一种菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，公开了一种菌剂及其制备方法和应用，该菌剂包括海内氏芽孢杆菌和载体，海内氏芽孢杆菌的保藏编号为GDMCC61610，载体包括木屑和餐厨垃圾。本发明专利技术菌剂中的海内氏芽孢杆菌具有耐高温能力，可在高温(50

【技术实现步骤摘要】
一种菌剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，特别涉及一种菌剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]餐厨垃圾产生量大，含水率高，有机质含量，高油、高盐，同时又易腐败变质。好氧发酵是餐厨垃圾处理的重要手段之一。目前餐厨垃圾好氧发酵工艺分为两种，一种是好氧堆肥，发酵周期长，需要45
‑
60天，另一种是餐厨垃圾处理机发酵。
[0003]目前市面上机器设备以12
‑
48h高温加热干燥方式为主，主要存在如下问题:1)采取短时高温加热干燥，有机酸、磷酸盐积累导致产品电导率EC高；2)高温加热烘干，设备运行能耗极高，吨垃圾处理比能耗普遍大于150kKW
·
h
·
d
‑1。餐厨垃圾通过机械脱水后，含水率还高达70％，由于其有机质易于生物降解而导致很容易腐败变质，如何有效地进行脱水是亟待解决的问题。

技术实现思路

[0004]本专利技术目的在于提供一种菌剂，以解决现有技术中所存在的一个或多个技术问题，至少提供一种有益的选择或创造条件。
[0005]为解决上述技术问题所采用的技术方案:
[0006]本专利技术的第一方面提供一种菌剂，所述菌剂包括海内氏芽孢杆菌和载体，所述海内氏芽孢杆菌的保藏编号为GDMCC61610，所述载体包括木屑和餐厨垃圾。
[0007]本专利技术所述海内氏芽孢杆菌(Bacillus haynesii)，于2021年4月23日保存于广东省微生物菌种保藏中心(简称GDMCC，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼，广东省科学院微生物研究所，邮编510075)，保藏编号为GDMCC61610。
[0008]参照图1，本专利技术提供的海内氏芽孢杆菌菌株为G
+
、好氧，菌体呈长杆状；参照图2，在PCA培养基上，菌落呈白色、不透明、不规则圆状，生长迅速，50℃培养24小时后菌落直径为2
‑
3mm；参照图3，图3为不同温度下的OD
600
值，可以看出该菌在50
‑
70℃生长活跃，最适生长温度为55
‑
65℃。
[0009]优选地，所述海内氏芽孢杆菌的16S rRNA序列如SEQ ID No:1所示，所述海内氏芽孢杆菌能耐受50
‑
70℃的高温。
[0010]利用引物为(27f):5
′‑
AGA GTT TGA TCC CTC AG
‑3′
和(1492r)5
′‑
GTT TAC CTT GTT ACG ACT T
‑3′
经PCR扩增该菌株16S rRNA基因，测序结果见SEQ ID No:1所示，将获得的基因序列提交到NCBI GenBank采用BLAST程序进行序列分析，结果显示，海内氏芽孢杆菌菌株的基因序列与Bacillus haynesii(海内氏芽孢杆菌)的相似度最高，确定该菌株为Bacillus haynesii。
[0011]SEQ ID No:1
[0012]16S ribosomal RNA，partial sequence(1384bp)
[0013]ATTTGTCACTTCGGCGGCTGGCTCCAAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGT
GTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAGCTTCACGCAGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGAACTGAGAACAGATTTGTGGGATTGGCTTAGCCTCGCGGCTTCGCTGCCCTTTGTTCTGCCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTAAGATCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACTCTGCCCCCGAAGGGGAAGCCCTATCTCTAGGGTTGTCAGAGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTTGCTGCAGCACTAAAGGGCGGAAACCCTCTAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCGCGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGAATTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGTTCCCCAGTTTCCAATGACCCTCCCCGGTTGAGCCGGGGGCTTTCACATCAGACTTAAGAAACCGCCTGCGCGCGCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAGTACCGTCAAG
[0014]优选地，所述海内氏芽孢杆菌的活菌数为108‑
109cfu/g。
[0015]本专利技术的第二方面提供所述菌剂的制备方法，包括以下步骤:
[0016]1)将所述海内氏芽孢杆菌的纯菌种接种到牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基上，在45
‑
65℃下培养至长满整个斜面培养基，取活化的菌种置于牛肉膏蛋白胨液态培养基中，在温度50
‑
65℃，转速120
‑
200rpm的摇床上振荡培养1
‑
2天，得摇瓶种子液；将摇瓶种子液按1
‑
10％的比例接种到发酵罐中的培养料中进行发酵生产，发酵罐的基本工作参数设置为:温度为50
‑
65℃，pH为6.6
‑
7.2，通气量为0.3
‑
0.6V/V
·
min，罐压:0.04
‑
0.06Mpa，搅拌转速100
‑
400转/分钟，发酵24h后，取发酵液检测，当OD
600
≥1.5，终止发酵，得到发酵液；
[0017]2)将所述发酵液以约6000r/min离心10
‑
30min，取沉淀物用无菌水稀释得到活菌浓度≥109cfu/ml的菌液；
[0018]3)将所述菌液与载体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种菌剂，其特征在于，包括海内氏芽孢杆菌和载体，所述海内氏芽孢杆菌的保藏编号为GDMCC61610，所述载体包括木屑和餐厨垃圾。2.根据权利要求1所述的菌剂，其特征在于，所述海内氏芽孢杆菌的16S rRNA序列如SEQ ID No:1所示，所述海内氏芽孢杆菌能耐受50
‑
70℃的高温。3.根据权利要求1所述的菌剂，其特征在于，所述海内氏芽孢杆菌的活菌数为108‑
109cfu/g。4.权利要求1
‑
3任一项所述的菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:1)将所述海内氏芽孢杆菌进行活化，培养，发酵，得...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔维杰，侯胜春，胡亚冬，雷明科，范德朋，
申请(专利权)人：碧沃丰生物科技广东股份有限公司，
类型：发明
国别省市：