【技术实现步骤摘要】
LAMP多维度可视化检测显色指示剂及RNA/DNA检测预混液
[0001]本专利技术属于分子生物学
,尤其涉及一种LAMP多维度可视化检测显色指示剂及RNA/DNA检测预混液。
技术介绍
[0002]环介导等温扩增技术(loop
‑
mediated isothermal amplification,LAMP),是一种核酸扩增技术。能够通过电泳、DNA嵌入荧光基团、焦磷酸镁的浊度和焦磷酸盐的转化等检测方法。然而这些方法均需要专业检测设备、长时间等待和存在开盖气溶胶污染的缺点。采用PH指示剂或镁离子螯合剂作为指示剂的检测方法在近年快速发展,相较于电泳、DNA嵌入荧光基团、焦磷酸镁的浊度和焦磷酸盐的转化等检测方法具有快速判断、低污染率等优点,在现场诊断中有较大优势,但由于弱阳性与阴性差别极其细微,导致无法对其结果快速的判读,降低了现场诊断的速度和准确性。
[0003]现场诊断需要快速、简单、准确的测试,在判读结果时应具有相互验证功能,同时无需复杂昂贵的专业设备。
技术实现思路
[00 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种LAMP多维度可视化检测显色指示剂,其特征在于:包括酚红、铬黑T和Eva Green,其中酚红的浓度为0.1mM~1mM,铬黑T的浓度为10μM~1mM,Eva Green的浓度为0.1
×
~1
×
。2.如权利要求1所述的LAMP多维度可视化检测显色指示剂,其特征在于:酚红的浓度为0.2mM~0.5mM,铬黑T的浓度为50μM~500μM,Eva Green的浓度为0.3
×
~0.7
×
。3.如权利要求2所述的LAMP多维度可视化检测显色指示剂,其特征在于:酚红的浓度为0.35mM,铬黑T的浓度为200μM,Eva Green的浓度为0.3
×
。4.一种LAMP多维度可视化RNA检测预混液,包括Tris
‑
HCl、甜菜碱、dNTP、硫酸镁、氯化钠、硫酸铵、氢氧化钾、吐温
‑
20、逆转录酶、Bst DNA聚合酶、FIP引物、BIP引物、F3引物、B3引物、LF引物、LB引物,其特征在于:还包括权利要求1
‑
3中任一项所述的LAMP多维度可视化检测显色指示剂。5.根据权利要求4所述的LAMP多维度可视化RNA检测预混液,其特征在于:所述Tris
‑
HCl的浓度为1mM~30mM;所述甜菜碱的浓度为0.25M~1M;所述dNTP的浓度为1mM~1.8mM;所述硫酸镁溶液的浓度为3.75mM~7.5mM;所述氯化钠溶液的浓度为10mM~100mM;所述硫酸铵溶液的浓度为5mM~15mM;所述氢氧化钾的浓度为1mM~10mM;所述吐温
‑
20的浓度为0.01%~1%;所述逆转录酶的浓度为0.5U/μL~1U/μL;所述Bst DNA聚合酶的浓度为0.4U/μL~1.2U/μL;所述FIP引物的浓度为0.8mM~3.2mM;所述BIP引物的浓度为0.8mM~3.2mM;所述F3引物的浓度为0.1mM~0.4mM;所述B3引物的浓度为0.1mM~0.4mM;所述LF引物的浓度为0.2mM~0.8mM;所述LB引物的浓度为0.2mM~0.8mM。6.如权利要求5所述的LAMP多维度可视化RNA检测预混液,其特征在于:所述Tris
‑
HCl的浓度为15mM;所述甜菜碱的浓度为0.8M;所述dNTP的浓度为1.4mM;所述硫酸镁溶液的浓度为6.25mM;所述氯化钠溶液的浓度为50mM;所述硫酸铵溶液的浓度为10mM;所述氢氧化钾的浓度为4mM;所述吐温
‑
20的浓度为0.1%;所述逆转录酶的浓度为0.75U/μL;所述Bst DNA聚合酶的浓度为0.8U/μL;
所述FIP引物的浓度为1.6mM;所述BIP引物的浓度为1.6mM;所述F3引物的浓度为0.2mM;所述B3引物的浓度为0.2mM;所述LF引物的浓度为0.4mM;所述LB引物...
【专利技术属性】
技术研发人员:宋东亮,罗元廷,黄成,刘娜,曹振,
申请(专利权)人:翌圣生物科技上海股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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