一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法技术

本发明专利技术公开了一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法，包括：合成化合物Z

【技术实现步骤摘要】
一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法


[0001]本专利技术属于多肽合成
，具体涉及一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法。

技术介绍

[0002]类蛇毒三肽(H
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB
‑
NH
‑
Bzl)是一种模拟蛇毒毒素Waglerin I活性的三肽，Waglerin I发现于Temple Viper毒蛇的毒液，已被证明可抑制乙酰胆碱与乙酰胆碱受体的结合，从而抑制肌肉运动。类蛇毒肽是DSM荷兰皇家帝斯曼集团全资子公司PENTAPHARM开发，其化学结构与毒蛇血清相似，具有抑制神经肌肉收缩，抚平肌肤皱纹的功能。应用于化妆品中，类蛇毒肽在减少动力性皱纹方面的功效是类肉毒杆菌的5倍，具有优秀的光滑肌肤、迅速祛皱的性能，分子结构如下所示：
[0003][0004]目前，合成类蛇毒肽的方法主要有以下几种
[0005](1)液相逐个缩合：如专利CN 107936108 A，该方案以甲酯保护的氨基酸为原料，逐个缩合，最后进行C端修饰苄胺。该方法不断偶联、水解脱保护，步骤繁琐，偶联到后面工艺收率和纯度较低；此外，该方法用到了两次水解反应，Pro
‑
OMe和Dab
‑
OMe的水解，容易发生消旋；另外，所用原料均需要采用甲酯保护的氨基酸，成本较高。
[0006](2)固液相结合方式：该类方法一般先采用2
‑
CTC Resin固相合成全保护肽Boc
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB(Boc)
‑
OH或Fmoc
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB(Boc)
‑
OH，再在液相环境下与苄胺缩合(如专利CN 103570804 B)。该工艺粗肽纯度较高，但是使用2
‑
CTC Resin价格较高，而且氨基酸投料倍数基本都是大大过量，成本高，另外，固相合成在规模上也受限。
[0007](3)液相片段合成：如专利CN 107857797 A，该方法是合成片段H
‑
Pro
‑
DAB(Boc)
‑
NH
‑
Bzl，然后再与Boc
‑
β
‑
Ala
‑
OH反应得到全保护肽。该片段合成策略简便易行，但使用的原料H
‑
Dab(Boc)
‑
OH价格较贵；另外，在Fmoc
‑
Pro
‑
Dab(Boc)
‑
OH与苄胺偶联过程中，因Dab(Boc)主链氨基酸并非是氧羰基类保护基，在缩合反应中，容易产生Dab的消旋，对产品质量有较大影响。

技术实现思路

[0008]针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法。
[0009]本专利技术提供一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法，包括如下步骤：
[0010]合成化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH；
[0011]合成化合物Fmoc
‑
DAB(Z)
‑
NHBzl；
[0012]脱除化合物Fmoc
‑
DAB(Z)
‑
NHBzl的Fmoc保护基，得到化合物NH2‑
DAB(Z)
‑
NHBzl；
[0013]以化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH和NH2‑
DAB(Z)
‑
NHBzl原料，合成化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB(Z)
‑
NHBzl；
[0014]脱除化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB(Z)
‑
NHBzl的Z保护基，得到化合物H
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB
‑
NHBzl
·
2HBr；
[0015]对H
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB
‑
NHBzl
·
2HBr进行纯化转盐，得到H
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB
‑
NHBzl。
[0016]进一步地，所述化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH的合成方法为：以化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
OH和HONb或Z
‑
β
‑
Ala
‑
OH和HOSu为原料，在非质子性溶剂中，在缩合剂作用下进行活化反应，得到中间体Z
‑
β
‑
Ala
‑
ONb或Z
‑
β
‑
Ala
‑
OSu；在碱的作用下，中间体与H
‑
Pro
‑
OH进行偶联反应，得到化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH。
[0017]优选地，所述化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH的合成方法中：
[0018]所述Z
‑
β
‑
Ala
‑
OH和HONb的摩尔比均为1:1.0～1.2；
[0019]所述Z
‑
β
‑
Ala
‑
OH和HOSu的摩尔比为1:1.0～1.2；
[0020]优选地，所述非质子性溶剂为N，N
‑
二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二恶烷、二甲基亚砜、乙腈、四氯化碳、甲苯、氯仿或二氯甲烷；
[0021]优选地，所述非质子性溶剂为自N，N
‑
二甲基甲酰胺；
[0022]优选地，所述缩合剂为EDC
·
HCl、DCC或DIC；
[0023]优选地，所述缩合剂为EDC
·
HCl；...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种类蛇毒三肽的液相片段合成方法，其特征在于，包括如下步骤：合成化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH；合成化合物Fmoc
‑
DAB(Z)
‑
NHBzl；脱除化合物Fmoc
‑
DAB(Z)
‑
NHBzl的Fmoc保护基，得到化合物NH2‑
DAB(Z)
‑
NHBzl；以化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH和NH2‑
DAB(Z)
‑
NHBzl原料，合成化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB(Z)
‑
NHBzl；脱除化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB(Z)
‑
NHBzl的Z保护基，得到化合物H
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB
‑
NHBzl
·
2HBr；对H
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB
‑
NHBzl
·
2HBr进行纯化转盐，得到H
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
DAB
‑
NHBzl。2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH的合成方法为：以化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
OH和HONb或Z
‑
β
‑
Ala
‑
OH和HOSu为原料，在非质子性溶剂中，在缩合剂作用下进行活化反应，得到中间体Z
‑
β
‑
Ala
‑
ONb或Z
‑
β
‑
Ala
‑
OSu；在碱的作用下，中间体与H
‑
Pro
‑
OH进行偶联反应，得到化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH。3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，所述化合物Z
‑
β
‑
Ala
‑
Pro
‑
OH的合成方法中：所述Z
‑
β
‑
Ala
‑
OH和HONb的摩尔比均为1:1.0～1.2；所述Z
‑
β
‑
Ala
‑
OH和HOSu的摩尔比为1:1.0～1.2；优选地，所述非质子性溶剂为N，N
‑
二甲基甲酰胺、四氢呋喃、二恶烷、二甲基亚砜、乙腈、四氯化碳、甲苯、氯仿或二氯甲烷；优选地，所述非质子性溶剂为自N，N
‑
二甲基甲酰胺；优选地，所述缩合剂为EDC
·
HCl、DCC或DIC；优选地，所述缩合剂为EDC
·
HCl；优选地，所述活化反应的反应温度为室温，反应时间为2～4h；优选地，所述Z
‑
β
‑
Ala
‑
ONb或Z
‑
β
‑
Ala
‑
OSu和H
‑
Pro
‑
OH的摩尔比为1:1.0～1.2；优选地，所述碱为碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾、碳酸钾、三乙胺、N
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甲基吗啡、DIPEA或2,4,6
‑
三甲基吡啶；优选地，所述碱为碳酸氢钠；优选地，所述偶联反应的反应温度为室温，反应时间为2～4h。4.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述化合物Fmoc
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DAB(Z)
‑
NHBzl的合成方法为：以化合物Fmoc
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DAB(Z)
‑
OH和苄胺为原料，在非质子性溶剂中，在偶联剂的作用下进行偶联反应，得到Fmoc
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DAB(Z)
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NHBzl。5.根据权利要求4所述的合成方法，其特征在于，所述化合物Fmoc
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DAB(Z)
‑
NHBzl的合成方法中...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈浩明，胡峰，俞金钊，袁慧星，尹传龙，唐洋明，余品香，
申请(专利权)人：深圳翰宇药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：