肠癌类器官培养液、培养试剂组合及培养方法技术

本申请涉及生物组织工程技术领域，公开一种肠癌类器官培养液、培养试剂组合及培养方法，所述肠癌类器官培养液包括条件培养基、基础培养基、复合抗生素和生长因子。其中，复合抗生素包括Primocin，青霉素

【技术实现步骤摘要】
肠癌类器官培养液、培养试剂组合及培养方法


[0001]本申请涉及生物组织工程
，例如涉及一种肠癌类器官培养液、培养试剂组合及培养方法。

技术介绍

[0002]肠癌，包括结肠癌和直肠癌，是我国的十大恶性肿瘤之一。目前，肠癌的病因尚未完全清楚，目前认为主要是环境因素与遗传因素综合作用的结果。肠癌类器官，例如，结直肠癌类器官，是研究肠癌的优势模型。目前虽有一些肠癌类器官培养基的研究报道，但是其培养过程生长慢，增加时间投入成本。
[0003]在研发过程中，发现相关技术中至少存在如下问题：现有肠癌类器官的培养过程中，每次传代至少需要培养7天，甚至更多天，才达到传代要求。而且，获得的细胞量也非常少，为了收获更多的细胞，进行下游试验，需要时间更长，使得整个器官的构建过程缓慢，导致肠癌类器官研究的时间成本高。

技术实现思路

[0004]为了对披露的实施例的一些方面有基本的理解，下面给出了简单的概括。所述概括不是泛泛评述，也不是要确定关键／重要组成元素或描绘这些实施例的保护范围，而是作为后面的详细说明的序言。r/>[0005]本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肠癌类器官培养液，其特征在于，包括条件培养基、基础培养基、复合抗生素和生长因子；所述条件培养基与所述基础培养基的体积比为1～4﹕1；所述基础培养基包括优化后的杜氏改良Eagle培养基/营养混合物F
‑
12，4
‑
(2
‑
羟乙基)
‑1‑
哌嗪乙磺酸5～15mM和Glutamax0.5x～1.5x；所述复合抗生素包括Primocin50～500μg/mL，青霉素
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链霉素0.5x～1.5x和甲硝唑2～10μg/mL；所述生长因子包括：表皮细胞生长因子10～100ng/mL，成纤维细胞生长因子1010～100ng/mL，N20.25x～1.5x，B270.25x～1.5x，乙酰半胱氨酸1～2mM，烟酰胺5～20mM，Gastrin5～20nM，ProstaglandinE20.2～2μM，Y
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276325～15μM，HGF10～50ng/μL，IL
‑
65～40ng/μL，SDF13～30ng/μL；所述条件培养基包括两种或三种蛋白条件培养基，其中所述蛋白条件培养基选自Wnt蛋白家族3a型蛋白条件培养基，R
‑
spondin蛋白家族1型蛋白、R
‑
spondin3条件培养基和头蛋白条件培养基。2.根据权利要求1所述的肠癌类器官培养液，其特征在于，所述生长因子包括：表皮细胞生长因子50ng/mL，成纤维细胞生长因子1050ng/mL，N20.75x～1x，B270.75x～1x，乙酰半胱氨酸1.25～1.5mM，烟酰胺8～10mM，Gastrin8～10nM，ProstaglandinE20.5～1μM，Y
‑
276328～10μM，HGF20～30ng/μL，IL
‑
610～20ng/μL，SDF15～10ng/μL。3.根据权利要求1所述的肠癌类器官培养液，其特征在于，所所述复合抗生素包括Primocin100μg/mL，青霉素
‑
链霉素1x和甲硝唑4μg/mL。4.根据权利要求1、2或3所述的肠癌类器官培养液，其特征在于，所述条件培养基包括Wnt蛋白家族3a型蛋白条件培养基，R
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spondin蛋白家族1型蛋白、R
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spondin3条件培养基和头蛋白条件培养基；且所述Wnt蛋白家族3a型蛋白条件培养基、所述R
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spondin蛋白家族1型蛋白、R
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spondin3条件培养基和所述头蛋白条件培养基的体积比依次为0.1～0.8﹕1～2﹕1；或者，所述条件培养基包括R
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spondin蛋白家族1型蛋白、R
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spondin3条件培养基和头蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖荣荣，李珮文，刘建闯，孙艳廷，张晓会，周宇，
申请(专利权)人：北京大橡科技有限公司，
类型：发明
国别省市：