【技术实现步骤摘要】
一种肿瘤类器官形成能力的测定方法
[0001]本专利技术属于生物工程
,尤其涉及一种肿瘤类器官形成能力的测定方法。
技术介绍
[0002]肿瘤类器官(Tumor organoid)是一种在半固态基质凝胶中由具有干细胞属性的肿瘤细胞形成的多细胞三维(3D)结构,因在表型和功能上完好地保留了其来源(癌细胞和癌组织)特征,故可作为离体实验模型,应用于生物医学科学研究和药物研发等领域。目前,肿瘤类器官大多是取自患者标本制成细胞悬液,离心细胞悬液富集细胞后基于Matrigel
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的体外三维(3D)肿瘤类器官培养,所形成的肿瘤类器官称为患者肿瘤来源类器官(Patient
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derived tumor organoid;PDO)。然而,并非所有患者的肿瘤组织都能形成肿瘤类器官(PDO),经过培养后所看到的多细胞球体也未必都有持续增殖的能力,因此有必要对组织内癌细胞的类器官形成能力(Organoid Formation Potential;OFP)加以评估,以确定具有增殖能力的肿瘤类器官。
技术实现思路
[0003]本专利技术是为了解决现有技术所存在的上述技术问题,提供一种肿瘤类器官形成能力的测定方法。
[0004]本专利技术的技术解决方案是:一种肿瘤类器官形成能力的测定方法,依次按照如下步骤进行:步骤1:收集新鲜肿瘤样本;步骤2:对部分样本冰冻切片及苏木素/伊红组织学染色;步骤3:判断是否有肿瘤细胞存在,是,进行步骤4,否,返回步骤1;步骤4:将剩余样本处理成细胞悬 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种肿瘤类器官形成能力的测定方法,其特征在于依次按照如下步骤进行:步骤1:收集新鲜肿瘤样本;步骤2:对部分样本冰冻切片及苏木素/伊红组织学染色;步骤3:判断是否有肿瘤细胞存在,是,进行步骤4,否,返回步骤1;步骤4:将剩余样本处理成细胞悬液;步骤5:取部分细胞悬液台盼蓝染色并记录死活细胞数;步骤5:判断活细胞数与总细胞数相比是否大于10%,是,进行步骤6,否,剩余细胞悬液作废并返回步骤1;步骤6:离心剩余细胞悬液富集细胞;步骤7:基于Matrigel
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的体外三维肿瘤类器官培养;步骤8:观察并记录肿瘤类器官形成状态;步骤9:判断一周内是否有肿瘤类器官形成,是,...
【专利技术属性】
技术研发人员:罗微,陈国强,周丹,刘佳,李宏,叶海珊,李胜,
申请(专利权)人:华南理工大学广州精科生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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