类蛇毒三肽的制备方法技术

本发明专利技术公开了类蛇毒三肽的制备方法，通过Boc

【技术实现步骤摘要】
类蛇毒三肽的制备方法


[0001]本专利技术涉及化工合成领域，特别是涉及类蛇毒三肽的制备方法。

技术介绍

[0002]类蛇毒三肽(H-β-Ala-Pro-DAB-NH-Bzl)是一种模拟蛇毒毒素WaglerinI活性的小肽，WaglerinI发现于Temple Viper毒蛇的毒液(Tripidolaemus wagleri)，为肌肉烟碱乙酰胆碱受体(nmAChR)拮抗剂。H-β-Ala-Pro-DAB-NH-Bzl最早是由DSM荷兰皇家帝斯曼集团全资子公司PENTAPHARM通过高科技生化科技，模仿有效分子蛋白(Waglerin1)的片段合成得到，其化学结构与毒蛇血清相似，但是相比肉毒杆菌却更安全有效，故可安全应用到化妆品中，具有优秀的光滑肌肤、迅速祛皱性能。
[0003]目前常规合成类蛇毒三肽(H-β-Ala-Pro-DAB-NH-Bzl)的方法大多采用固相、液相相结合的方法，合成过程比较繁杂、成本高，为了在一定程度上简化工艺，研究者们开发了全液相合成类蛇毒三肽的方法，比如专利CN107936108A公开了如下合成路线：
[0004][0005]该方法将Boc-β-Ala-OH、N-乙基-5-苯基异噁唑-3
’-
磺酸内盐和H-Pro-OMe-HCl反应得Boc-β-Ala-Pro-OMe，Boc-β-Ala-Pro-OMe与LiOH反应得Boc-β-Ala-Pro-OH；然后采用相同方法以Boc-β-Ala-Pro-OH和H-DAB(Boc)-OMe-HCl合成Boc-β-Ala-Pro DAB(Boc)-OH；
再将Boc-β-Ala-Pro-DAB(Boc)-OH、1-羟基苯丙三唑、N,N-二异丙基碳二亚胺和苄胺反应得Boc-β-Ala-Pro-DAB(Boc)-NH-Bzl，最后用三氟乙酸脱去Boc保护基并经HPLC分离纯化，得到纯度98％左右的类蛇毒三肽，总产率仅为38％左右，且合成路线较长，处理步骤繁琐，合成过程中许多试剂的用量较大。
[0006]专利CN107857797A公开了另一种合成类蛇毒三肽的方法，合成线路如下：
[0007][0008]该方法总产率也仅为30％左右，且仍需HPLC分离纯化处理后才能得到纯度较高的类蛇毒三肽产品，合成步骤长，操作繁琐。
[0009]由此可以看出，目前合成类蛇毒三肽的方法存在着产量低，合成工艺繁琐等问题，进而直接导致了实际生产中成本较高的问题。
[0010]因此，开发工艺简便、产量高、成本低的类蛇毒三肽合成方法对类蛇毒三肽是生产及其在化妆品领域的应用具有重要意义。

技术实现思路

[0011]本专利技术主要解决的技术问题是提供一种类蛇毒三肽的制备方法，能够高效合成类蛇毒三肽，工艺简单，产率高。
[0012]为解决上述技术问题，本专利技术采用的一个技术方案是：
[0013]本专利技术提供Boc-beta-Ala-Pro-Dab(Boc)-NHBn的制备方法，包括如下内容：由Boc-beta-Ala-Pro-OH与H-Dab(Boc)-NHBn进行氨基酸脱水缩合反应得到：
[0014][0015]进一步地，Boc-beta-Ala-Pro-OH：H-Dab(Boc)-NHBn的摩尔用量比为1.0～1.5：1.0，优选1.1：1.0。
[0016]进一步地，反应条件包括第一缩合剂；进一步地，所述第一缩合剂选自DIC、DCC、EDCI中的一种或几种，优选DIC；
[0017]进一步地，所述第一缩合剂：H-Dab(Boc)-NHBn的摩尔用量比为1.0～1.5：1.0，优选1.2：1.0。
[0018]进一步地，反应的溶剂为第一溶剂，所述第一溶剂选自DCM、EtOAc、THF中的一种或几种，优选DCM。
[0019]进一步地，H-Dab(Boc)-NHBn：第一溶剂的质量用量比为1：15～30；进一步为1：20。
[0020]进一步地，反应结束后将反应液分别用碱性水溶液、酸性水溶液洗、水洗涤，洗涤后固液分离，固形物用乙酸乙酯：石油醚质量比0.8～1.2：0.8～1.2的有机溶剂结晶纯化。
[0021]所述结晶纯化是合成工艺中常用的纯化方法，即先通过升温等手段将固形物完全溶解在溶剂中，再通过降温等手段使其析出固体。
[0022]所述碱性水溶液指呈碱性的水溶液，所述酸性水溶液指呈酸性的水溶液，不限定溶质，只要是不与产物Boc-beta-Ala-Pro-Dab(Boc)-NHBn发生反应的碱性水溶液或酸性水溶液均适用。
[0023]进一步地，所述碱性水溶液为质量分数为2～10％的碳酸钠水溶液，优选质量分数为5％的碳酸钠水溶液。
[0024]进一步地，所述酸性水溶液为质量分数为2～10％的柠檬酸水溶液，优选质量分数为5％的柠檬酸水溶液。
[0025]进一步地，所述有机溶剂的质量用量为H-Dab(Boc)-NHBn质量的15～25倍，进一步为20倍。
[0026]在本专利技术中，结晶纯化是先将固形物和有机溶剂混合，升温至固形物完全溶解，再降温，析出固体。通常情况下，升温至60℃左右固形物可完全溶解。
[0027]在本专利技术的具体实施例中，是将固形物和乙酸乙酯：石油醚质量比1：1的有机溶剂混合后，升温至固形物完全溶解，再降温，析出固体。
[0028]进一步地，所述H-Dab(Boc)-NHBn是通过Fmoc-Dab(Boc)-OH与苄胺进行氨基酸脱水缩合反应，再脱除Fmoc基团得到：
[0029][0030]氨基酸分子结合的方式是由一个氨基酸分子的羧基(—COOH)和另一个氨基酸分子的氨基(—NH2)结合连接，同时脱去一分子水，这种结合方式叫做氨基酸脱水缩合。
[0031]进一步地，Fmoc-Dab(Boc)-OH：苄胺的摩尔用量比为0.8～1.2：0.8～1.2，优选1：1。
[0032]进一步地，Fmoc-Dab(Boc)-OH与苄胺的氨基酸脱水缩合反应的条件包括第二缩合剂；进一步地，所述第二缩合剂选自DIC、DCC、EDCI、HOBT、CDI、HBTU、HATU中的一种或几种，优选DIC和/或HOBT，或选自EDCI；更优选DIC和HOBT，DIC：HOBT摩尔用量比为1：1。
[0033]进一步地，所述第二缩合剂：Fmoc-Dab(Boc)-OH的摩尔比用量为1.0～3.0：1.0，优选1.2～2.4：1.0。
[0034]进一步地，Fmoc-Dab(Boc)-OH与苄胺的氨基酸脱水缩合反应的溶剂为第二溶剂，所述第二溶剂选自DCM、THF、乙腈中的一种或几种，优选DCM和/或THF，更优选DCM。
[0035]进一步地，Fmoc-Dab(Boc)-OH：第二溶剂的质量用量比为1：5～15，优选1：10。
[0036]脱除Fmoc基团是常见的保护基团的脱除，本领域已知的脱除Fmoc基团的方法均可应用于本专利技术。
[0037]在本专利技术的具体实施方式中，是将Fmo本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Boc-beta-Ala-Pro-Dab(Boc)-NHBn的制备方法，其特征在于，包括如下内容：由Boc-beta-Ala-Pro-OH与H-Dab(Boc)-NHBn进行氨基酸脱水缩合反应得到：2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，Boc-beta-Ala-Pro-OH：H-Dab(Boc)-NHBn的摩尔用量比为1.0～1.5：1.0，优选1.1：1.0。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，反应条件包括第一缩合剂；进一步地，所述第一缩合剂选自DIC、DCC、EDCI中的一种或几种，优选DIC；进一步地，所述第一缩合剂：H-Dab(Boc)-NHBn的摩尔用量比为1.0～1.5：1.0，优选1.2：1.0；进一步地，反应的溶剂为第一溶剂，所述第一溶剂选自DCM、EtOAc、THF中的一种或几种，优选DCM；进一步地，H-Dab(Boc)-NHBn：第一溶剂的质量用量比为1：15～30；进一步为1：20。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，反应结束后将反应液分别用碱性水溶液、酸性水溶液洗、水洗涤，洗涤后固液分离，固形物用乙酸乙酯：石油醚质量比0.8～1.2：0.8～1.2的有机溶剂结晶纯化；进一步地，所述碱性水溶液为质量分数为2～10％的碳酸钠水溶液，优选质量分数为5％的碳酸钠水溶液；进一步地，所述酸性水溶液为质量分数为2～10％的柠檬酸水溶液，优选质量分数为5％的柠檬酸水溶液；进一步地，所述有机溶剂的质量用量为H-Dab(Boc)-NHBn质量的15～25倍，进一步为20倍；更进一步地，乙酸乙酯：石油醚的质量比为1：1。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述H-Dab(Boc)-NHBn是通过Fmoc-Dab(Boc)-OH与苄胺进行氨基酸脱水缩合反应，再脱除Fmoc基团得到：进一步地，Fmoc-Dab(Boc)-OH：苄胺的摩尔用量比为0.8～1.2：0.8～1.2，优选1：1。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，Fmoc-Dab(Boc)-OH与苄胺的氨基酸脱水缩合反应的条件包括第二缩合剂；进一步地，所述第二缩合剂选自DIC、DCC、EDCI、HOBT、CDI、HBTU、HATU中的一种或几种，优选DIC和/或HOBT，或选自EDCI；更优选DIC和HOBT，DIC：HOBT摩尔用量比为1：1；
进一步地，所述第二缩合剂：Fmoc-Dab(Boc)-OH的摩尔用量比为1.0～3.0：1.0，优选1.2～2.4：1.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄永学，蒋健雄，周虎，龚瑜，田军，
申请(专利权)人：成都永泰诺科技有限公司，
类型：发明
国别省市：