地衣芽孢杆菌BLc06及其制备的功能型瓜果育苗生物基质和应用制造技术

本发明专利技术涉及农业微生物应用技术领域，具体涉及地衣芽孢杆菌BLc06及其制备的功能型瓜果育苗生物基质和应用。地衣芽孢杆菌BLc06已于2021年9月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.23373，分类命名为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis。以地衣芽孢杆菌BLc06制备的功能型瓜果育苗生物基质可用于茄科植物、葫芦科植物育苗。本发明专利技术地衣芽孢杆菌BLc06能够定殖在植物根围，制备的功能型瓜果育苗生物基质对茄科植物、葫芦科植物的生长具有明显促生作用。用。

【技术实现步骤摘要】
地衣芽孢杆菌BLc06及其制备的功能型瓜果育苗生物基质和应用


[0001]本专利技术涉及农业微生物应用
，具体涉及地衣芽孢杆菌BLc06及其制备的功能型瓜果育苗生物基质和应用。

技术介绍

[0002]近年来，人口数量的增长和生活质量的提升，农副产品，尤其瓜果蔬菜类作物，需求量剧增。为实现农副产品产量的增长，化学肥料的用量日渐加量。化学肥料的滥用使得农业生产成本增加，降低农产品效益价值；另外，其残留物使农田环境污染问题日渐突出，某些化学物质甚至随着食物链进而威胁到人类健康。为改变这种不良现象，探寻新的微生物菌肥替代或部分替代化学肥料的研究备受关注。
[0003]番茄和黄瓜作为广受大家喜爱的瓜果蔬菜，在市场需求量有增无减。番茄和黄瓜的种植面积越来越大，而保护地化肥的过量施用使得番茄和黄瓜的产量和质量严重降低，进而对番茄和黄瓜的生产造成很大的经济损失和保护地资源的浪费，并且施用过程中会造成对环境的二次污染，因此急需开发出新型高效的微生物育苗生物基质。

技术实现思路

[0004]针对施加化学肥料易出现化学药品的不规范使用或超过使用标准导致的食品安全隐患问题和环境污染问题，本专利技术提供地衣芽孢杆菌BLc06及其制备的功能型瓜果育苗生物基质和应用，该地衣芽孢杆菌BLc06能够定殖在植物根围，制备的功能型瓜果育苗生物基质对茄科植物(番茄)、葫芦科植物(黄瓜)的生长具有明显促生作用，应用可节约大量成本，使瓜果蔬菜生产效益最大化，对经济植物的栽培具有重大应用价值。
[0005]第一方面，本专利技术提供地衣芽孢杆菌BLc06，所述地衣芽孢杆菌BLc06已于2021年9月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.23373，分类命名为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis。
[0006]第二方面，本专利技术提供一种使用地衣芽孢杆菌BLc06制备的功能型瓜果育苗生物基质。
[0007]进一步的，所述功能型瓜果育苗生物基质由普通果蔬育苗基质中添加地衣芽孢杆菌BLc06得到。
[0008]进一步的，以普通育苗基质干重计，所述普通育苗基质中有机质含量≥45％，腐殖酸含量≥15％，总养分(N+P2O5+K2O)含量为1.5％～7.0％，pH值为5.5～6.8，游离水含量≤43％，Ec≤2.5ms/cm。
[0009]进一步的，以功能型瓜果育苗生物基质干重计，所述功能型瓜果育苗生物基质中有益活菌数≥4.0
×
107cfu/g，有机质含量≥38％，总养分(N+P2O5+K2O)含量为1.0％～6.0％，pH值为5.5～7.0，游离水含量≤38％，Ec≤2.5ms/cm。
[0010]进一步的，所述功能型瓜果育苗生物基质的制备方法包括如下步骤：
[0011](1)将地衣芽孢杆菌BLc06菌株接种至LB固体培养基，30℃
±
1℃条件下培养，挑取单一菌落，接种于LB液体培养基，于30℃
±
1℃条件下培养至对数生长期，获得种子液，所述种子液浓度不低于1.0
×
108cfu/mL；
[0012](2)将种子液以体积比1：10的接种量接种至发酵培养基，使发酵培养体系中菌体初始浓度达到1.0
×
107cfu/mL，发酵条件为：在30℃
±
1℃条件下，通气保压0.08～0.1MPa，溶氧量28％～32％，转速180～200r/min，发酵过程中保持发酵液pH7.2～7.5，培养38～48h后测量活菌总量，芽孢产孢率不低于92％，使发酵液中含菌或芽孢量计数浓度达到2.0
×
10
10
cfu/mL，发酵结束，获得发酵液；
[0013](3)将步骤(2)获得的发酵液，按照0.2kg/L添加硅藻土，充分混匀，进行喷雾干燥，得到粉状预制剂；
[0014](4)取96～98份粉状预制剂、0.5～1份草炭土、0.5～1份羧甲基纤维素钠、0.5～1份壳聚糖和0.5～1份木质素硫酸钠充分混合，通过气流粉碎机，将混合物粉碎至Φ＝45μm以下，获得可湿性粉剂，所述可湿性粉剂中含菌或芽孢量计数浓度达到1.0
×
109cfu/g；
[0015](5)将可湿性粉剂加入普通育苗基质中，接入量为8～12％(v/v)，即得功能型瓜果育苗生物基质。
[0016]进一步的，所述发酵培养基中含有0.1g/L蛋白胨、0.1g/L氯化钠、0.1g/L酵母粉、0.02g/L氯化钙、0.01g/L硫酸镁、0.02g/L磷酸氢二钾、0.015g/L磷酸二氢钾、5
×
10
‑5g/L硫酸亚铁，所述发酵培养基pH为7.0～7.5；
[0017]所述发酵培养基在0.1MPa下，连同发酵罐一起115℃灭菌60min，自然冷却到常温。
[0018]第三方面，本专利技术还提供一种以地衣芽孢杆菌BLc06制备的功能型瓜果育苗生物基质在茄科植物、葫芦科植物育苗上的应用。
[0019]进一步的，所述茄科植物为番茄。
[0020]进一步的，所述葫芦科植物为黄瓜。
[0021]本专利技术的有益效果在于，本专利技术提供的地衣芽孢杆菌BLc06及其制备的功能型瓜果育苗生物基质与市场化学肥料相比，促进植物生长效果良好，对工厂化育苗中的植物的促生效果皆达到30％以上，壮苗指数上升均超过40％，在设施农业使用中结实率均不低于85％；本专利技术提供的功能型瓜果育苗生物基质制备方法简单，易操作，田间施用方便，对经济植物的栽培具有重大应用价值。
具体实施方式
[0022]为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。
[0023]实施例1地衣芽孢杆菌BLc06的分离和鉴定
[0024]取黄瓜茎基部以下的主根和分生根部分，用75％酒精清洗30s，用无菌水反复冲洗5次，室温自然干燥后，切成长约3cm小段，称取干重10g植物根于盛有90ml无菌水的三角瓶内，在30℃、180r/min条件下的摇床中振荡20min，制成黄瓜根系菌群悬浮液，稀释成10
‑1、
10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5等不同梯度稀释液后涂LB固体平板，恒温培养箱30℃，暗培养18h，后挑取单菌落。经LB固体平板纯化2次后，共挑选150株分离细菌，分别测定各菌株产植物生长素吲哚乙酸(方法参考文献：Glickmann E,Dessaux Y.A critical examination of the specificity of thesalkowski reagent fo本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.地衣芽孢杆菌BLc06，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌BLc06已于2021年9月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.23373，分类命名为地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis。2.一种使用如权利要求1所述的地衣芽孢杆菌BLc06制备的功能型瓜果育苗生物基质。3.如权利要求2所述的功能型瓜果育苗生物基质，其特征在于，所述功能型瓜果育苗生物基质由普通果蔬育苗基质中添加地衣芽孢杆菌BLc06得到。4.如权利要求3所述的功能型瓜果育苗生物基质，其特征在于，以普通育苗基质干重计，所述普通育苗基质中有机质含量≥45％，腐殖酸含量≥15％，总养分含量为1.5％～7.0％，pH值为5.5～6.8，游离水含量≤43％，Ec≤2.5ms/cm。5.如权利要求3所述的功能型瓜果育苗生物基质，其特征在于，以功能型瓜果育苗生物基质干重计，所述功能型瓜果育苗生物基质中有益活菌数≥4.0
×
107cfu/g，有机质含量≥38％，总养分含量为1.0％～6.0％，pH值为5.5～7.0，游离水含量≤38％，Ec≤2.5ms/cm。6.如权利要求3所述的功能型瓜果育苗生物基质，其特征在于，所述功能型瓜果育苗生物基质的制备方法包括如下步骤：(1)将地衣芽孢杆菌BLc06菌株接种至LB固体培养基，30℃
±
1℃条件下培养，挑取单一菌落，接种于LB液体培养基，于30℃
±
1℃条件下培养至对数生长期，获得种子液，所述种子液浓度不低于1.0
×
108cfu/mL；(2)将种子液以体积比1：10的接种量接种至发酵培养基，使发酵培养体系中菌体初始浓度达到1.0
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【专利技术属性】
技术研发人员：谢雪迎，张新建，张广志，范素素，周方园，吴晓青，赵晓燕，周红姿，
申请(专利权)人：山东省科学院生态研究所山东省科学院中日友好生物技术研究中心，
类型：发明
国别省市：