激活抗病毒和免疫基因表达程序，而内源性circRNA可以共同抑制蛋白激酶R，并且对于病毒感染后的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种疫苗组合物，其包含不含任何N6
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甲基腺苷(m6A)残基的环状RNA分子。2.权利要求1的疫苗组合物，其中所述环状RNA缺乏RRACH基序。3.权利要求1
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2中任一项的疫苗组合物，其中所述疫苗组合物进一步包含至少一种抗原。4.权利要求1
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2中任一项的疫苗组合物，其中所述环状RNA分子包含可操作地连接到编码多肽的序列的内部核糖体进入位点(IRES)。5.权利要求4的疫苗组合物，其中所述编码多肽的序列编码至少一种抗原。6.权利要求3或5中任一项的疫苗组合物，其中所述至少一种抗原具有病毒、细菌、寄生虫、真菌、原生动物、朊病毒、细胞或细胞外起源。7.权利要求3或5中任一项的疫苗组合物，其中所述至少一种抗原是肿瘤抗原。8.权利要求1
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7中任一项的疫苗组合物，其中所述环状RNA分子使用体外转录产生。9.权利要求1
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8中任一项的疫苗组合物，其中所述环状RNA作为裸露RNA存在于所述组合物中。10.权利要求1
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8中任一项的疫苗组合物，其中所述环状RNA与纳米颗粒复合。11.权利要求10的疫苗组合物，其中所述纳米颗粒是聚乙烯亚胺(PEI)纳米颗粒。12.一种在有需要的受试者中引发先天免疫应答的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的权利要求1
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11中任一项的疫苗组合物。13.一种包含编码环状RNA的DNA序列的组合物，其中所述环状RNA不含任何N6
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甲基腺苷(m6A)残基。14.权利要求13的组合物，其中所述DNA序列不包含任何RRACH基序。15.权利要求13或14的组合物，其中病毒或非病毒载体包含所述DNA序列。16.权利要求15的组合物，其中所述病毒载体是腺病毒载体、腺伴随病毒载体、逆转录病毒载体、慢病毒载体或疱疹病毒载体。17.权利要求15的组合物，其中所述非病毒载体是质粒。18.一种在有需要的受试者中引发先天免疫应答的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的权利要求13
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17中任一项的组合物。19.一种通过体外转录产生环状RNA分子的方法，所述方法包括：(a)提供编码所述环状RNA分子的DNA模板、核糖核苷三磷酸和RNA聚合酶；(c)从所述DNA模板转录线性RNA；和(d)使所述线性DNA环化，以形成环状RNA；其中所述核糖核苷三磷酸不包括任何N6
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甲基腺苷
‑5’‑
三磷酸(m6ATP)；和其中所述环状RNA能够在受试者中产生先天免疫应答。20.权利要求19的方法，其中所述环状RNA不包含任何m6A。21.一种通过体外转录产生环状RNA分子的方法，所述方法包括：(a)提供编码所述环状RNA分子的DNA模板、核糖核苷三磷酸和RNA聚合酶；(c)从所述DNA模板转录线性RNA；和(d)使所述线性DNA环化，以形成环状RNA；其中所述核糖核苷三磷酸包含N6
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甲基腺苷
‑5’‑
三磷酸(m6ATP)；和其中与使用相同方法但不存在m6ATP的情况下产生的环状RNA相比，所述环状RNA是较低
免疫原性的。22.权利要求21的方法，其中所述重组环状RNA分子中至少1%的腺苷是N6
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甲基腺苷(m6A)。23.权利要求22的方法，其中所述重组环状RNA分子中至少10%的腺苷是N6
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甲基腺苷(m6A)。24.权利要求23的方法，其中所述重组环状RNA分子中的所有腺苷都是N6
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甲基腺苷(m6A)。25. 一种减少环状...

【专利技术属性】
技术研发人员：H，
申请(专利权)人：利兰，
类型：发明
国别省市：