降低Tau(τ)蛋白和/或磷酸化Tau(τ)蛋白的浓度的方法技术

本公开涉及降低患有阿尔茨海默病(AD)的人或动物受试者的靶细胞中tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白浓度的方法。本公开扩展至用于治疗阿尔茨海默病(AD)的生物药剂的用途，该生物药剂包括(i).37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段，或者(ii).用于表达LRP/LR的转染剂。或者(ii).用于表达LRP/LR的转染剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】降低Tau(
τ
)蛋白和/或磷酸化Tau(
τ
)蛋白的浓度的方法


[0001]本公开涉及降低患有阿尔茨海默病(AD)的人或动物受试者的靶细胞中tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白的浓度的方法。本公开扩展至生物药剂的用途，该生物药剂包括(i).37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段，或者(ii).用于表达LRP/LR的转染剂，该生物药剂用于降低患有阿尔茨海默病(AD)的人或动物受试者的靶细胞中tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白的浓度。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默病(AD)是导致老年人痴呆的最常见的神经退行性疾病。目前，全世界约有5000万人患有AD。此疾病是两种神经病理学特征的结果，即由淀粉样蛋白β(Aβ)肽的聚集引起的细胞外淀粉样蛋白斑块和由过度磷酸化tau(τ)蛋白积累引起的细胞内神经原纤维缠结。
[0003]β(β)和γ(γ)分泌酶对淀粉样前体蛋白(APP)的序贯切割引起4kDa Aβ的脱落，4kDa Aβ聚集形成淀粉样斑块。常规上，大多数AD相关联的研究均针对Aβ。Tau(τ)是微管相关联的蛋白，其通常起到稳定微管的作用。tau(τ)的过度磷酸化引起其与微管分离，最终导致细胞死亡。与Aβ和tau(τ)神经病理学相关联的生化途径大不相同，且成功针对一种的治疗方法不一定在另一种上取得成功。
[0004]AD的特征在于神经元回路的破坏、突触的丧失和由于两种神经病理学因素引起的神经毒性，即：淀粉样斑块和神经原纤维缠结。淀粉样蛋白斑由淀粉样蛋白β(Aβ)肽的细胞外聚集引起，而神经原纤维缠结由过度磷酸化tau(τ)的细胞内积累而形成。细胞外淀粉样斑块具有神经毒性并在神经元之间集聚，破坏它们的功能并导致细胞凋亡。同时，神经原纤维缠结在与记忆有关的特定大脑区域中积累并阻断微管运输系统，这损害突触通讯。总体而言，这些药剂能够损害大脑的许多区域，这最终导致死亡。
[0005]37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)的下调尤其在US 9,365,647B2中作为降低Aβ的解决方案被提供，该专利以引用方式完全并入本文。
[0006]本公开寻求减轻本领域已知的缺点和/或提供降低患有阿尔茨海默病(AD)的人或动物受试者的靶细胞中的tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白的浓度的方法。

技术实现思路

[0007]根据本公开的第一方面，提供降低患有阿尔茨海默病(AD)的人或动物受试者的靶细胞中的tau(τ)蛋白和/或磷酸化的tau(τ)蛋白的浓度的方法，该方法包含以下步骤：
[0008](i)通过采用转染剂来转染细胞以产生37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段；或者
[0009](ii)向细胞提供LRP/LR和/或其片段，
[0010]使得在使用时，步骤(i)或(ii)提供靶细胞中LRP/LR的过表达以及端粒酶逆转录酶(hTERT)的伴随增加，进而导致靶细胞中的tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白的浓度的
降低。
[0011]靶细胞典型地可包括患有AD的人或动物的脑细胞。靶细胞可包括神经细胞。靶细胞可包括神经元细胞和胶质细胞。胶质细胞可包括室管膜细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞和少突胶质细胞。
[0012]转染剂和/或LRP/LR和/或LRP/LR的片段可作为被配制成药物组合物的递送工具提供，该药物组合物可进一步包括用于肠胃外或非肠胃外施用于受试者的药物载体。递送工具可适于有利于部位特异性递送。递送工具可包含在药物载体中、分散在药物载体中或被药物载体包围以形成药物组合物。药物载体可用于肠胃外或非肠胃外施用于受试者。递送工具可适于有利于部位特异性递送。药物载体可适于有利于部位特异性递送。
[0013]非肠胃外施用可包括但不限于以下组中的至少一种：口服、鼻腔、直肠、阴道、眼部和透皮施用。典型地，非肠胃外施用可为口服。肠胃外施用可包括静脉内、皮下和肌肉内施用中的至少一种。典型地，肠胃外施用可为经静脉内。
[0014]转染剂可为pCIneo
‑
moLRP::FLAG质粒。
[0015]LRP/LR可包含如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或其片段中列出的肽/蛋白序列表。
[0016]SEQ ID NO:1可为人LRP/LR的肽/蛋白序列并且可具有以下序列：
[0017]MSGALDVLQMKEEDVLKFLAAGTHLGGTNLDFQMEQYIYKRKSDGIYIINLKRTWEKLLL
[0018]AARAIVAIENPADVSVISSRNTGQRAVLKFAAATGATPIAGRFTPGTFTNQIQAAFREPR
[0019]LLVVTDPRADHQPLTEASYVNLPTIALCNTDSPLRYVDIAIPCNNKGAHSVGLMWWMLAR
[0020]EVLRMRGTISREHPWEVMPDLYFYRDPEEIEKEEQAAAEKAVTKEEFQGEWTAPAPEFTA
[0021]TQPEVADWSEGVQVPSVPIQQFPTEDWSAQPATEDWSAAPTAQATEWVGATTDWS
[0022]SEQ ID NO:2可为小鼠(小白鼠(Mus musculus))LRP/LR的肽/蛋白序列并且可具有以下序列：
[0023]MSGALDVLQMKEEDVLKFLAAGTHLGGTNLDFQMEQYIYKRKSDGIYIINLKRTWEKLLL
[0024]AARAIVAIENPADVSVISSRNTGQRAVLKFAAATGATPIAGRFTPGTFTNQIQAAFREPR
[0025]LLVVTDPRADHQPLTEASYVNLPTIALCNTDSPLRYVDIAIPCNNKGAHSVGLMWWMLAR
[0026]EVLRMRGTISREHPWEVMPDLYFYRDPEEIEKEEQAAAEKAVTKEEFQGEWTAPAPEFTA
[0027]AQPEVADWSEGVQVPSVPIQQFPTEDWSAQPATEDWSAAPTAQATEWVGATTEWS
[0028]应当理解，LRP/LR是高度保守的，并且为了实施在本文所描述、说明和/或例示的本专利技术，也可利用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的同源物或片段，和/或片段的同源物。
[0029]LRP/LR可包含与如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或其片段中列出的序列具有至少80％同源性的肽/蛋白序列表。
[0030]LRP/LR可包含同源物或其片段，以及片段的同源物，其中LRP/LR可包含如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2中列出的肽/蛋白序列表。
[0031]LRP/LR的肽/蛋白序列本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种降低患有阿尔茨海默病(AD)的人或动物受试者的靶细胞中tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白浓度的方法，所述方法包含所述以下步骤：(i)通过采用转染剂来转染所述细胞以产生37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段；或者(ii)向所述细胞提供LRP/LR和/或其片段，使得在使用时，步骤(i)或(ii)提供所述靶细胞中LRP/LR的过表达以及端粒酶逆转录酶(hTERT)的伴随增加，进而导致所述靶细胞中tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白的浓度降低，并且其中所述靶细胞是患有AD的人或动物的脑细胞。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述转染剂和/或所述LRP/LR和/或LRP/LR的所述片段作为被配制成药物组合物的递送工具提供，所述药物组合物包括用于肠胃外或非肠胃外施用于所述受试者的药物载体，其中非肠胃外施用是由以下组成的组中的至少一种：口服、鼻腔、直肠、阴道、眼部和透皮施用，并且其中肠胃外施用是由以下组成的组中的至少一种：静脉内、皮下和肌肉内施用。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述转染剂是pCIneo
‑
moLRP::FLAG质粒和/或所述LRP/LR，所述LRP/LR包含如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2中列出的肽/蛋白序列表，或者如SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5中列出的其片段。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述转染剂是pCIneo
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moLRP::FLAG质粒和/或所述LRP/LR，所述LRP/LR包含与如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2中列出的所述序列具有至少80％同源性的肽/蛋白序列表，或者如SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5中列出的其片段。5.根据权利要求1所述的方法，进一步包括步骤(iii)，其中步骤(iii)包括：(iii)在患有阿尔茨海默病(AD)的人或动物受试者中重复步骤(i)和/或步骤(ii)达第一时段，其中所述第一时段选自所述组：每天、每周或每月。6.根据权利要求5所述的方法，进一步包括步骤(iv)，其中步骤(iv)包括：(iv).在步骤(i)、(ii)和(iii)中的任一个完成之前，可选地在步骤(i)、(ii)和(iii)中的任一个完成之后，进一步可选地与步骤(i)、(ii)和(iii)中的任一个同时，下调LPR/LR。7.根据权利要求6所述的方法，其中下调LPR/LR包括提供所述人或动物受试者抗37kDa/67kDa层粘连蛋白受体(LRP/LR)特异性抗体(或其片段)，使得结合发生在37kDa/67Kda层粘连蛋白受体(LRP/LR)的表面表位和所述抗37kDa/67kDa层粘连蛋白受体(LRP/LR)特异性抗体(或其片段)之间，使得所述人或动物中淀粉样蛋白β(Aβ)肽的所述浓度降低。8.根据权利要求7所述的方法，其中下调LRP/LR包括向所述人或动物受试者提供核苷酸序列，优选SEQ ID NO:6和/或SEQ ID NO:7的shRNA，使得结合发生在37kDa/67kDa层粘连蛋白受体(LRP/LR)的mRNA和所述shRNA之间，使得所述37kDa/67kDa层粘连蛋白受体(LRP/LR)下调，进而导致所述人或动物中淀粉样蛋白β(Aβ)肽的所述浓度降低。9.根据权利要求6所述的方法，其中所述下调LPR/LR包括向所述人或动物受试者提供抗37kDa/67kDa层粘连蛋白受体(LRP/LR)特异性抗体(或其片段)，以及向所述人或动物受试者提供核苷酸序列，优选SEQ ID NO:6和/或SEQ ID NO:7的shRNA。
10.一种生物药剂，其包括(i)37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段和/或(ii)用于表达37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段的转染剂，所述生物药剂用于降低患有阿尔茨海默病(AD)人或动物受试者的靶细胞中tau(τ)蛋白和/或磷酸化tau(τ)蛋白的浓度，其中LRP/LR和/或所述其片段和/或其中所述转染剂用于施用于对其有需要的受试者的靶细胞，其中所述靶细胞包括患有AD的人或动物的脑细胞。11.根据权利要求10所述的生物药剂，其中所述(i)所述37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段和/或(ii)用于表达37kDa/67kDa层粘连蛋白受体前体/高亲和力层粘连蛋白受体(LRP/LR)和/或其片段的所述转染剂被封装到所述递送工具中，并且其中封装使用纳米颗粒进行。12.根据权利要求11所述的生物药剂，其中所述纳米颗粒是聚合纳米颗粒，其选自由以下组成的组：聚丙烯酸树脂、阿拉伯树胶、角叉菜胶、纤维素、羟丙基纤维素(HPC)、甲基纤维素(MC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乳酸
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共
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乙醇酸(PLGA)、甲壳素、果胶、支链淀粉、天然橡胶、聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚酰胺、聚丙烯腈、聚氯乙烯、聚乙烯醇(PVA)、聚乙二醇(PEG)、聚环氧乙烷(PEO)、聚(D
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丙交酯)(PDLA)、聚乳酸(PLLA)、聚半乳糖醛酸酯、甲基纤维素(聚缩醛)、聚(ε
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己内酯)、磷脂、多糖、聚阴离子多糖、羧甲基纤维素、羧甲基直链淀粉、6
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硫酸软骨素、硫酸皮肤素、肝素、硫酸肝素、聚(甲基丙烯酸羟乙酯)、胶原蛋白、纤维蛋白原、白蛋白、纤维蛋白、丙烯...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯蒂芬，
申请(专利权)人：约翰内斯堡威特沃特斯兰德大学，
类型：发明
国别省市：