一种亚硝酸根的荧光测定方法技术

本发明专利技术属于荧光传感技术领域，具体涉及一种亚硝酸根的荧光测定方法。使用谷胱甘肽与聚乙烯亚胺反应制备了聚合物点荧光探针，其荧光强度随着亚硝酸根浓度的改变在发射波长462nm呈线性猝灭关系，由此建立标准工作直线，可以测定自来水、工业废水中的亚硝酸根的浓度。本发明专利技术操作方便，特异选择性好、灵敏度高，响应时间快，准确性好，可以测定复杂水体工业废水中的亚硝酸根的浓度。的亚硝酸根的浓度。的亚硝酸根的浓度。

【技术实现步骤摘要】
一种亚硝酸根的荧光测定方法


[0001]本专利技术属于荧光传感
，具体涉及一种亚硝酸根的荧光测定方法，更具体地，涉及一种聚合物点荧光探针测定亚硝酸根的方法。

技术介绍

[0002]近年来，食品安全问题、废水污染物排放超标问题引起了人们极大的关注，人们对身体健康越来越在意，对于亚硝酸盐的含量也变得犹为敏感。生活中，亚硝酸盐是一种常用的食品添加剂，最常见于各种腌菜及腌肉之中，用于发色和护色。亚硝酸盐能够有效的抑制肉毒梭状芽抱杆菌，可以作为食品防腐剂。但是，人体摄入亚硝酸盐过一定限度会对人体产生大的危害，研究表明体内过量的亚硝酸盐能把血液中二价铁离子氧化为三价铁离子，影响体内的氧运输系统，使正常血红蛋白转变为高铁血红蛋白，导致血红蛋白不可逆地转化为血流中的高铁血红蛋白,引发高铁血红蛋白症。此外，人体摄入亚硝酸盐后，可与仲胺、叔胺和氨基化合物反应形成强致癌物亚硝胺化合物，不仅容易导致胃癌和食道癌，而且不利于癌症的治疗和康复。过量的亚硝酸盐还会导致婴儿的先天畸形、中枢神经系统出生缺陷等健康问题。此外，水体中亚硝酸盐含量过高会引起鱼、虾肝脏异变，诱发产动物暴发性疾病鱼虾贝的死亡，导致严重的环境污染问题。因此建立一个高效、快速、准确的方法来检测食品、水样、生物样品中亚硝酸盐含量的方法非常重要。
[0003]王丹采用紫外分光光度法测定肉制品中亚硝酸盐含量，以邻苯二胺作为显色剂，与亚硝酸盐在酸性介质中形成苯并三氮唑化合物，此化合物在紫外区280nm处有较强的吸收峰，此方法操作简单、快速，适用于大批量样品检测，但检测范围较窄，亚硝酸盐质量浓度在5～250μg/mL才服从比尔定律。国标常采用的检测方法是格里斯试剂比色法，其实质是一种可见分光光度法。在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸氨重氮化，与盐酸萘乙二胺偶合，通过外标法测得亚硝酸盐的总含量。但此方法不仅存在样品自身色素的影响，而且Cu
2+
、Fe
3+
等离子也会对测定有干扰，给测定带来不便。催化光度法是一种动力学光度分析方法，仪器设备较简单，灵敏度较高，在早期应用广泛和发展很快。但此方法至今都没有根本上的突破点，多数都是采用在酸性介质中使溶解氧、双氧水、氯酸钾等氧化剂氧化有机染料，从而根据有机染料脱色快慢来测定亚硝酸盐。匡春等在室温及强酸介质中，将NO
2-与KIO3及甲基橙混在一起，发现甲基橙被迅速氧化褪色，并在一定浓度范围内催化反应的速度与NO
2-的浓度成线性关。用于测定亚硝酸根的电化学方法尚未成熟，有待进一步研究。现有的紫外分光光度法，重氮偶合比色法(Griess法)和催化光度法等检测亚硝酸根的范围低，适合亚硝酸根含量低的实际样品的检测，而亚硝酸根含量高的工业废水以及环境废水的亚硝酸根检测更需要一种检测方法。近年来，荧光光度法测定亚硝酸盐是基于亚硝酸盐对于氧化还原反应的催化作用，使指示物质的荧光强度减弱或猝灭，且这种强度的减弱或猝灭在一定范围内与亚硝酸盐的浓度成线性关系，通过测定荧光强度的变化来测定亚硝酸根含量，具有取样量少、灵敏度高、线性范围宽等优点，但缺点是条件不易控制，干扰因素多。在荧光检测方法中，选择合适的荧光探针检测亚硝酸根是一个关键因素。

技术实现思路

[0004]为了解决上述现有技术中检测亚硝酸根的技术问题，本专利技术提供了一种亚硝酸根的荧光测定方法，具体的制备了一种聚合物点荧光探针，并将聚合物点荧光探针用于亚硝酸根的测定。
[0005]本专利技术的技术方案如下：
[0006]将谷胱甘肽(GSH)和聚乙烯亚胺(PEI)溶于水中混匀，加热反应后，冷却即得聚合物点G-PEI PDs荧光探针溶液；将所述聚合物点G-PEI PDs荧光探针溶液加入待测样品中测定荧光强度，根据亚硝酸根的浓度与荧光光谱的关系得出待测样品中亚硝酸根的浓度。
[0007]特别地，
[0008]所述水优选双重蒸馏水、三重蒸馏水或超纯水等不影响亚硝酸根测定的水。
[0009]所述混匀方式选自超声分散、机械搅拌机、高速剪切分散机或均质机中任意一种。
[0010]进一步，
[0011]所述谷胱甘肽和所述聚乙烯亚胺的质量之比为0.3:(0.8-1.2)；
[0012]加热反应温度为200-250℃，反应时间为3-5h。
[0013]进一步，
[0014]所述聚合物点G-PEI PDs荧光探针在发射波长462nm下的荧光强度值为F0，加入亚硝酸根后的荧光强度值为F，荧光强度比值I
F
＝F0/F，根据I
F
值与亚硝酸根的浓度呈线性淬灭关系得出待测样品中亚硝酸根的浓度，所使用的激发波波长为340nm。
[0015]进一步，
[0016]亚硝酸根的浓度在0.02-2.2mg/mL的范围内，I
F
值与亚硝酸根的浓度呈线性淬灭关系，亚硝酸根的检测限为0.0032mg/mL。
[0017]进一步，
[0018]所述荧光测定方法通过体系荧光信号的改变与亚硝酸根离子浓度间的线性关系，实现对自来水样或工业废水(例如亚硝酸盐置换法生产硝基甲烷的工业废水)快速定性判断样品中是否含有亚硝酸根或定量检测亚硝酸根的浓度。
[0019]进一步，
[0020]所述亚硝酸根的荧光测定方法包括如下步骤：
[0021](1)聚合物点G-PEI PDs荧光探针的制备：
[0022]将谷胱甘肽与聚乙烯亚胺溶于水中混匀，200-250℃温度下反应3-5h，自然冷却至室温，得到聚合物点G-PEI PDs荧光探针溶液；
[0023](2)标准工作直线的绘制：
[0024]取步骤(1)制备的聚合物点G-PEI PDs荧光探针溶液适量，溶于pH＝2-10的缓冲溶液中，定容后，在340nm激发下，检测发射波长462nm下G-PEI-PD聚合物点荧光探针的荧光强度值F0；
[0025]取步骤(1)制备的聚合物点G-PEI PDs荧光探针溶液适量，溶于pH＝2-10的缓冲溶液中，向溶液中加入亚硝酸根离子，定容后，使亚硝酸根的浓度为0.02-2.2mg/mL，在340nm激发下，检测发射波长462nm下的荧光强度值F，荧光强度的比值I
F
＝F0/F，根据亚硝酸根的浓度与荧光光谱的关系建立标准工作直线，并以荧光强度的比值I
F
与亚硝酸根的浓度c作回归方程：I
F
＝2.75338c+0.89781，线性相关系数R＝0.99013(n＝10)，检测限D＝
0.0032mg/mL，(参见实施例4)；
[0026](3)待测样品中亚硝酸根的测定：
[0027]取步骤(1)制备的聚合物点G-PEI PDs荧光探针溶液适量，溶于pH＝2-10的缓冲溶液中，向溶液中加入待测样品溶液，定容后，在340nm激发下，检测发射波长462nm下待测样品溶液的荧光强度值，根据步骤(2)所述的回归方程计算待测样品溶液中亚硝酸根的浓度。
[0028]进一步，缓本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种亚硝酸根的荧光测定方法，其特征在于，将谷胱甘肽和聚乙烯亚胺溶于水中混合，加热反应后，冷却即得聚合物点G-PEI PDs荧光探针溶液；将所述聚合物点G-PEI PDs荧光探针溶液加入待测样品中测定荧光强度，根据亚硝酸根的浓度与荧光光谱的线性关系得出待测样品中亚硝酸根的浓度。2.根据权利要求1所述的荧光测定方法，其特征在于，所述谷胱甘肽和所述聚乙烯亚胺的质量之比为0.3:(0.8-1.2)；加热反应温度为200-250℃，反应时间为3-5h。3.根据权利要求2所述的荧光测定方法，其特征在于，所述水选自双重蒸馏水、三重蒸馏水或超纯水中的任意一种。4.根据权利要求3所述的荧光测定方法，其特征在于，所述混匀方式选自超声分散、机械搅拌机、高速剪切分散机或均质机中任意一种。5.根据权利要求1-4任意所述的荧光测定方法，其特征在于，所述聚合物点G-PEI PDs荧光探针在发射波长462nm下的荧光强度值为F0，加入亚硝酸根后的荧光强度值为F，荧光强度比值I
F
＝F0/F，根据I
F
值与亚硝酸根的浓度呈线性淬灭关系得出待测样品中亚硝酸根的浓度，所使用的激发波波长为340nm。6.根据权利要求5所述的荧光测定方法，其特征在于，亚硝酸根的浓度在0.02-2.2mg/mL的范围内，I
F
值与亚硝酸根的浓度呈线性淬灭关系。7.根据权利要求6所述的荧光测定方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)聚合物点G-PEIPDs荧光探针的制备：将谷胱甘肽与聚乙烯亚胺溶于水中混匀，200-250℃温度下反应3-5h，自然冷却至室温，得到聚合物点G-PEIPDs荧光探针溶液；(2)标准工作直线的绘制：取步骤(1)制备的聚合物点G-PEIPDs荧光探...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴一微，何开礼，秦龙，吴涛，占鑫，杨玉宁，曹杰，雷大有，
申请(专利权)人：湖北师范大学，
类型：发明
国别省市：