免疫细胞的改进制剂制造技术

我们公开了对T细胞组合物的各种改进，包括使用较低水平的血清白蛋白和冷冻保护剂诸如二甲基亚砜。如二甲基亚砜。如二甲基亚砜。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】免疫细胞的改进制剂
[0001]本文所引用的所有文档和在线信息以引用方式整体并入本文。
[0002]相关申请的引用
[0003]本申请要求2019年8月12日提交的美国临时申请62/885,747的优先权日的权益，该美国临时申请的内容以引用方式整体并入本文。


[0004]本专利技术属于免疫细胞的制剂的领域。

技术介绍

[0005]T细胞活化是针对病原微生物(例如，病毒、细菌和寄生虫)、外来蛋白质和环境中的有害化学物质的保护性免疫中的重要步骤，并且还作为针对癌症和其他过度增殖性疾病的免疫。
[0006]来自供体或患者的T细胞可以在将它们施用于患者之前进行遗传修饰。例如，表达嵌合抗原受体的T细胞可用于包括不同癌症疗法在内的各种疗法中。表达嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)的T细胞的过继转移是用于治疗某些血液恶性肿瘤的有效疗法。还可以在造血细胞移植(haematopoietic cell transplantation,HCT)和干细胞移植(stem cell transplantation,HSCT)之后使用经修饰的T细胞来治疗和预防复发，并为移植患者提供免疫。
[0007]经遗传修饰的供体T细胞通常是通过以下方式获得的：从患者或供体取得T细胞并将这些T细胞运送至设施，在所述设施中将所述细胞进行遗传工程化、冷冻并返回至治疗设施，在所述治疗设施中所述患者然后可接受疗法。由于运输和冷冻所述细胞的需求，所述细胞通常与添加剂诸如冷冻保护剂一起配制以保护细胞。
[0008]由于已知组合物中存在添加剂中的一些添加剂，所以所述组合物有时已经与对接受者的不利影响或高制造成本相关联。本领域需要提供改进的制剂，所述改进的制剂降低了不良反应的可能性并且可以以成本有效的方式制造。

技术实现思路

[0009]本专利技术通过以下方式满足了这种需要：提供与现有技术组合物相比包含较少量的冷冻保护剂的组合物，而即使在高细胞浓度下也没有任何显著的细胞活力或治疗功效损失。这些组合物可用于疗法中。
[0010]我们提供了一种浓缩组合物，所述浓缩组合物包含T细胞和血清白蛋白，其中所述组合物包含<2.5％(v/v)的血清白蛋白(优选<2.2％(v/v)、<2％(v/v)、或<1％(v/v)，优选<0.5％(v/v)的血清白蛋白)。此类组合物实现了良好的治疗功效，但与现有技术组合物相比制备起来较便宜，所述现有技术组合物通常包含较高量的血清白蛋白，所述血清白蛋白的药学上可接受形式是昂贵的。
[0011]浓缩组合物优选还包含二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)。与血清白蛋白相
比，DMSO将通常过量(v/v)存在。在浓缩组合物包含x％(v/v)的血清白蛋白的情况下，DMSO的浓度(v/v)因此可为3x％至30x％，且优选过量为3倍至15倍，例如6倍至12倍、8倍至11倍、或约10倍。可以使用至少5倍的过量，例如5倍至3倍的过量。
[0012]因此，我们还提供了一种浓缩组合物，所述浓缩组合物包含T细胞、血清白蛋白和DMSO，其中所述血清白蛋白的浓度(v/v)为0.1
‑
2％(优选<1％(v/v))并且DMSO的浓度(v/v)是血清白蛋白的浓度的3倍至30倍高(优选3倍至15倍高，例如6倍至12倍高、8倍至11倍高、或约10倍高；可以使用至少5倍高的浓度)。
[0013]这些浓缩组合物中的DMSO的浓度优选<10％(v/v)，更优选2
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8％(v/v)、4
‑
7％(v/v)、5
‑
6％(v/v)、或约5％。
[0014]我们还提供了一种浓缩组合物，所述浓缩组合物包含T细胞和DMSO，其中所述组合物包含<5％(v/v)的DMSO。如上所述，已经报道冷冻保护剂与患者的不良反应相关联，但是仍被认为是重要的以确保尤其是良好的细胞解冻后活力。专利技术人已经表明，包含较低量的冷冻保护剂DMSO的组合物很好地保护细胞免于解冻，使得所述细胞显示出良好的解冻后活力。
[0015]我们还提供了一种浓缩组合物，所述浓缩组合物包含T细胞、血清白蛋白和DMSO，其中血清白蛋白的浓度(v/v)为0.1
‑
1％(例如0.2
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0.8％、0.3
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0.7％、0.4
‑
0.6％、或约0.5％)，并且DMSO的浓度为5
‑
7％(v/v)。已发现此范围的DMSO浓度提供良好的T细胞恢复和活力，而无需高水平的血清白蛋白。
[0016]这些浓缩组合物可包含介于1x106个T细胞/mL与40x106个T细胞/mL之间，例如介于1x106个T细胞/mL与35x106个T细胞/mL之间、介于1.2x106个T细胞/mL与33x106个T细胞/mL之间、介于1.2x106个T细胞/mL与30x106个T细胞/mL之间、介于1.2x106个T细胞/mL与20x106个T细胞/mL之间、介于1.2x106个T细胞/mL与15x106个T细胞/mL之间、介于1.2x106个T细胞/mL与10x106个T细胞/mL之间、介于1.2x106个T细胞/mL与5x106个T细胞/mL之间、或介于1.5x106个T细胞/mL与2.5x106个T细胞/mL之间。至少1.5x106个T细胞/mL的浓度是典型的，并且约2x106个T细胞/mL的浓度是优选的。YESCARTA
TM
中的T细胞的浓度为3x106个/mL，并且KYMRIAH
TM
中的T细胞浓度的范围为2x105个/mL至5x106个/mL。
[0017]所有浓缩组合物都可以以冷冻保存形式(例如于
‑
80℃或更低，优选
‑
130℃或更低的温度)以及以预冷冻保存和后冷冻保存(例如解冻)形式提供。
[0018]在一个方面中，本专利技术提供了一种容器，所述容器包含T细胞悬浮液、约5
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7％的DMSO和约0.1
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1％(例如0.2
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0.8％、0.3
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0.7％、0.4
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0.6％、或约0.5％)的人白蛋白(v/v)。在一些实施方案中，容器是无菌输液袋。在一些实施方案中，输液袋体积是约15mL、30mL、50mL、60mL、70mL、100mL、250mL、500mL、750mL、1000mL、1500mL、2000mL或3000mL。
[0019]本专利技术的浓缩组合物可以施用于患者，但是高DMSO浓度有时可引起细胞损伤，因此所述浓缩组合物可以在施用于患者之前进行稀释。这种稀释可帮助避免细胞损伤。稀释组合物理想地在稀释的3小时内(例如，60
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120分钟内，并且理想地90分钟内)施用于患本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种组合物，所述组合物包含T细胞和血清白蛋白以及二甲亚砜(DMSO)，其中所述组合物包含<2.5％(v/v)的血清白蛋白，并且其中DMSO以与所述血清白蛋白相比>5倍过量(v/v)存在。2.如权利要求1所述的组合物，所述组合物包含<2.2％(v/v)、<2％(v/v)、<1％(v/v)、或约0.5％(v/v)的血清白蛋白。3.如权利要求1或权利要求2所述的组合物，其中DMSO以与所述血清白蛋白相比5倍至30倍过量(v/v)存在。4.如权利要求3所述的组合物，其中所述过量为5倍至15倍、6倍至12倍、8倍至11倍、或约10倍。5.一种组合物，所述组合物包含T细胞、血清白蛋白和DMSO，其中所述血清白蛋白浓度(v/v)为0.1
‑
1％，并且所述DMSO浓度(v/v)是所述血清白蛋白浓度的3倍至30倍高。6.如权利要求5所述的组合物，其中所述血清白蛋白浓度<1％(v/v)，并且所述DMSO浓度是所述血清白蛋白浓度的8倍至11倍高。7.如权利要求5或权利要求6所述的组合物，其中DMSO浓度<10％(v/v)。8.如权利要求7所述的组合物，其中所述DMSO浓度为2
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8％(v/v)、4
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7％(v/v)、5
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6％(v/v)、或约5％(v/v)。9.一种组合物，所述组合物包含T细胞、血清白蛋白和DMSO，其中所述血清白蛋白浓度(v/v)为0.1
‑
1％，并且所述DMSO浓度为5
‑
7％(v/v)。10.如权利要求9所述的组合物，其中所述血清白蛋白浓度(v/v)介于0.2
‑
0.8％之间、介于0.3
‑
0.7％之间、介于0.4
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0.6％之间，或为约0.5％。11.如权利要求1至10中任一项所述的组合物，所述组合物具有介于1x106个T细胞/mL与40x106个T细胞/mL之间。12.如权利要求1至11中任一项所述的组合物，所述组合物呈冷冻保存形式。13.一种组合物，所述组合物包含T细胞和血清白蛋白，其中所述组合物包含约0.15％(v/v)的血清白蛋白。14.如权利要求13所述的组合物，所述组合物还包含二甲亚砜(DMSO)。15.如权利要求14所述的组合物，其中DMSO以与所述血清白蛋白相比3倍至30倍过量(v/v)存在。16.如权利要求15所述的组合物，其中所述过量为3倍至15倍、6倍至12倍、8倍至11倍、或约10倍。17.一种组合物，所述组合物包含T细胞、血清白蛋白和DMSO，其中所述血清白蛋白浓度(v/v)为0.03
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0.6％，并且所述DMSO浓度(v/v)是所述血清白蛋白浓度的3倍至30倍高。18.如权利要求17所述的组合物，其中所述血清白蛋白浓度<0.3％(v/v)，并且所述DMSO浓度是所述血清白蛋白浓度的8倍至11倍高。19.如权利要求17或权利要求18所述的组合物，其中DMSO浓度<3％(v/v)。20.如权利要求7所述的组合物，其中所述DMSO浓度为0.6
‑
2.4％(v/v)、0.8
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2.2％(v/v)、1.5
‑
2％(v/v)、或约1.8％(v/v)。21.一种组合物，所述组合物包含T细胞和DMSO，其中所述组合物包含<0.15％(v/v)的DMSO。
22.一种组合物，所述组合物包含T细胞、血清白蛋白和DMSO，其中所述血清白蛋白浓度为0.03
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0.3％(v/v)，并且所述DMSO浓度为0.15
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0.20％(v/v)。23.如权利要求13至22中任一项所述的组合物，所述组合物具有介于0.3x106个T细胞/mL与12x106个T细胞/mL之间。24.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述T细胞是经遗传修饰的T细胞，诸如CAR
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T细胞。25.如任一前述权利要求所述的组合物，其中所述T细胞是人T细胞并且所述血清白蛋白是人血清白蛋白。26.一种用于制备权利要求13至25中任一项所述的组合物的工艺，所述工艺包括稀释权利要求1至12中任一项所述的组合物的步骤。27.如权利要求26所述的工艺，其中稀释用电解质溶液执行。28.如权利要求27所述的工艺，其中所述电解质溶液是生理盐水。29.如权利要求27所述的工艺，其中所述电解质溶液是具有约5.26g/L的NaCl、约5.02g/L的葡萄糖酸钠、约3.68g/L的三水合乙酸钠、约0.37g/L的KCl、和约0.3g/L的MgCl2.6H2O的pH为6.5
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8.0的无菌、无热原、等渗溶液。30.一种治疗受试者的方法，所述方法包括向有需要的患者施用权利要求1至25中任一项所述的组合物的步骤。31.一种容器，所述容器包含T细胞、血清白蛋白和二甲亚砜(DMSO)的悬浮液，其中所述组合物包含<2.5％(v/v)的血清白蛋白，并且其中DMSO以与所述血清白蛋白相比>5倍过量(v/v)存在，并且其中所述悬浮液待施用于患者。32.如权利要求31所述的容器，其中所述悬浮液包含<2.2％(v/v)、<2％(v/v)、<1％(v/v)、或约0.5％(v/v)的血清白蛋白。33.如权利要求31或权利要求32所述的容器，其中DMSO以与所述血清白蛋白相比5倍至30倍过量(v/v...

【专利技术属性】
技术研发人员：O，
申请(专利权)人：贝里坤制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：