【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及昆虫饲料，具体涉及一种无菌葱蝇人工饲料及其制备方法和应用。
技术介绍
1、葱蝇，又称蒜蛆，是全球洋葱和其他百合科作物重要害虫，其幼虫会破坏洋葱和其他百合科作物的鳞茎，造成巨大的经济损失。如果不能得到有效控制，它会导致洋葱、大蒜、大葱和韭菜的作物损失达50%至100%。
2、昆虫与肠道微生物密切相关，大多数昆虫肠道内含有多种共生细菌，这些细菌依靠宿主提供的营养物质生存。研究表明，肠道共生菌群的主要功能是提供必要的营养物质，其次是与消化和解毒相关的功能。在某些情况下，肠道细菌可以作为昆虫防治的微生物资源，研究昆虫体内单个肠道细菌的表现和特定功能是至关重要的。因此，制备无菌试虫对于研究特定细菌菌株与昆虫之间的相互作用尤为重要。
3、目前，常规方法是通过对虫卵进行消毒处理，并在幼虫和成虫的食物中加入抗生素来培育无菌昆虫。但是这种方法往往会因为抗生素本身对实验昆虫的毒性导致昆虫生理生化状态有所改变，昆虫的适应性下降。其他方法诸如紫外消毒也能获得无菌人工饲料。但是对于葱蝇这种寡食性害虫，常规的无菌人工饲料，难以保证饲养获得生理生化状态正常的无菌葱蝇。
技术实现思路
1、针对现有技术中使用含抗生素的饲料无法满足无菌葱蝇全虫态发育至成虫的技术问题，本专利技术提供一种无菌人工饲料及其制备方法和应用。无菌葱蝇幼虫食用无菌人工饲料能够获得生理生化状态正常的无菌葱蝇，为研究细菌菌株与葱蝇之间的相互作用提供优质的实验材料。
2、第一方面，本专利技术提供一种无
3、进一步的，原料包括：发酵葱渣5-10g、未发酵葱渣5-10g、发酵葱滤液80-100ml、未发酵葱滤液80-100ml、氯化胆碱0.2-0.5g、l-抗坏血酸0.5-1.0g、琼脂粉2-3g、tsb培养基5-8g、水100-150ml。
4、进一步的，原料包括：发酵葱渣5g、未发酵葱渣5g、发酵葱滤液80ml、未发酵葱滤液80ml、氯化胆碱0.24g、l-抗坏血酸0.56g、琼脂粉2g、tsb培养基6g、水103ml。
5、第二方面，本专利技术提供一种无菌葱蝇人工饲料的制备方法，包括以下步骤：
6、（1）葱白加入无菌水研磨成糊状，得到葱研磨液，再将葱蝇幼虫研磨得到葱蝇幼虫研磨液，将葱研磨液和葱蝇幼虫研磨液混合，置于摇床培养箱中，25-37℃、180-230rpm的条件下发酵12-24h，纱布过滤后，得到发酵葱渣和初始发酵葱滤液，初始发酵葱滤液经无菌过滤得到发酵葱滤液；
7、（2）葱白加入无菌水研磨成糊状，得到葱研磨液，纱布过滤后，得到未发酵葱渣和初始未发酵葱滤液，初始未发酵葱滤液无菌过滤得到未发酵葱滤液；
8、（3）氯化胆碱和l-抗坏血酸加入水混合溶解，然后无菌过滤，得混合液a；
9、（4）琼脂粉和tsb培养基加入水搅拌均匀，得培养基b，培养基b、发酵葱渣和未发酵葱渣高压蒸汽灭菌；
10、（5）在无菌环境中，将发酵葱渣、未发酵葱渣、发酵葱滤液、未发酵葱滤液、混合液a和培养基b混合均匀，得到无菌葱蝇人工饲料。
11、进一步的，步骤（1）中，葱研磨液和葱蝇幼虫研磨液混合，置于摇床培养箱中，25℃、180rpm的条件下发酵12h。
12、进一步的，步骤（1）中葱蝇幼虫的数量是10-20只。
13、进一步的，步骤（1）、步骤（2）、步骤（3）中无菌过滤的滤膜孔径为0.22μm。
14、第三方面，本专利技术提供一种无菌葱蝇人工饲料在饲养无菌葱蝇中的应用。
15、本专利技术的有益效果在于：
16、葱蝇取食的食物需要经过肠道微生物的辅助消化才能够被吸收利用，从而满足葱蝇的成长发育需求。而无菌葱蝇在生长发育过程中没有生存所需的微生物环境，专利技术人经实验发现，无菌葱蝇幼虫在取食未经发酵的食物时会生长缓慢甚至中毒死亡，但是在取食全发酵食物时，会出现营养不足导致生长缓慢甚至死亡的情况。本专利技术提供的无菌葱蝇人工饲料经过半发酵处理能满足无菌葱蝇的营养需求，让无菌葱蝇保持无菌状态进行全虫态发育。
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1.一种无菌葱蝇人工饲料，其特征在于，无菌葱蝇人工饲料由经灭菌处理的原料混合制备，原料包括：半发酵葱滤液、半发酵葱渣、氯化胆碱、L-抗坏血酸、琼脂粉、TSB培养基、水；其中半发酵葱滤液包括发酵葱滤液和未发酵葱滤液，半发酵葱渣包括发酵葱渣和未发酵葱渣，发酵葱渣、发酵葱滤液分别为葱研磨液与葱蝇幼虫研磨液混合发酵后的固相产物、液相产物。
2.如权利要求1所述的无菌葱蝇人工饲料，其特征在于，原料包括：发酵葱渣5-10g、未发酵葱渣5-10g、发酵葱滤液80-100ml、未发酵葱滤液80-100ml、氯化胆碱0.2-0.5g、L-抗坏血酸0.5-1.0g、琼脂粉2-3g、TSB培养基5-8g、水100-150ml。
3.如权利要求1所述的无菌葱蝇人工饲料，其特征在于，原料包括：发酵葱渣5g、未发酵葱渣5g、发酵葱滤液80ml、未发酵葱滤液80ml、氯化胆碱0.24g、L-抗坏血酸0.56g、琼脂粉2g、TSB培养基6g、水103ml。
4.一种如权利要求1所述的无菌葱蝇人工饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.如权利要求4所述的无菌
6.如权利要求4所述的无菌葱蝇人工饲料的制备方法，其特征在于，步骤（1）中葱蝇幼虫的数量是10-20只。
7.如权利要求4所述的无菌葱蝇人工饲料的制备方法，其特征在于，步骤（1）、步骤（2）、步骤（3）中无菌过滤的滤膜孔径为0.22μm。
8.一种如权利要求1所述的无菌葱蝇人工饲料在饲养无菌葱蝇中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种无菌葱蝇人工饲料，其特征在于，无菌葱蝇人工饲料由经灭菌处理的原料混合制备，原料包括：半发酵葱滤液、半发酵葱渣、氯化胆碱、l-抗坏血酸、琼脂粉、tsb培养基、水；其中半发酵葱滤液包括发酵葱滤液和未发酵葱滤液，半发酵葱渣包括发酵葱渣和未发酵葱渣，发酵葱渣、发酵葱滤液分别为葱研磨液与葱蝇幼虫研磨液混合发酵后的固相产物、液相产物。
2.如权利要求1所述的无菌葱蝇人工饲料，其特征在于，原料包括：发酵葱渣5-10g、未发酵葱渣5-10g、发酵葱滤液80-100ml、未发酵葱滤液80-100ml、氯化胆碱0.2-0.5g、l-抗坏血酸0.5-1.0g、琼脂粉2-3g、tsb培养基5-8g、水100-150ml。
3.如权利要求1所述的无菌葱蝇人工饲料，其特征在于，原料包括：发酵葱渣5g、未发酵葱渣5g、发酵葱滤...
【专利技术属性】
技术研发人员：周方园，张新建，吴晓青，范素素，曹鑫，赵晓燕，张广志，谢雪迎，
申请(专利权)人：山东省科学院生态研究所山东省科学院中日友好生物技术研究中心，
类型：发明
国别省市：
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