预防或治疗癌症的抗癌组合物制造技术

本发明专利技术是有关因癌细胞导致病人损害的一种治疗方法及抗癌组合物－未变性乳清蛋白浓缩物的应用方法。（*该技术在2013年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术基于惊人的发现-未变性乳清蛋白浓缩物具有免疫增强作用，更具体的说，本专利技术涉及口服未变性乳清蛋白浓缩物可提高宿主对化学因素诱发癌症的抵抗力，以及这类口服可抑制化学因素诱发的癌。在美国专利申请298，971，1988年12月23日递交，和美国专利申请417，246，1989年10月4日递交，(本申请是该两申请的部分继续和分案申请)，并且，在Bounous等的“食物中乳清蛋白抑制二甲肼诱发肿瘤的发展”(1)一文中，我们报道的实验显示，经24周用二甲肼(DMH)诱发肿瘤的小鼠，连续以乳清蛋白(WPC)食物喂养，可使小鼠结肠中肿瘤细胞的发展(包括肿瘤细胞数及大小)受到抑制。这种抗肿瘤作用可能是由于增强靶细胞对致癌物的抵抗力和/或WPC对肿瘤细胞的直接抑制作用。在随后进行的一系列实验(2)中，在用DMH处理的开始的20周给动物喂Purina饲料，在用DMH处理的后8周改喂WPC饲料，结果显示WPC对肿瘤细胞有某种抑制作用。最近，一组法国科学家(3)在体外证实了WPC对人体癌细胞的直接抑制作用。与此相似的对人乳腺癌细胞的体外研究也已表明牛血清白蛋白(BSA)是抑制癌细胞增殖的因素(4)。我们已证明，WPC的这种活性特别依赖于WPC(U.S.＃563，794)的BSA组分中存在的谷氨酰半胱氨酸基团(还原型谷胱甘肽(GSH)合成所需的底物)。有趣的是，在培养物中加入半胱氨酸释放系统OTZ(过氧噻唑烷-4-羧酸酯，ozothiazolidine-4-carboxilate)，可使正常细胞中还原型谷胱甘肽(GSH)水平增加，但却能反馈抑制人体肿瘤细胞中的GSH合成(5)。OTZ的这种不同的作用最近在体内得到证实(6)。因此，前面提到的WPC(3)和更具体的BSA(4)的直接抑制作用便可解释为在培养体系中释放了一种如谷氨酰半胱氨酸那样的有效的半胱氨酸释放系统。因此我们可得出下列结论1)BSA是我们发现的WPC中主要具有促进GSH合成活性的蛋白质组分。我们相信这种活性是WPC增强免疫和抗癌作用的基础，这种活性特别依赖于WPC(U.S.＃563，794)的BSA组分中存在的谷氨酰半胱氨酸基团(Gly-Cys，合成GSH的底物)。2)BSA的分子量(MW)是66，267，因此完全不同于Villadsen已得专利的抗癌因子的MW(分子量为500-20，000)(7)。3)我们以前的工作(1，2)可以被解释为在DMH处理中，WPC食物通过增加细胞GSH，保护靶细胞抵抗致癌物的攻击，此外，GSH合成底物的增加可能抑制已形成的癌细胞的增殖。4)我们现在已明确了WPC中高水平的BSA对于提供GSH合成底物的重要意义。我们可以作出结论食物中未变性状态、含BSA≥10%的WPC起到了抗肿瘤作用。附图简解附图说明图1雄性C57BL/6N1A小鼠在10周、17、20和21月龄时喂以未变性乳清蛋白(U-Lacp)、未变性乳清蛋白(D-Lacp)、酪蛋白、卵清蛋白或Purina食物对肝脏谷胱甘肽含量的影响。图2雄性C57BL/6N1A小鼠在10周、17、20和21月龄时喂以未变性乳清蛋白(U-Lacp)、变性乳清蛋白(D-Lacp)、酪蛋白、卵清蛋白或Purina食物对心脏谷胱甘肽的含量的影响。图3饲料中加入(20g/100g饲料)不同来源的WPC和酪蛋白对小鼠脾脏空斑形成细胞(PFC)应答的影响(绵羊红细胞注射量为5×106)。详细描述我们首先叙述1988年12月23日递交的美国专利申请298，971及1989年10月4日递交的美国专利申请417，246中进行的实验，本申请作为以上申请的一个部分继续申请。定义(a)乳清蛋白乳清蛋白是在pH4.6、20℃条件下去除酪蛋白后在“乳血清”或乳清中维持可溶的一组乳蛋白质。奶牛乳汁中的主要乳清蛋白是β-乳球蛋白(βL)，α-乳清蛋白(αL)，免疫球蛋白和血清白蛋白(SA)。采用工业化过程从乳清中分离出的这些蛋白产物称为乳清蛋白浓缩物(WPC)或提取物。我们早期大部分实验中所用的WPC来源于牛奶(由DanmarkProteinA.S.提供的Lacprodan-80)。未变性状态WPC以U-Lacp表示;其变性状态以D-Lacp表示。乳清蛋白(L)是WPC的传统定义。(b)C＝酪蛋白;(c)SRBC＝绵羊红血细胞;(d)PFC＝空斑形成细胞(脾)计数脾PFC用于检测对注射SRBC产生的体液免疫应答;(e)GSH＝谷胱甘肽(L-γ-谷氨酰-L半胱氨酰甘氨酸);(f)DMH＝1，2，-二甲肼;(g)试验用限定的饲料配方其中仅改变蛋白质的种类;(h)每升牛奶乳清中约含6g蛋白质，大部分乳糖、矿物质和水溶性维生素。这些研究所用饲料(参见表3)饲料按以下方式制备20g选择的纯蛋白质，56g去除蛋白质的80056饲料粉，其中含玉米浆、玉米油、薯类淀粉、维生素和矿物质(由美国Mead-Johnson公司生产)，18g玉米淀粉，2g麸皮，0.05gNutramigen(维生素、铁等混合物，Bristol-Myers，Ontario，Canada)，2.65gKCl;0.84gNaCl。我们的饲料配方中碳水化合物和脂类成分都不变。在各种提纯饲料中唯一改变的是蛋白质的种类(20g蛋白/100g饲料)。在这种饲料含量下，所有试验用不同种类的蛋白质都提供了小鼠成长每日所必需的氨基酸的量(8)。维生素和矿物质在各批实验中都相同，其加入量必须保证小鼠生长每日所需量(9，10)。表1列出了各种推荐的小鼠饲料维生素需要量及我们一些配方中这些维生素的含量。由此可知我们实验所用的所有配方的设计都是根据可提供机体正常生长所需的充足营养、并保证血清蛋白的正常含量(9)，不致出现脱毛、皮炎、白内障、运动失调、脂肪肝等，后面几种症状在衰老小鼠中经常出现，与衰老过程有关。表1试验饲料中维生素和矿物质含量(每100g饲料所含)JACKSON(10)试验饲料(JacksonLaboratoriesAIN76(9)饲料推荐量范围)维生素:维生素A,IU1295180024-55.0400维生素D,IU26036014-506100维生素E,IU11.6181-2.75.0维生素K,mg0.060.09-0.005维生素B1,mg 0.34 0.63 0.22-0.99 0.60维生素B2,mg 0.38 0.69 0.24-1.1 0.60维生素B6,mg 0.26 0.36 0.1-0.55 0.70维生素B12,mg 0.0012 0.054 0.0039-0.0055 0.001烟酸,mg5.19.22.6-14.33.0叶酸,mg0.0630.120.05-0.270.2泛酸,mg1.933.381-5.51.6生物素,mg0.0310.0580.019-0.1650.02维生素c,mg53.365--胆碱,mg447649-145100肌醇,mg19.819.8--矿物质:AIN76钙,mg430#520磷,mg260#400镁,mg63.2#50铁,mg7.93.5锌,mg3.57#3.0铜,mg0.47#0.60碘,mg0.0230.02钠,mg232100钾,mg997360＃经矿物质分析(9)，(10)见参考文献空斑检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗癌症的组合物，包含有效量的未变性乳清蛋白浓缩物，以增加淋巴细胞数，该浓缩物含至少９％的血清白蛋白。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：古斯塔夫邦纳斯，菲尔戈尔德，
申请(专利权)人：免疫技术研究公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]