包含源自牛奶的外泌体作为有效成分的用于治疗代谢性疾病的药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及包含源自牛奶的外泌体作为有效成分的用于治疗代谢性疾病的药物组合物。具体地，本发明专利技术的源自牛奶的外泌体包含公知的具有抗糖尿病活性的mi

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含源自牛奶的外泌体作为有效成分的用于治疗代谢性疾病的药物组合物


[0001]本专利技术涉及包含源自牛奶的外泌体作为有效成分的用于治疗代谢性疾病的药物组合物。

技术介绍

[0002]由于经济的急速发展带来西式饮食与营养过剩，最近韩国国内的疾病发病状态发生了很大变化，与过去不同，动脉硬化、高血压、癌症、肥胖及糖尿病等之类的慢性退行性疾病开始成为主要的死亡原因。尤其是糖尿病及由其引起的并发症的发病率急剧增加，具体地，上世纪七十年代不足人口1％的糖尿病患者到了上世纪九十年代以后每10万人中就有17.2人因糖尿病死亡。
[0003]糖尿病为血液中葡萄糖浓度增加的代谢性疾病中的一种，是因胰岛素的分泌量不足或者无法发挥正常功能而导致的疾病。糖尿病大体分为1型和2型，1型糖尿病是因自身免疫机制、病毒、感染等原因而破坏胰腺的B细胞使胰岛素的分泌绝对不足而引起的。另一方面，2型糖尿病则因不分泌胰岛素或者分泌的胰岛素在体内不能正常发挥功能而无法调节血糖，从而出现血糖上升的情况。
[0004]并且，糖尿病引起视网膜、肾脏及神经等毛细血管并发症以及中风、心绞痛、心肌梗塞及末梢血管疾病之类的大血管并发症。近来，随着糖尿病治疗方法的发展，糖尿病患者的平均寿命得到延长，由急性代谢性并发症引起的死亡率急剧下降，但糖尿病并发症的发生却在增加，对此的治疗问题呈上升的趋势。
[0005]糖尿病利用药物疗法、运动疗法及饮食疗法进行治疗，根据患者的症状使用胰岛素制剂和各种血糖剂。然而，糖尿病是表现出肝脏内糖的过度生成、胰岛素抗药性、在肌肉和脂肪细胞等中的糖处理能力减少等特征的综合疾病，只依靠特定治疗方法无法阻止诱发多种副作用。尤其，药物疗法使用胰岛素及化学物质，会诱发药物服用的副作用及患者的抗药性。
[0006]另一方面，外泌体(exosome)为从多种细胞分泌的膜结构的小囊泡，具有约50nm至200nm的直径。根据最近的研究结果，外泌体不是直接从细胞质膜(plasma membrane)脱落的，而是起源于称作多囊体(multivesicular bodies，MVB)的细胞内特定区域并向细胞外放出的。
[0007]外泌体不仅是在肥大细胞、淋巴细胞、星形细胞、血小板、神经细胞、内皮细胞、上皮细胞之类的细胞，而且是在几乎所有的真核生物及细菌的代谢活动过程中生成的物质，在包括血液、小便、唾液、母乳、羊水、腹水、脑脊髓液等的所有液体中被分离出来。不仅如此，由于外泌体反映细胞的状态或者细胞膜，包含多种蛋白质、脂质、核酸等，因此，近来作为在诊断上有用的生物学试样而备受瞩目。这是因为外泌体反映起源细胞(供给细胞)特有的生物学功能并含有各种细胞特异性结构成分，从各种细胞分离的外泌体的大小或者蛋白质及核酸的构成互不相同。
[0008]与此相关地，韩国公开专利第10
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2019
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0011213号公开了如下内容：从源自脂肪组织的干细胞提取的外泌体表现出促进骨再生及增进骨密度的效果，能够有效用于治疗骨质疏松症。

技术实现思路

[0009]技术课题
[0010]本专利技术的目的在于，提供源自牛奶的外泌体治疗代谢性疾病的用途。
[0011]本专利技术的再一目的在于，提供源自牛奶的外泌体促进胰岛素分泌的用途。
[0012]本专利技术的还有一目的在于，提供从牛奶中提取外泌体的方法。
[0013]解决问题的方案
[0014]为了实现上述目的，本专利技术提供包含源自牛奶的外泌体作为有效成分的用于预防或治疗代谢性疾病的药物组合物。
[0015]并且，本专利技术提供包含源自牛奶的外泌体作为有效成分的用于预防或改善代谢性疾病的保健功能食品。
[0016]并且，本专利技术提供包含源自牛奶的外泌体作为有效成分的用于促进胰岛素分泌的组合物。
[0017]并且，本专利技术提供从牛奶中提取外泌体的方法，包括：使用醋酸处理牛奶来获得第一上清液的步骤；使用选自由乙二胺四乙酸(EDTA，ethylenediaminetetraacetic acid)及盐酸(HCl，hydrogen chloride)组成的组中的一种以上的试剂处理获得的第一上清液来获得第二上清液的步骤；以及从获得的第二上清液中提取外泌体的步骤。
[0018]并且，本专利技术提供预防、改善或者治疗代谢性疾病的方法，包括向个体给药源自牛奶的外泌体的步骤。
[0019]进而，本专利技术提供源自牛奶的外泌体，用来制备用于预防、改善或者治疗代谢性疾病的药剂的用途。
[0020]专利技术的效果
[0021]本专利技术的源自牛奶的外泌体包含公知的具有抗糖尿病活性的mi
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155及mi
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375，在促进有关作为促进胰岛素信号传导因子的胰岛素受体底物
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1(IRS
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1)及葡萄糖转运蛋白4(GLUT
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4)的信使核糖核酸(mRNA)的表达的同时，抑制有关作为抑制胰岛素信号传导因子的CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)及丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)蛋白的信使RNA的表达，可以有效地用于治疗代谢性疾病。
附图说明
[0022]图1为通过肉眼确认使用1％(v/v)、2％(v/v)、5％(v/v)、10％(v/v)的醋酸与乙二胺四乙酸或者磷酸盐缓冲溶液(PBS)一起处理牛奶后提取的外泌体的结果的图。
[0023]图2为示出使用透射电子显微镜(TEM)拍摄从牛奶中提取的外泌体的结果(A部分)的图以及示出在提取的外泌体中确认作为外泌体标记蛋白的TSG101蛋白的表达的结果(B部分)的图。
[0024]图3为在测量从牛奶中提取的外泌体的大小后，示出其大小分布结果的柱状图。
[0025]图4为示出用于确认从牛奶中提取的外泌体中是否存在mi
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155及mi
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375的微小核
糖核酸(miRNA)的Ct值(A部分)、标准熔融曲线(B部分)及差异熔融曲线(C部分)的图标。
[0026]图5为使用胰岛素处理胰腺癌细胞株后确认是否诱发AKT蛋白质的磷酸化的结果的图。
[0027]图6为使用从牛奶中提取的外泌体处理胰腺癌细胞株后确认有关作为促进胰岛素信号传导因子的胰岛素受体底物
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1及葡萄糖转运蛋白4蛋白的信使RNA的表达变化的结果的柱状图。
[0028]图7为使用从牛奶中提取的外泌体处理胰腺癌细胞株后确认有关作为抑制胰岛素信号传导因子的CCAAT增强子结合蛋白β及丙酮酸脱氢酶激酶4蛋白的信使RNA的表达变化的结果的柱状图。
具体实施方式
[0029]以下，详细说明本专利技术。
[0030]本专利技术提供包含源自牛奶的外泌体作为有效成分的用于预防或治疗代谢性疾病的药物组合物。
[0031]本说明书中所使用的术语“外泌体(exosome)”是指从多种细胞中分泌的膜结构的小囊泡。上述外泌体发挥与其他细胞或者组织结合来传递膜结构要素、蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于预防或治疗代谢性疾病的药物组合物，其特征在于，包含源自牛奶的外泌体作为有效成分。2.根据权利要求1所述的用于预防或治疗代谢性疾病的药物组合物，其特征在于，上述外泌体通过包括如下步骤的方法获得：步骤1)，使用醋酸处理牛奶来获得上清液；步骤2)，使用选自由乙二胺四乙酸及盐酸组成的组中的一种以上的试剂处理获得的上清液来获得上清液；以及步骤3)，从获得的上清液中获得外泌体。3.根据权利要求2所述的用于预防或治疗代谢性疾病的药物组合物，其特征在于，以1∶5至1∶150的体积比添加牛奶及醋酸。4.根据权利要求1所述的用于预防或治疗代谢性疾病的药物组合物，其特征在于，上述代谢性疾病为肥胖、糖尿病或者糖尿病并发症。5.根据权利要求4所述的用于预防或治疗代谢性疾病的药物组合物，其特征在于，上述糖尿病并发症为糖尿病视网膜病变、糖尿病性白内障、糖尿病肾病、糖尿病神经病...

【专利技术属性】
技术研发人员：安智煐，安槿儿，金亮勋，
申请(专利权)人：忠北大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：