腺相关病毒及其用于内耳疗法的用途制造技术

本文提供了腺相关病毒及其用于治疗或预防影响受试者内耳的病症的用途。防影响受试者内耳的病症的用途。防影响受试者内耳的病症的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】腺相关病毒及其用于内耳疗法的用途
[0001]优先权相关申请
[0002]本申请要求于2018年12月21日提交的美国临时专利申请No.62/784306的权益，该申请通过引用在此整体并入。

技术介绍

[0003]听力损失是影响现今世界人口的最常见的失能之一。根据国家健康和营养检查调查(the National Health and Nutritional Examination Survey)，近三分之二的70岁及以上的美国成年人患有听力损失。听力损失与内耳毛细胞损伤有关。内耳基因疗法是一种很有前途的治疗方法，它可以潜在地预防和逆转毛细胞损伤。虽然腺相关病毒载体(AAV)介导的内耳基因疗法已应用于遗传性听力损失的动物模型以改善听觉功能，但某些内耳毛细胞的感染效率较低。此外，传统AAVs对内耳中的支持细胞的感染效率也较低。为使内耳基因疗法有效地治疗听力损失，需要感染效率更高的病毒载体。

技术实现思路

[0004]本公开涉及用于治疗或预防影响受试者内耳的疾病或病症的组合物和方法。专利技术人已发现包含修饰的AAV衣壳蛋白的重组AAV能够感染内耳毛细胞，从而有效地将遗传物质传递到受试者的内耳毛细胞中。在一些实施方式中，本文提供的组合物和方法可用于治疗或预防受试者的听力损失和/或眩晕。
[0005]在一些实施方式中，本公开提供了重组腺相关病毒(AAV)病毒粒子，其包含：(a)修饰的AAV衣壳蛋白，其中该修饰的AAV衣壳蛋白相对于相应的亲本AAV衣壳蛋白包含肽插入，其中所述肽插入包含氨基酸序列LGETTRP(SEQ ID NO：1)，其中该修饰的AAV衣壳蛋白中的插入在对应于AAV2的VP1的氨基酸587和588的氨基酸之间；以及(b)产生表达产物的异源核酸，其中该表达产物减少听力损失和/或眩晕。
[0006]在一些实施方式中，表达产物是降低与听力损失和/或眩晕相关基因的表达的核酸，其中与听力损失和/或眩晕相关的基因选自下组：DIAPH1、KCNQ4、GJB3、IFNLR1、GJB2、GJB6、MYH1、CEACAM16、GSDME/DFNA5、WFS1、LMX1A、TECTA、COCH、EYA4、MYO7A、COL11A2、POU4F3、MYH9、ACTG1、MYO6、SIX1、SLC17A8、REST、GRHL2、NLRP3、TMC1、COL11A1、CRYM、P2RX2、CCDC50、MIRN96、TJP2、TNC、SMAC/DIABLO、TBC1D24、CD164、OSBPL2、HOMER2、KITLG、MCM2、PTPRQ、DMXL2、MYO3A和PDE1C。
[0007]在一些实施方式中，表达产物是减少听力损失和/或眩晕的多肽，其中该多肽选自下组：GJB2、GJB6、MYO7A、MYO15A、SLC26A4、TMIE、TMC1、TMPRSS3、OTOF、CDH23、GIPC3、STRC、USH1C、OTOG、TECTA、OTOA、PCDH15、RDX、GRXCR1、TRIOBP、CLDN14、MYO3A、WHRN、CDC14A、ESRRB、ESPN、MYO6、HGF、ILDR1、ADCY1、CIB2、MARVELD2、BDP1、COL11A2、PDZD7、PJVK、SLC22A4、SLC26A5、LRTOMT/COMT2、DCDC2、LHFPL5、S1PR2、PNPT1、BSND、MSRB3、SYNE4、LOXHD1、TPRN、GPSM2、PTPRQ、OTOGL、TBC1D24、ELMOD3、KARS、SERPINB6、CABP2、NARS2、MET、TSPEAR、TMEM132E、PPIP5K2、GRXCR2、EPS8、CLIC5、FAM65B、DFNB32、EPS8L2、ROR1、WBP2、
ESRP1、MPZL2、PRPS1、POU3F4、SMPX、AIFM1和COL4A。
[0008]在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子选自下组：AAV2、AAV5、AAV8和AAV9。在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子是包含经修饰的AAV2
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VP1衣壳蛋白的AA2病毒粒子，例如AAV2.7m8病毒粒子。
[0009]在一些实施方式中，表达产物是减少与听力损失相关基因的表达的核酸，是干扰RNA。在一些实施方式中，干扰RNA是反义分子、短干扰RNA或miRNA。
[0010]在一些实施方式中，AAV病毒粒子产生如下的表达产物：该表达产物减少年龄相关的听力损失、遗传性听力损失、噪声诱导的听力损失、疾病相关性听力损失或外伤所致的听力损失。
[0011]在另一实施方式中，本公开提供了用于治疗或预防受试者的内耳毛细胞损伤的方法，包括向具有或有风险发生内耳毛细胞损伤的受试者施用有效量的本文所述的任何重组AAV病毒粒子。
[0012]在一些实施方式中，受试者具有或有风险发生年龄相关的听力损失、遗传性听力损失、噪声诱导的听力损失、疾病相关性听力损失和外伤所致的听力损失。
[0013]在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子感染耳蜗的内毛细胞和外毛细胞。在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子感染耳蜗中的胶质样支持细胞。在一些实施方式中，支持细胞为内柱细胞或内指细胞。
[0014]在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子增加内耳毛细胞再生，例如，耳蜗毛细胞再生。
[0015]在另一实施方式中，本公开还提供了用于治疗或预防受试者的听力损失和/或眩晕的方法，包括向具有或有风险发生听力损失和/或眩晕的受试者施用有效量的本文所述的任何重组AAV病毒粒子。
[0016]在一些实施方式中，具有或有风险发生听力损失的受试者是如下的受试者：该受试者具有或有风险发生年龄相关的听力损失、遗传性听力损失、噪声诱导的听力损失、疾病相关性听力损失和外伤所致的听力损失。
[0017]在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子感染受试者的内耳毛细胞，该受试者具有或有风险发生听力损失。在一些实施方式中，内耳毛细胞是耳蜗的内毛细胞和/或外毛细胞。在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子感染受试者的耳蜗中的胶质样支持细胞。在一些实施方式中，支持细胞为内柱细胞/或内指细胞。在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子增加内耳毛细胞再生，例如，耳蜗毛细胞再生。
[0018]在本文提供的任何方法中，重组AAV病毒粒子能够经静脉内施用，经鞘内施用，经鼓膜内(intratypmanically)施用，经圆窗施用，经半规管递送施用，或经镫骨足板造孔术(stapedotomy)施用。在一些实施方式中，重组AAV病毒粒子经由经管造口术施用到受试者的后半规管中。
附图说明
[0019]本专利技术包括以下附图。附图旨在说明组合物和方法的某些实施方式和/或特征，并且补充组合物和方法的任何描述。除非书面描述中明确表示情况如此，否则附图不会限制组合物和方法的范围。
[0020]图1a
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1h显示，AAV2.7m8高效地感染耳蜗内毛细胞和外毛细胞。(a
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f)当将AAV本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.重组腺相关病毒(AAV)病毒粒子，包含：a)修饰的AAV衣壳蛋白，其中所述修饰的AAV衣壳蛋白相对于相应的亲本AAV衣壳蛋白包含肽插入，其中所述肽插入包含氨基酸序列LGETTRP(SEQ ID NO：1)，其中所述修饰的AAV衣壳蛋白中的插入在对应于AAV2
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VP1的氨基酸587和588的氨基酸之间；以及b)产生表达产物的异源核酸，其中所述表达产物减少听力损失或眩晕。2.权利要求1的重组AAV病毒粒子，其中所述表达产物是降低与听力损失相关基因的表达的核酸，其中所述基因选自下组：DIAPH1、KCNQ4、GJB3、IFNLR1、GJB2、GJB6、MYH1、CEACAM16、GSDME/DFNA5、WFS1、LMX1A、TECTA、COCH、EYA4、MYO7A、COL11A2、POU4F3、MYH9、ACTG1、MYO6、SIX1、SLC17A8、REST、GRHL2、NLRP3、TMC1、COL11A1、CRYM、P2RX2、CCDC50、MIRN96、TJP2、TNC、SMAC/DIABLO、TBC1D24、CD164、OSBPL2、HOMER2、KITLG、MCM2、PTPRQ、DMXL2、MYO3A和PDE1C。3.权利要求1的重组AAV病毒粒子，其中所述表达产物是减少听力损失的多肽，其中所述多肽选自下组：GJB2、GJB6、MYO7A、MYO15A、SLC26A4、TMIE、TMC1、TMPRSS3、OTOF、CDH23、GIPC3、STRC、USH1C、OTOG、TECTA、OTOA、PCDH15、RDX、GRXCR1、TRIOBP、CLDN14、MYO3A、WHRN、CDC14A、ESRRB、ESPN、MYO6、HGF、ILDR1、ADCY1、CIB2、MARVELD2、BDP1、COL11A2、PDZD7、PJVK、SLC22A4、SLC26A5、LRTOMT/COMT2、DCDC2、LHFPL5、S1PR2、PNPT1、BSND、MSRB3、SYNE4、LOXHD1、TPRN、GPSM2、PTPRQ、OTOGL、TBC1D24、ELMOD3、KARS、SERPINB6、CABP2、NARS2、MET、TSPEAR、TMEM132E、PPIP5K2、GRXCR2、EPS8、CLIC5、FAM65B、DFNB32、EPS8L2、ROR1、WBP2、ESRP1、MPZL2、PRPS1、POU3F4、SMPX、AIFM1和COL4A。4.权利要求1
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3中任一项的重组AAV病毒粒子，其中所述AAV病毒粒子是AAV2病毒粒子、AAV5病毒粒子、AAV8病毒粒子或AAV9病毒粒子。5.权利要求1
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4中任一项的重组AAV病毒粒子，其中所述AAV病毒粒子是AAV2.7m8病毒粒子...

【专利技术属性】
技术研发人员：WW钱，琼贝内特，
申请(专利权)人：宾夕法尼亚大学理事会，
类型：发明
国别省市：