【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用编码阿柏西普的AAV2变体治疗眼新血管疾病的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年9月11日提交的美国临时专利申请号62/899,070、2019年10月10日提交的美国临时专利申请号62/913,648、2019年11月18日提交的国际申请号PCT/US2019/062066、2020年1月10日提交的美国临时专利申请号62/959,784、2020年2月7日提交美国临时专利申请号62/971,835、2020年5月1日提交的美国临时专利申请号63/019,190、2020年5月27日提交的美国临时专利申请号63/030,819和2020年8月7日提交的美国临时专利申请号63/063,203的权益,将其各自的公开内容通过通过引用整体并入本文。
[0003]本公开内容涉及治疗个体中的眼新血管疾病和病症的方法,其包括向个体的眼部施用单一单位剂量的编码抗
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VEGF试剂(例如,阿柏西普(flibercept))重组腺相关病毒(rAAV)颗粒。
[0004]ASCII文本文件的序列表的提交
[0005]将以下提交的ASCII文本文件的内容通过引用整体并入本文:序列表的计算机可读形式(CRF)(文件名称:627002001241SEQLIST.TXT,记录日期:2020年9月9日,大小:41KB)。
技术介绍
[0006]年龄相关性黄斑变性(AMD)是一种影响黄斑的退化性眼病,黄斑是视网膜中心负责阅读和精细视力的光敏小区域。影响黄斑的病症降 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于治疗个体中的眼新血管疾病的方法,所述方法包括向所述个体的一只眼睛施用单位剂量的约6
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个载体基因组(vg)或更少的重组腺相关病毒(rAAV)颗粒,其中所述个体为人类,并且其中所述rAAV颗粒包含:a)编码多肽且侧接AAV2反向末端重复序列(ITR)的核酸,所述多肽包含与SEQ ID NO:35的氨基酸序列具有至少约95%同一性的氨基酸序列,和b)AAV2衣壳蛋白,其包含插入在所述衣壳蛋白的位置587和588之间的氨基酸序列LGETTRP(SEQ ID NO:14),其中所述氨基酸残基编号对应于AAV2 VP1衣壳蛋白。2.权利要求1的方法,其中所述患有眼新血管疾病的个体的眼睛中的视网膜流体减少。3.一种用于减少患有眼新血管疾病的个体的眼睛中的视网膜流体的方法,所述方法包括向所述个体的一只眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒,其中所述个体为人类,并且其中所述rAAV颗粒包含:a)编码多肽且侧接AAV2反向末端重复序列(ITR)的核酸,所述多肽包含与SEQ ID NO:35的氨基酸序列具有至少约95%同一性的氨基酸序列,和b)AAV2衣壳蛋白,其包含插入在所述衣壳蛋白的位置587和588之间的氨基酸序列LGETTRP(SEQ ID NO:14),其中所述氨基酸残基编号对应于AAV2 VP1衣壳蛋白。4.权利要求3的方法,其中所述个体在施用单位剂量的rAAV颗粒之前约12周内已经接受至少一种抗VEGF试剂的治疗。5.权利要求3或权利要求4的方法,其中所述个体的一只眼睛中的视网膜流体的量或存在对使用抗VEGF试剂的先前治疗是难治性的。6.权利要求4或权利要求5的方法,其中所述抗VEGF试剂为阿柏西普。7.权利要求2
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6中任一项的方法,其中所述一只眼睛中的视网膜流体减少了至少约60%。8.权利要求2
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7中任一项的方法,其中与向所述个体施用rAAV之前的所述个体的一只眼睛中的视网膜流体的水平相比,所述一只眼睛中的视网膜流体减少约80%。9.权利要求2
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8中任一项的方法,其中所述视网膜流体为视网膜下流体(SRF)或视网膜内流体(IRF)。10.权利要求3
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9中任一项的方法,其中所述单位剂量的颗粒为约6
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个载体基因组/眼睛(vg/眼睛)或更少。11.一种用于治疗个体中的眼新血管疾病的方法,所述方法包括:(a)向所述个体的一只眼睛施用抗
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VEGF试剂;和(b)在施用所述抗VEGF试剂之后,向所述个体的一只眼睛施用约6
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个载体基因组(vg)或更少的单位剂量的重组腺相关病毒(rAAV)颗粒,其中所述个体为人类,并且其中所述rAAV颗粒包含:(i)编码多肽且侧接AAV2反向末端重复序列(ITR)的核酸,所述多肽包含与SEQ ID NO:35的氨基酸序列具有至少约95%同一性的氨基酸序列,和(ii)AAV2衣壳蛋白,其包含插入在所述衣壳蛋白的位置587和588之间的氨基酸序列LGETTRP(SEQ ID NO:14),其中所述氨基酸残基编号对应于AAV2 VP1衣壳蛋白。12.权利要求11的方法,其包括在施用所述抗VEGF试剂之后约1周或约7天,向所述个体的一只眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒。13.权利要求11或权利要求12的方法,其包括在第1天向所述个体的一只眼睛施用所述
抗
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VEGF试剂,和在第8天向所述个体的一只眼睛施用所述单位剂量的rAAV颗粒。14.权利要求11
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13中任一项的方法,其中所述抗
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VEGF试剂包含阿柏西普。15.权利要求14的方法,其中所述阿柏西普是以约2mg的剂量通过玻璃体内注射施用。16.权利要求1
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15中任一项的方法,其中所述单位剂量的rAAV颗粒为在约6
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至约6
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个载体基因组/眼睛(vg/眼睛)之间。17.权利要求1
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16中任一项的方法,其中所述单位剂量的rAAV颗粒为在约6
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至约2
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个载体基因组/眼睛(vg/眼睛)之间。18.权利要求1
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16中任一项的方法,其中所述单位剂量的rAAV颗粒为在约2
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至约6
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个载体基因组/眼睛(vg/眼睛)之间。19.权利要求18的方法,其中所述单位剂量的rAAV颗粒为约2
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个载体基因组/眼睛(vg/眼睛)。20.权利要求19的方法,其中所单位剂量的rAAV颗粒为约2
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个载体基因组/眼睛(vg/眼睛)。21.权利要求19的方法,其中所述单位剂量的rAAV颗粒为约6
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个载体基因组/眼睛(vg/眼睛)。22.权利要求1
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21中任一项的方法,其中所述个体在对侧眼睛中具有眼新血管疾病的一种或多种症状。23.权利要求1
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22中任一项的方法,其进一步包括向所述个体的对侧眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒。24.权利要求23的方法,其中向所述对侧眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒是在向所述一只眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒之后至多约2周。25.权利要求24的方法,其中:(a)向所述对侧眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒是在与向所述一只眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒的同一天;或(b)向所述对侧眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒是在向所述一只眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒之后约1天至约14天之间。26.权利要求24或权利要求25的方法,其中与向所述个体的一只眼睛施用的单位剂量的rAAV颗粒相比,向所述个体的对侧眼睛施用的单位剂量的rAAV颗粒包含相同或更少的载体基因组/眼睛(vg/眼睛)。27.权利要求23的方法,其中所述向对侧眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒是在向所述一只眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒之后至少约2周。28.权利要求27的方法,其中与向所述个体的一只眼睛施用的单位剂量的rAAV颗粒相比,向所述个体的对侧眼睛施用的单位剂量的rAAV颗粒包含更多的载体基因组/眼睛(vg/眼睛)。29.权利要求1
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28中任一项的方法,其中所述核酸包含SEQ ID NO:40的核酸序列或与其具有至少85%同一性的序列。30.权利要求1
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29中任一项的方法,其中所述多肽包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列。31.权利要求1
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30中任一项的方法,其中所述多肽包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列。32.权利要求1
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31中任一项的方法,其中所述多肽为阿柏西普。
33.权利要求1
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32中任一项的方法,其中所述核酸进一步包含第一增强子区、启动子区5'UTR区、第二增强子区和腺苷酸化位点。34.权利要求1
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33中任一项的方法,其中所述核酸以5
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至3
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顺序包含:(a)第一增强子区;(b)启动子区;(c)5'UTR区;(d)编码多肽的核酸,所述多肽包含与SEQ ID NO:35的氨基酸序列具有至少约95%同一性的氨基酸序列;(e)第二增强子区;和(f)腺苷酸化位点;并且侧接AAV2反向末端重复序列(ITR)。35.权利要求33或权利要求34的方法,其中所述第一增强子区包含CMV序列,所述CMV序列包含SEQ ID NO:22的序列或与其具有至少85%同一性的序列。36.权利要求33
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35中任一项的方法,其中所述启动子区包含CMV序列,所述CMV序列包含SEQ ID NO:23的序列或与其具有至少85%同一性的序列。37.权利要求34
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36中任一项的方法,其中所述核酸编码多肽,所述多肽包含SEQ ID NO:40的核酸序列或与其具有至少85%同一性的核酸序列。38.权利要求34
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37中任一项的方法,其中所述多肽包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列或与其具有至少95%同一性的序列。39.权利要求34
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38中任一项的方法,其中所述多肽包含SEQ ID NO:41的氨基酸序列或与其具有至少95%同一性的序列。40.权利要求34
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39中任一项的方法,其中所述多肽为阿柏西普。41.权利要求33
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40中任一项的方法,其中所述5'UTR区以5'至3'顺序包含TPL序列和eMLP序列,所述TPL序列包含SEQ ID NO:24的序列或与其具有至少85%同一性的序列,所述eMLP序列包含SEQ ID NO:25的序列或与其具有至少85%同一性的序列。42.权利要求33
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41中任一项的方法,其中所述第二增强子区包含含有SEQ ID NO:26的序列或与其具有至少85%同一性的序列的完整EES序列。43.权利要求33
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42中任一项的方法,其中所述聚腺苷酸化位点包含含有SEQ ID NO:27的序列或与其具有至少85%同一性的序列的HGH聚腺苷酸化位点。44.权利要求1
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32中任一项的方法,其中所述核酸进一步包含(a)第一增强子区,其包含含有SEQ ID NO:22的序列或与其具有至少85%同一性的序列的CMV序列;(b)启动子区,其包含含有SEQ ID NO:23的序列或与其具有至少85%一致性的序列的CMV序列;(c)5'UTR区,其以5'至3'顺序包含TPL序列和eMLP序列,所述TPL序列包含SEQ ID NO:24的序列或与其具有85%同一性的序列,所述eMLP序列包含SEQ ID NO:25的序列或与其具有85%同一性的序列;(d)第二增强子区,其包含完整EES序列,所述完整EES序列包含SEQ ID NO:26的序列或与其具有至少85%同一性的序列;和(e)HGH多聚腺苷酸化位点,其包含SEQ ID NO:27的序列或与其具有至少85%同一性的序列。45.权利要求1
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44中任一项的方法,其中所述核酸包含SEQ ID NO:39的核酸序列或与其具有至少85%同一性的序列。
46.权利要求1
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45中任一项的方法,其中所述AAV2衣壳蛋白包含插入在所述衣壳蛋白的位置587和588之间的氨基酸序列LALGETTRPA(SEQ ID NO:1),其中氨基酸残基编号对应于AAV2VP1衣壳蛋白。47.权利要求1
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46中任一项的方法,其中所述AAV2衣壳蛋白包含插入在包含SEQ ID NO:13的序列的AAV2 VP1的位置587和588之间的氨基酸序列LGETTRP(SEQ ID NO:14)。48.权利要求1
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47中任一项的方法,其中所述AAV2衣壳蛋白包含插入在包含SEQ ID NO:13的序列的AAV2 VP1的位置587和588之间的氨基酸序列LALGETTRPA(SEQ ID NO:1)。49.权利要求1
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46中任一项的方法,其中所述rAAV颗粒包含AAV2 VP1衣壳蛋白,其包含含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列或与SEQ ID NO:38的序列具有至少90%序列同一性的氨基酸序列的GH环。50.权利要求1
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49中任一项的方法,其中所述向一只眼睛和/或对侧眼睛施用单位剂量的rAAV颗粒是通过玻璃体内施用。51.权利要求1
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50中任一项的方法,其中所述单位剂量的rAAV颗粒是以...
【专利技术属性】
技术研发人员:M,
申请(专利权)人:阿德夫拉姆生物技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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