一种(E)-6-亚乙基-3α-羟基-7-酮基-5β-胆甾烷-24-酸的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种(E)

【技术实现步骤摘要】
一种(E)
‑6‑
亚乙基
‑3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的检测方法


[0001]本专利技术涉及一种(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的检测方法，尤其是鹅去氧胆酸与(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的分析检测方法，属于药物分析


技术介绍

[0002]6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸在有自然光搅拌的反应条件下，会发生6
‑
亚乙基的异构成为(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸，会影响到后一步工艺反应进程。在化学合成反应中，要利用有限的色谱条件监控(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的生成；而(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸与杂质之一的鹅去氧胆酸极性相近，现有的通用性检测器RID中不能设置梯度有效的将极性相近的两个物质分离。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的分析检测方法，可以将(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸与反应中同时生成的杂质之一的鹅去氧胆酸分离从而进行准确检测。
[0004]本专利技术为实现上述目的，采用以下技术方案：
[0005]一种(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的检测方法，其特征在于采用以下仪器和色谱条件对流动相稀释的鹅去氧胆酸供试品溶液和流动相稀释的6
‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸供试品溶液进行分析：
[0006]岛津LC
‑
15C；thermo Syncronis色谱柱，250
ⅹ
4.6，5μm：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相：乙腈：甲醇：水＝30～37：40～50：20～25的混合液，用磷酸调节pH为2.2；流速：1.0ml/min；柱温：35℃；检测器：RID。
[0007]如上所述的(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的检测方法，其特征在于所述供试品溶液通过以下方法制备：
[0008]a、取鹅去氧胆酸25mg置于50ml容量瓶中，加入流动相稀释至刻度，摇匀，定容，得0.5mg/ml浓度的鹅去氧胆酸储备溶液；取鹅去氧胆酸储备溶液1ml到10ml容量瓶，加入流动相稀释至刻度，摇匀定容，得0.05mg/ml浓度的鹅去氧胆酸供试品溶液；
[0009]b、另取6
‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸30mg，置于10ml容量瓶中，加入流动相稀释至刻度，摇匀，得含3mg/ml的供试品溶液。
[0010]如上所述的(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的检测方法，其特征在于按照《中国药典》2020年版录0512高效液相色谱法测定：
[0011]精密量取鹅去氧胆酸和6
‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图并分析。
[0012]本专利技术相对于现有技术而言，有益效果如下：
[0013]本方法能实现两者的分离，在6
‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸合成奥贝胆酸的过程中，监控反应过程生成的(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸与已知杂质鹅去氧胆酸(简称CDCA)的纯度，较好的监控6
‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的合成纯度。
[0014]本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的检测方法，其特征在于采用以下仪器和色谱条件对流动相稀释的鹅去氧胆酸供试品溶液和流动相稀释的6
‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸供试品溶液进行分析：岛津LC
‑
15C；thermo Syncronis色谱柱，250
ⅹ
4.6，5μm：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相：乙腈：甲醇：水＝30～37：40～50：20～25的混合液，用磷酸调节pH为2.2；流速：1.0ml/min；柱温：35℃；检测器：RID。2.根据权利要求1所述的(E)
‑6‑
亚乙基
‑
3α
‑
羟基
‑7‑
酮基
‑
5β
‑
胆甾烷
‑
24
‑
酸的检测方法，其特征在于所述供试品溶液通过以下方法制备：a、取鹅...

【专利技术属性】
技术研发人员：丘露凤，张和平，梁待亮，单宇哲，
申请(专利权)人：中山百灵生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：