人卵巢鳞癌细胞系及其应用制造技术

本发明专利技术公开了人卵巢鳞癌细胞系及其应用，其命名为人卵巢鳞癌细胞株ZOC254，于2021年11月3日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:C202159。本发明专利技术的人卵巢鳞癌细胞系性状稳定，可长期体外传代，具有较强的增殖活性，组织学分类为鳞癌，同源重组修复缺陷(HRD)阳性、肿瘤突变负荷高(TMB

【技术实现步骤摘要】
人卵巢鳞癌细胞系及其应用


[0001]本专利技术属于微生物动物细胞领域，具体涉及人卵巢鳞癌细胞系及其应用。

技术介绍

[0002]原发性卵巢鳞癌是一种发生于卵巢部位的鳞状细胞癌，是一种罕见的恶性肿瘤，发病率只占卵巢癌的0.5％。原发性卵巢鳞癌是由卵巢表面上皮细胞癌变形成，不伴有前提病变也排除其它器官转移。该病发病率低、进展快、预后差。其发病机制、病因仍不明确，临床表现无特异性，该疾病早期诊断困难，多数患者主诉腹痛、腹胀、便秘、尿频等晚期肿瘤压迫症状。术前无有效的辅助诊断方法，肿瘤组织病理学诊断是确诊的金标准。可误诊为良性肿瘤而延误治疗或未得到有效的手术治疗，放射治疗不敏感，药物治疗效果差，目前尚缺乏规范的诊疗。因此，迫切需要加强对卵巢鳞癌的发病机理和药物及其他治疗方法的研究。
[0003]人恶性肿瘤细胞系的建立，为了解肿瘤的生物学特征、研究其癌变、分子遗传以及转移演变机制等提供丰富的实验材料，从而为建立标准治疗模式提供帮助。原发性卵巢鳞癌发病率低、死亡率高，进行大样本的随机对照研究较困难，因此，建立和丰富原发性卵巢鳞癌细胞库尤为重要，建立可靠的卵巢鳞癌细胞系和动物模型是卵巢鳞癌研究的当务之急。
[0004]由于原发性卵巢鳞癌非常罕见，而鳞癌细胞建系成功率很低(例如，在肺癌中，非小细胞肺癌建系成功率2.6～36％，其中鳞状细胞癌仅有1.0～14％)，这些因素导致目前尚无商业化卵巢鳞癌细胞系。中国科学院细胞库、中国典型培养物保藏中心以及ATCC(American Type Culture Collection)中保藏的多以腹水收集的卵巢腺癌细胞系为主，如SK
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OV
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3、COC1、OVCAR3。由于不同病理类型的卵巢癌在发病机制、分子特征和药物疗效方面存在很大差异，卵巢鳞癌细胞系的缺乏，一定程度制约了卵巢鳞癌的相关临床前研究。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了一种人卵巢鳞癌细胞系及其应用。该人卵巢鳞癌细胞系性状稳定，可长期体外传代，具有较强的增殖活性，组织学分类为鳞癌，同源重组修复缺陷(HRD)阳性、肿瘤突变负荷高(TMB
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H)，并存在靶向治疗相关突变，具有致瘤性。该人卵巢鳞癌细胞系可作为有效的细胞模型且可以建立异种移植动物模型，可为深入研究卵巢鳞癌的发生、发展和转移机制，及耐药机理、药物筛选和药效评估等提供新的实验模型。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：
[0007]人卵巢鳞癌细胞系，命名为人卵巢鳞癌细胞株ZOC254，于2021年11月3日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC NO:C202159。
[0008]本专利技术还提供如上所述的人卵巢鳞癌细胞系的子代细胞系。
[0009]本专利技术的一些实施例中，如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系中，P53表达阳性，ER表达阴性，PR表达阴性，WT
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1表达阳性，p40表达阳性，p63表达阳性，PAX
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8表达阴性。
[0010]本专利技术的一些实施例中，如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系中，同源重组修复缺陷(Homologous recombination deficiency，HRD)状态检测呈阳性。
[0011]本专利技术的一些实施例中，如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系中，存在以下突变：PIK3CA:p.E542K。
[0012]本专利技术的一些实施例中，如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系中，肿瘤突变负荷(TMB)：TMB
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H、421Muts。
[0013]此外，本专利技术还提供了如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系的建立方法：获取卵巢鳞癌患者的癌组织标本进行酶消化原代培养，原代培养2～4周后，进行消化传代。
[0014]本专利技术还提供了如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系在作为人卵巢鳞癌细胞系的细胞模型中的应用。
[0015]本专利技术还提供了如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系在作为人卵巢鳞癌发生、人卵巢鳞癌发展、人卵巢鳞癌转移的细胞模型中的应用。
[0016]本专利技术还提供了如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系在研究人卵巢鳞癌的耐药机理、筛选治疗人卵巢鳞癌药物、预测对于人卵巢鳞癌的药物敏感性中的应用。
[0017]本专利技术还提供了如上所述人卵巢鳞癌细胞系或其子代细胞系在建立人卵巢鳞癌动物模型中的应用。
[0018]本专利技术中，通过光学形态观察发现该人卵巢鳞癌细胞株ZOC254贴壁细胞多边形、卵圆形，且细胞性状稳定，可稳定多次传代。通过对该人卵巢鳞癌细胞株ZOC254进行遗传物质STR分析，并在数据库中进行细胞株DNA分型检索，未发现与该细胞匹配的细胞系，鉴定其为新的单一细胞株，无其他细胞污染。通过细胞增殖实验，发现该人卵巢鳞癌细胞株ZOC254能大量扩增，具有较强的增殖活性。病理学鉴定表明ZOC254细胞系与人卵巢鳞癌标本组织形态相同，为癌组织来源细胞；免疫组化分析结果也进一步证明其为原发性卵巢鳞癌细胞株。免疫组化分析结果显示：该人卵巢鳞癌细胞株ZOC254的P53表达阳性，ER表达阴性，PR表达阴性，WT
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1表达阳性，p40表达阳性，p63表达阳性，PAX
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8阴性。
[0019]同时，靶向药物指标检测结果显示：该人卵巢鳞癌细胞株ZOC254的同源重组修复缺陷(HRD)状态检测呈阳性，并存在以下突变：PIK3CA:p.E542K。免疫药物指标检测结果显示：TMB
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H、421Muts。
[0020]此外，该人卵巢鳞癌细胞株ZOC254能在裸鼠体内形成肿瘤，具有致瘤性。
[0021]因此，该人卵巢鳞癌ZOC254细胞系可作为有效的细胞模型且可以建立异种移植动物模型，可为深入研究卵巢鳞癌的发生、发展和转移机制，以及研究耐药机理、药物筛选和药效评估等提供新的实验模型。
[0022]相比于现有技术，本专利技术的有益效果如下：
[0023](1)本专利技术的人卵巢鳞癌细胞株ZOC254为新的单一细胞株，无其他细胞污染；细胞性状稳定，可多次传代；具有较强的增殖活性，能大量扩增和长期在体外传代培养；可作为有效的细胞模型。
[0024](2)本专利技术的人卵巢鳞癌细胞株ZOC254为卵巢鳞癌细胞株，丰富了人卵巢鳞癌细胞系库。
[0025](3)本专利技术的人卵巢鳞癌细胞株ZOC254，能在裸鼠体内形成肿瘤，具有致瘤性，可建立体外移植动物模型。
[0026](4)本专利技术的人卵巢鳞癌细胞株ZOC254，P53表达阳性，ER表达阴性，PR表达阴性，WT
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1表达阳性，p40表达阳性，p63表达阳性，PAX
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8阴性。该人卵巢鳞癌细胞株ZOC254的同源重组修复缺陷(HRD)状态检测呈阳性，并存在以下靶向治疗相关突变：PIK3CA:p.E542K。并且，对于该人卵巢鳞癌细胞株ZO本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.人卵巢鳞癌细胞系，其特征在于，命名为人卵巢鳞癌细胞株ZOC254，于2021年11月3日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C202159。2.如权利要求1所述的人卵巢鳞癌细胞系的子代细胞系。3.如权利要求1所述人卵巢鳞癌细胞系或如权利要求2所述子代细胞系，其特征在于：P53表达阳性，ER表达阴性，PR表达阴性，WT
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1表达阳性，p40表达阳性，p63表达阳性，PAX
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8表达阴性。4.如权利要求1所述人卵巢鳞癌细胞系或如权利要求2所述子代细胞系，其特征在于：HRD阳性。5.如权利要求1所述人卵巢鳞癌细胞系或如权利要求2所述子代细胞系，其特征在于：存在以下突变...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏丹，徐晨阳，张平，应莉莎，黄旻然，
申请(专利权)人：浙江省肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：