PSCACAR-T细胞制造技术

该技术一般涉及免疫学领域并且部分涉及用于治疗与表达前列腺干细胞抗原的肿瘤细胞的存在相关的疾病和病症的T细胞组合物和方法。法。法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PSCA CAR
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T细胞
[0001]相关申请
[0002]本申请要求2018年12月13日提交的美国临时专利申请号62/779,394的优先权，其公开通过引用全文纳入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含以ASCII格式电子提交的序列表并通过引用其全部内容纳入本文。所述ASCII拷贝创建于2019年12月19日，命名为14562
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068
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228_SL.txt，并且大小为61,765字节。


[0005]该技术一般涉及免疫学领域并且部分涉及用于治疗与表达前列腺干细胞抗原的肿瘤细胞的存在相关的疾病和病症的T细胞组合物和方法。
[0006]背景
[0007]前列腺干细胞抗原(PSCA)是一种糖基磷脂酰肌醇锚定的细胞表面蛋白，具有123个氨基酸。虽然PSCA在前列腺、膀胱、肾脏、皮肤、食道、胃、眼部和胎盘的正常上皮细胞中表达较低，PSCA在胰腺癌、前列腺癌、胃癌、卵巢癌和膀胱癌中上调(Abate
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Daga D 2014Hum Gene Ther 25:1003
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1012)。PSCA的表达与前列腺癌的晚期临床分期和转移呈正相关(Saeki N 2010Cancer Res 16：3533
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3538)。
[0008]PSCA代表了抗癌免疫疗法的潜在靶点。针对PSCA的单克隆抗体(AGS
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1C4D4或AGS
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PSCA)的安全性和临床活性在用于治疗晚期胰腺癌(Wolpin BM 2013Ann Oncol 24：1792)和前列腺癌(Antonarakis ES 2012《癌症化疗与药理学(Cancer Chemother Pharmacol)》69：763
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771,Morris MJ 2012Ann Oncol 23：2714
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2719)的I期和II期临床试验中得到评价。在约200名对象中，抗PSCA抗体的治疗在剂量高达48mg/kg时表现出低毒性和中等功效。这种有利的安全性概况归因于PSCA在正常组织(Abate
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Daga D 2014Hum Gene Ther25：1003
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1012)上的有限表达，这有助于减少针对靶标且在肿瘤外的副作用。同时，这些数据提供了临床证据，证明PSCA是治疗干预的相关靶标。
[0009]诱导型PSCA CAR
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T细胞可能是一种有用的免疫疗法，可用于治疗表达PSCA的实体瘤恶性肿瘤。临床前数据显示，与传统CAR
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T疗法相比，T细胞增殖、持久性和体内抗肿瘤活性增强(Foster AE 2017Mol Ther 25：2176
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2188,Mata M 2017Cancer Discov 7：1306
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1319)。迄今为止，传统CAR
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T细胞免疫疗法的有意义的临床活性仅限于血液系统恶性肿瘤，而对实体瘤适应症的疗效可能受到普遍较低的CAR
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T细胞持久性的限制，因此随着时间的推移缺乏持续的抗肿瘤活性。向抗PSCA CAR
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T细胞添加可诱导的“开启”开关提供了受控的激活和增殖信号，从而不仅提高了修饰的T细胞的持久性，还延长了抗肿瘤功效的潜力。
[0010]在以下说明书、实施例、权利要求和附图中进一步描述某些实施方式。

技术实现思路

[0011]在一个方面，本专利技术提供一种治疗人类对象的方法，其中对象已被诊断具有与表
达前列腺干细胞抗原(PSCA)的一个或多个实体瘤的存在相关的疾病，其包括：给予对象0.3
×
106个细胞/kg至约9
×
106个细胞/kg包含(i)编码诱导型MyD88/CD40多肽的第一多核苷酸和(ii)编码前列腺干细胞抗原嵌合抗原受体(PSCA
‑
CAR)多肽的第二多核苷酸的修饰的T细胞。
[0012]在一些实施方式中，本文提供的治疗人类对象的方法进一步包括以0.1
×
106个细胞/kg至30
×
106个细胞/kg的量给予未修饰的多克隆T细胞。在特定的实施方式中，给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约90％的T细胞是修饰的T细胞。在一些实施方式中，给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约80％的T细胞是修饰的T细胞。在一些实施方式中，给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约70％的T细胞是修饰的T细胞。在一些实施方式中，给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约60％的T细胞是修饰的T细胞。在一些实施方式中，给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约50％的T细胞是修饰的T细胞。
[0013]在特定的实施方式中，在适于输注到对象的包含约20
×
106至120
×
106个细胞/毫升的稀释剂中将T细胞给予对象。
[0014]在一些实施方式中，本文提供的治疗人类对象的方法进一步包括给予对象多个剂量的利米多塞。在特定的实施方式中，每天一次向对象给予利米多塞。在其他的实施方式中，每周三次向对象给予利米多塞。在另外的实施方式中，每周两次向对象给予利米多塞。在一些实施方式中，每周一次向对象给予利米多塞。在一些实施方式中，隔周一次向对象给予利米多塞。在其他的实施方式中，每月两次向对象给予利米多塞。
[0015]在特定的实施方式中，每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。在具体的实施方式中，每周一次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。在其他的实施方式中，每天一次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。在另外的实施方式中，每周三次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。在一些实施方式中，每周两次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。在一些实施方式中，隔周一次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。
[0016]本文提供的治疗人类对象的任一种方法的一些实施方式中，所述实体瘤是胰腺癌、胃癌或前列腺癌。
[0017]本文提供的治疗人类对象的任一种方法的一些实施方式中，所述诱导型MyD88/CD40多肽包括
[0018]i)两个多聚体配体结合区；
[0019]ii)缺乏TIR结构域的MyD88多肽或截短的MyD88多肽；以及iii)缺乏CD40胞外结构域的CD40胞质多肽区。
[0020]在特定的实施方式中，每个多聚体配体结合区包含一个FKB本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种治疗人类对象的方法，其中所述对象已被诊断患有与一种或多种表达前列腺干细胞抗原(PSCA)的实体瘤的存在相关的疾病，包括：给予对象0.3
×
106个细胞/kg至约9
×
106个细胞/kg的修饰的T细胞，其包含：(i)编码诱导型MyD88/CD40多肽的第一多核苷酸和(ii)编码前列腺干细胞抗原嵌合抗原受体PSCA
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CAR多肽的第二多核苷酸。2.如权利要求1所述的方法，其进一步包含以0.1
×
106个细胞/kg至30
×
106个细胞/kg的量给予未修饰的多克隆T细胞。3.如权利要求2所述的方法，其中给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约90％的T细胞是修饰的T细胞。4.如权利要求2所述的方法，其中给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约80％的T细胞是修饰的T细胞。5.如权利要求2所述的方法，其中给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约70％的T细胞是修饰的T细胞。6.如权利要求2所述的方法，其中给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约60％的T细胞是修饰的T细胞。7.如权利要求2所述的方法，其中给予对象包含修饰的和未修饰的T细胞的异质性T细胞群的输注，其中约20％至约50％的T细胞是修饰的T细胞。8.如权利要求1～7中任一项所述的方法，其中，在适于输注到对象的包含约20
×
106至120
×
106个细胞/毫升的稀释剂中将T细胞给予对象。9.如权利要求1～8中任一项所述的方法，其进一步包含给予对象多个剂量的利米多塞。10.如权利要求9所述的方法，其中每天一次向对象给予利米多塞。11.如权利要求9所述的方法，其中每周三次向对象给予利米多塞。12.如权利要求9所述的方法，其中每周两次向对象给予利米多塞。13.如权利要求9所述的方法，其中每周一次向对象给予利米多塞。14.如权利要求9所述的方法，其中隔周一次向对象给予利米多塞。15.如权利要求9所述的方法，其中每月两次向对象给予利米多塞。16.如权利要求9～15中任一项所述的方法，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。17.如权利要求9所述的方法，其中每周一次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。18.如权利要求9所述的方法，其中每天一次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。19.如权利要求9所述的方法，其中每周三次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。20.如权利要求9所述的方法，其中每周两次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。21.如权利要求9所述的方法，其中隔周一次向对象给予利米多塞，其中每次给予对象的利米多塞为约0.4mg/kg对象体重。
22.如前述任一项权利要求所述的方法，其中，所述实体瘤是胰腺癌、胃癌或前列腺癌。23.如前述任一项权利要求所述的方法，其中，所述诱导型MyD88/CD40多肽包括i)两个多聚体配体结合区；ii)缺乏TIR结构域的MyD88多肽或截短的MyD88多肽；以及iii)缺乏CD40胞外结构域的CD40胞质多肽区。24.如权利要求23所述的方法，其中每个多聚体配体结合区包含一个FKBP12变体多肽。25.如权利要求24所述的方法，其中，每个FKBP12变体多肽包含36位的氨基酸取代，其与野生型FKBP12多肽相比对多聚体配体以较高亲和力结合。26.如权利要求25所述的方法，其中，36位的氨基酸取代选自缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、和丙氨酸。27.如权利要求26所述的方法，其中每个多聚体配体结合区是FKB12v36区。28.如权利要求23～27中任一项所述的方法，其中，截短的MyD88多肽具有氨基酸序列SEQ ID NO：21、或其功能片段。29.如权利要求23～27中任一项所述的方法，其中，所述CD40胞质多肽包含氨基酸序列SEQ ID NO：23或其功能片段。30.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述PSCA
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CAR多肽包括抗原识别部分、跨膜区、和T细胞活化分子。31.如权利要求30所述的方法，其中，所述抗原识别部分来自选自1G8、2A2、2H9、3C5、3E6、3G3、4A10、和A11的PSCA抗体，其中1G8、2A2、2H9、3C5、3E6、3G3、和4A10分别由命名为HB
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12612、HB
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12613、HB
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12614、HB
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12616、HB
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12618、HB
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12615、和HB12617的杂交瘤产生，保存在美国典型培养物保藏中心。32.如权利要求30所述的方法，所述抗原识别部分包含选自SEQ ID NO：65、67、69、和71的氨基酸序列的重链可变结构域和轻链可变结构域的互补决定区CDR。33.如权利要求30所述的方法，其中，所述抗原识别部分包含可变重链氨基酸序列可变轻链氨基酸序列，其选自SEQ ID NO：51和49；SEQ ID NO：55和53；SEQ ID NO：57和59；和SEQ ID NO：61和63。34.如权利要求30所述的方法，其中，所述抗原识别部分是包含SEQ ID NO：49的可变轻链氨基酸序列和SEQ ID NO：51的可变重链氨基酸序列的单链可变区scFV。35.如权利要求30所述的方法，其中，所述抗原识别部分是包含SEQ ID NO：53的可变轻链氨基酸序列和SEQ ID NO：55的可变重链氨基酸序列的scFV。36.如权利要求30所述的方法，其中，所述抗原识别部分是包含SEQ ID NO：57的可变轻链氨基酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：P，
申请(专利权)人：贝里坤制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：