与肿瘤激活的T细胞衔接子相关的组合物和方法技术

本文提供了修饰的T细胞衔接子、其药物组合物以及核酸，以及制备和发现它们的方法。本文所述的修饰的T细胞衔接子通过肽和半衰期延长性分子进行修饰。长性分子进行修饰。长性分子进行修饰。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与肿瘤激活的T细胞衔接子相关的组合物和方法
交叉引用
[0001]本申请要求于2019年6月6日提交的美国临时申请号62/858,254和于2020年2月19日提交的美国临时申请号62/978,662的权益，这些申请通过引用并入本文中。序列表
[0002]本申请包含已以ASCII格式以电子方式提交的序列表，并在此通过引用而整体并入。所述ASCII副本创建于2020年6月4日，命名为52426
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716_601_SL.txt，大小为121,292字节。

技术介绍

[0003]包含T细胞衔接子的基于蛋白质的疗法已被证明可有效治疗多种疾病。与任何治疗性类别一样，需要改进此类治疗的毒性和副作用，同时改进治疗性分子的半衰期。

技术实现思路

[0004]修饰的T细胞衔接子可用于选择性破坏单独的细胞或细胞类型，例如肿瘤的癌细胞。此类修饰的T细胞衔接子诱导针对肿瘤的免疫应答以清除肿瘤。然而，目前使用修饰的T细胞衔接子的疗法可能具有毒性且无效。此外，此类修饰的T细胞衔接子可能具有较差的药代动力学特性(PK)。本文提供了修饰的T细胞衔接子，其降低健康组织中的毒性并因此提高安全性，同时具有改善的PK特性和消除肿瘤有效性。在一些实施方案中，本文所述的修饰的T细胞衔接子与肽连接，该肽阻断T细胞衔接子与健康组织中的其靶标的相互作用，从而减少靶标介导的药物处置(TMDD)。如本文所述的修饰的T细胞衔接子还与半衰期延长性分子(例如单域抗体)连接，与未修饰的T细胞衔接子相比，该半衰期延长性分子改善了修饰的T细胞衔接子的PK特征。
[0005]在某些实施方案中，本文公开了包含根据以下构型的结构排列的多肽复合物：其中所述多肽复合物包含单链可变片段(scFv)，所述单链可变片段(scFv)包含轻链可变结构域和重链可变结构域，其中所述scFv通过作为肿瘤特异性蛋白酶的底物的连接部分(L1)在所述scFv的N端而与肽(P1)连接，其中P1破坏所述scFv与效应细胞抗原的结合，并且P1进一步与半衰期延长性分子连接；和与肿瘤细胞抗原结合的抗原识别分子，其中所述抗原识别分子包含Fab轻链多肽和Fab重链多肽，其中所述抗原识别分子与所述scFv连接，并且所述抗原识别分子进一步与P2和L2连接，其中P2包含破坏所述抗原识别分子与所述肿瘤细胞抗原结合的肽；并且L2包含使所述抗原识别分子与P2相连并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物的连接部分。在一些实例中，所述抗原识别分子是Fab或Fab'。在一些实例中，所述
重链可变结构域与所述Fab重链多肽的N端连接并且L2与所述Fab轻链多肽的N端相连。在一些实例中，所述重链可变结构域与所述Fab轻链多肽的N端连接并且L2与所述Fab重链多肽的N端相连。在一些实例中，所述轻链可变结构域与所述Fab重链多肽的N端连接并且L2与所述Fab轻链多肽的N端相连。在一些实例中，所述轻链可变结构域与所述Fab轻链多肽的N端连接并且L2与所述Fab重链多肽的N端相连。在一些实例中，所述多肽复合物的分子量小于约110kDa。在一些实例中，所述重链可变结构域、轻链可变结构域、Fab重链多肽、Fab轻链多肽和半衰期延长性分子的组合分子量小于约100kDa。在一些实例中，所述肿瘤细胞抗原包含表皮生长因子受体(EGFR)、人表皮生长因子受体2(HER2)或间皮素。在一些实例中，所述效应细胞抗原包含分化簇3(CD3)。在一些实例中，所述scFv包含选自莫罗单抗(muromonab)
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CD3(OKT3)、奥昔组单抗(otelixizumab)(TRX4)、替利组单抗(teplizumab)(MGA031)、维西珠单抗(visilizumab)(Nuvion)、SP34、X35、VIT3、BMA030(BW264/56)、CLB
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T3/3、CRIS7、YTH12.5、F111
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409、CLB
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T3.4.2、TR
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66、WT32、SPv
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T3b、11D8、XIII
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141、XIII
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46、XIII
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87、12F6、T3/RW2
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8C8、T3/RW2
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4B6、OKT3D、M
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T301、SMC2、F101.01、UCHT
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1、WT
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31、15865、15865v12、15865v16和15865v19中的互补决定区(CDR)。在一些实例中，所述scFv包含SP34的互补决定区(CDR)。在一些实例中，所述scFv包含与SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67或SEQ ID NO:68具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。在一些实例中，P1通过离子相互作用、静电相互作用、疏水相互作用、Pi
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堆叠相互作用和H
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键相互作用与所述scFv结合而破坏所述scFv与所述效应细胞抗原的结合。在一些实例中，P1通过在抗原结合位点处或其附近与所述scFv结合而破坏所述scFv与所述效应细胞抗原的结合。在一些实例中，P1包含长度为至少10个氨基酸且长度不超过20个氨基酸的氨基酸序列。在一些实例中，P1与所述效应细胞抗原的氨基酸序列具有小于70％的序列同一性。在一些实例中，P1与CD3的氨基酸序列具有小于70％的序列同一性。在一些实例中，P1包含根据SEQ ID NO:18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28的氨基酸序列。在一些实例中，L1包含尿激酶可切割的氨基酸序列、matriptase可切割的氨基酸序列、基质金属蛋白酶可切割的氨基酸序列或legumain可切割的氨基酸序列。在一些实例中，L1具有包括(G2S)
n
、(GS)
n
、(GSGGS)
n
(SEQ ID NO:30)、(GGGS)
n
(SEQ ID NO:31)、(GGGGS)
n
(SEQ ID NO:32)或(GSSGGS)
n
(SEQ ID NO:33)的式，其中n是至少1的整数。在一些实例中，L
l
包含根据SEQ ID NO:34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50或55的氨基酸序列。在一些实例中，L1包含根据SEQ ID NO:42的氨基酸序列。在一些实例中，所述半衰期延长性分子包含使所述半衰期延长性分子与P1相连的连接部分(L3)。在一些实例中，L3具有选自(G2S)
n
、(GS)
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、(GSGGS)
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(SEQ ID NO:30)、(GGGS)
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(SEQ ID NO:31)、(GGGGS)
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(SEQ ID NO:32)和(GSSGGS)
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(SEQ ID NO:33)中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种多肽复合物，包含根据以下构型的结构排列：其中所述多肽复合物包含单链可变片段(scFv)，所述单链可变片段(scFv)包含轻链可变结构域和重链可变结构域，其中所述scFv通过作为肿瘤特异性蛋白酶的底物的连接部分(L1)在所述scFv的N端而与肽(P1)连接，其中P1破坏所述scFv与效应细胞抗原的结合，并且P1进一步与半衰期延长性分子连接；和与肿瘤细胞抗原结合的抗原识别分子，其中所述抗原识别分子包含Fab轻链多肽和Fab重链多肽，其中所述抗原识别分子与所述scFv连接，并且所述抗原识别分子进一步与P2和L2连接，其中P2包含破坏所述抗原识别分子与所述肿瘤细胞抗原结合的肽；并且L2包含使所述抗原识别分子与P2相连并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物的连接部分。2.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述抗原识别分子是Fab或Fab'。3.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述重链可变结构域与所述Fab重链多肽的N端连接并且L2与所述Fab轻链多肽的N端相连。4.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述重链可变结构域与所述Fab轻链多肽的N端连接并且L2与所述Fab重链多肽的N端相连。5.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述轻链可变结构域与所述Fab重链多肽的N端连接并且L2与所述Fab轻链多肽的N端相连。6.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述轻链可变结构域与所述Fab轻链多肽的N端连接并且L2与所述Fab重链多肽的N端相连。7.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述多肽复合物的分子量小于约110kDa。8.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述重链可变结构域、所述轻链可变结构域、所述Fab重链多肽、所述Fab轻链多肽和所述半衰期延长性分子的组合分子量小于约100kDa。9.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述肿瘤细胞抗原包含表皮生长因子受体(EGFR)、人表皮生长因子受体2(HER2)或间皮素。10.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述效应细胞抗原包含分化簇3(CD3)。11.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述scFv包含选自莫罗单抗
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CD3(OKT3)、奥昔组单抗(TRX4)、替利组单抗(MGA031)、维西珠单抗(Nuvion)、SP34、X35、VIT3、BMA030(BW264/56)、CLB
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T3/3、CRIS7、YTH12.5、F111
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409、CLB
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T3.4.2、TR
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66、WT32、SPv
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T3b、11D8、XIII
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141、XIII
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46、XIII
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87、12F6、T3/RW2
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8C8、T3/RW2
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4B6、OKT3D、M
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T301、SMC2、F101.01、UCHT
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1、WT
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31、15865、15865v12、15865v16和15865v19中的互补决定区(CDR)。12.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述scFv包含SP34的互补决定区(CDR)。13.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中所述scFv包含与SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67或SEQ ID NO:68具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。
14.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中P1通过离子相互作用、静电相互作用、疏水相互作用、Pi
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堆叠相互作用和H
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键相互作用与所述scFv结合而破坏所述scFv与所述效应细胞抗原的结合。15.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中P1通过在抗原结合位点处或其附近与所述scFv结合而破坏所述scFv与所述效应细胞抗原的结合。16.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中P1包含长度为至少10个氨基酸且长度不超过20个氨基酸的氨基酸序列。17.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中P1与所述效应细胞抗原的氨基酸序列具有小于70％的序列同一性。18.根据权利要求10所述的多肽复合物，其中P1与CD3的氨基酸序列具有小于70％的序列同一性。19.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中P1包含根据SEQ ID NO:18、19、20、21、22、23、24、25、26、27或28的氨基酸序列。20.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中L1包含尿激酶可切割的氨基酸序列、matriptase可切割的氨基酸序列、基质金属蛋白酶可切割的氨基酸序列或legumain可切割的氨基酸序列。21.根据权利要求1所述的多肽复合物，其中L1具有包括(G2S)
n
、(GS)
n
、(GSGGS)
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(SEQ ID NO:30)、(GGGS)
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(SEQ ID NO:31)、(GGGGS)
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(SEQ ID NO:32)或(...

【专利技术属性】
技术研发人员：大卫，
申请(专利权)人：佳努克斯治疗公司，
类型：发明
国别省市：