小儿肺热咳喘颗粒中连翘的含量测定方法技术

本发明专利技术提供一种小儿肺热咳喘颗粒中连翘的含量测定方法，以戊烷磺酸钠

【技术实现步骤摘要】
小儿肺热咳喘颗粒中连翘的含量测定方法


[0001]本专利技术涉及连翘含量测定领域，特别涉及小儿肺热咳喘颗粒中连翘的含量 测定方法。

技术介绍

[0002]小儿肺热咳喘颗粒为十一味中药的复方制剂，具有清热解毒、宣肺止咳、 化痰平喘的功能，主要用于感冒、支气管炎、喘息性支气管炎、支气管肺炎属 痰热壅肺证者。连翘：性味“苦，微寒。”。功效与主治“清热解毒，消肿散 结，疏散风热。用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热人 营，高热烦渴，神昏发斑，热淋涩痛。中药提取物粘性较大，与辅料混合制成 颗粒剂，辅料会干扰连翘含量的检测，影响检测结果的准确性。例如，《中国 药典》2020年版第一部中连翘质量检测标准，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充 剂；以乙腈
‑
水(25：75)为流动相；检测波长为277nm，但在所获得的HPLC 谱图中连翘峰分离不够明显，连翘峰保留时间偏长。CN201410386728.2一种原 料药连翘苷的质量检测方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm
×ꢀ
250mm，ODS2，5μm)；乙腈(A)
‑
水(B)为流动相；梯度洗脱：0min(25％A)
→ꢀ
12min(25％A)
→
15min(65％A)
→
20min(65％A)
→
25min(25％A)
→
30min(25％A)； 流速为1.0mL/min；柱温30℃；检测波长为277nm，该检测方法不适用于小儿 肺热咳喘颗粒中连翘的含量测定。

技术实现思路

[0003]鉴以此，本专利技术提出一种专属性强、准确度高的检测方法，检测小儿肺热 咳喘颗粒中连翘的含量。
[0004]本专利技术的技术方案是这样实现的：
[0005](1)取小儿肺热咳喘颗粒，用质量浓度为0.8～1.2％N,N
‑
二甲基甲酰胺甲醇 溶液溶解，配制成贮备液，贮备液浓度为1～5mg/ml；
[0006](2)量取步骤(1)贮备液置于量瓶中，用溶剂稀释，作为供试品溶液， 供试品浓度为0.01～0.05mg/ml；
[0007](3)将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行检测，确定小儿肺热咳喘 颗粒中连翘含量，
[0008]其中，高效液相色谱法的色谱条件如下：
[0009]色谱柱：C18色谱柱，
[0010]流动相A：戊烷磺酸钠
‑
磷酸二氢铵
‑
乙腈，使用盐酸溶液调节pH值至 3.0～3.5，
[0011]流动相B：甲酸
‑
甲醇
‑
乙腈，
[0012]流速：1～2ml/min，
[0013]柱温：25～35℃，
[0014]检测波长：240～260nm；
[0015]洗脱条件为：
[0016]S1:第0～13.0min，流动相A与流动相B的体积比为55～60:40～45；
[0017]S2:第13.01～17.0min，流动相A与流动相B的体积比为25～30:70～75；
[0018]S3:第17.01～20.0min，流动相A与流动相B的体积比为55～60:40～45。
[0019]进一步的，流动相A中戊烷磺酸钠溶液和磷酸二氢铵溶液和乙腈的体积比 为(25～30)：(40～45)：(25～35)。
[0020]进一步的，溶剂由流动相A和流动相B混合而成，流动相A和流动相B体 积比为3～5：1～2。
[0021]进一步的，流动相A中戊烷磺酸钠溶液浓度为0.4～0.6mol/L，磷酸二氢铵 溶液浓度为0.4～0.6mol/L。
[0022]进一步的，流动相A使用盐酸溶液调节pH值至3.20。
[0023]进一步的，流动相B为磷酸和甲醇和乙腈体积比为(0.5～1)：(30～35)： (65～70)。
[0024]进一步的，色谱柱为C18，直径为4.6mm，柱长为150mm，填充料的粒径 为5um。
[0025]进一步的，柱温为30℃。
[0026]进一步的，检测波长为250nm。
[0027]进一步的，流速为1.5ml/min。
[0028]进一步的，进样体积为20μl。
[0029]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本申请提供的小儿肺热咳喘颗粒 中连翘的含量测定方法，采用高效液相色谱法检测，色谱条件包括以C18柱为 色谱柱，以戊烷磺酸钠
‑
磷酸二氢铵
‑
乙腈混合液为流动相A，以甲酸
‑
甲醇
‑
乙腈 混合液为流动相B，选择梯度洗脱，本专利技术色谱条件提高连翘峰和相邻峰的分离 度，避免相邻峰干扰连翘峰的含量测定，本专利技术提供小儿肺热咳喘颗粒中连翘 的含量测定方法具有专属性强、准确度高，操作简便等优点。
[0030]其中，本专利技术优选流速为1.5ml/min，优化连翘峰保留时间，缩短检测时间， 同时改善连翘峰的拖尾现象，提高连翘含量检测的准确性，连翘峰保留时间为 10.7min，理论塔板数均在2000以上，拖尾因子在0.90～1.05范围内，分离度大 于1.5；小儿肺热咳喘颗粒中连翘只是其中一种原料药，参照标准采用277nm进 行检测，由于连翘在小儿肺热咳喘颗粒中含量低以及被其他的原料药和辅料干 扰，是无法准确测定小儿肺热咳喘颗粒中连翘的含量，本专利技术优选250nm作为 检测的波长，保证连翘峰不被其他原料药峰、辅料峰以及溶剂峰干扰。
附图说明
[0031]图1本申请实施例1线性关系试验标准曲线。
具体实施方式
[0032]为了更好理解本专利技术
技术实现思路
，下面提供具体实施例，对本专利技术做进一步 的说明。
[0033]本专利技术实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0034]本专利技术实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0035]实施例1小儿肺热咳喘颗粒中连翘含量测定
[0036](1)流动相A：0.5mol/L戊烷磺酸钠溶液、0.5mol/L磷酸二氢铵溶液和乙 腈按照体积比为25：40：35混合，用盐酸溶液调节pH值至3.20，制得流动相 A；
[0037](2)流动相B：由甲酸、甲醇和乙腈按照体积比为0.5：30：70混合，制 得流动相B；
[0038](3)溶剂：流动相A和流动相B按照体积比为3：1混合制得；
[0039](4)取小儿肺热咳喘颗粒，用质量浓度为1.0％N,N
‑
二甲基甲酰胺甲醇溶液 溶解，配制成贮备液，贮备液浓度为1mg/ml；
[0040](5)量取步骤(4)贮备液置于量瓶中，用步骤(3)制得的溶剂稀释，作 为供试品溶液，供试品浓度为0.01mg/ml；
[0041](6)将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行检测，检测小儿肺热咳喘 颗粒中连翘含量；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.小儿肺热咳喘颗粒中连翘的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取小儿肺热咳喘颗粒，用质量浓度为0.8～1.2％N,N
‑
二甲基甲酰胺甲醇溶液溶解，配制成贮备液，贮备液浓度为1～5mg/ml；(2)量取步骤(1)贮备液置于量瓶中，用溶剂稀释，作为供试品溶液，供试品浓度为0.01～0.05mg/ml；(3)将供试品溶液注入到高效液相色谱仪中进行检测，检测小儿肺热咳喘颗粒中连翘的含量，其中，高效液相色谱法的色谱条件如下：色谱柱：C18色谱柱，流动相A：戊烷磺酸钠溶液、磷酸二氢铵溶液和乙腈混合制得，使用盐酸溶液调节pH值为3.0～3.5，流动相B：甲酸、甲醇和乙腈混合制得，流速：1～2ml/min，柱温：25～35℃，洗脱条件为：S1:第0～13.0min，流动相A与流动相B的体积比为55～60:40～45；S2:第13.01～17.0min，流动相A与流动相B的体积比为25～30:70～75；S3:第17.01～20.0min，流动相A与流动相B的体积比为55～60:40～45。2.如权利要求1所述的小儿肺热咳喘颗粒中连翘含量测定方法，其特征在于，所述流动相A中戊烷磺酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘景萍，刘全国，陈克领，林海银，吴育强，
申请(专利权)人：海南葫芦娃药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：