一种化合物在制备抗黄曲霉毒素B1毒性的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了结构式如下式(Ⅰ)所示的化合物在制备抗黄曲霉毒素B1毒性的药物中的应用。所述化合物自身对细胞的生长不会产生影响，但是能降低黄曲霉毒素B1对细胞产生的毒性，提高细胞的存活率，降低黄曲霉毒素B1导致的细胞氧自由基水平和脂质过氧化产物丙二醛水平的提升，从而抵抗黄曲霉毒素B1的细胞毒性。从而抵抗黄曲霉毒素B1的细胞毒性。从而抵抗黄曲霉毒素B1的细胞毒性。从而抵抗黄曲霉毒素B1的细胞毒性。

【技术实现步骤摘要】
一种化合物在制备抗黄曲霉毒素B1毒性的药物中的应用


[0001]本专利技术属于制药领域，涉及一种化合物在制备抗黄曲霉毒素B1毒性的药物中的应用。

技术介绍

[0002]黄曲霉毒素由黄曲霉和寄生曲霉等某些菌株产生的真菌毒素，是一种广泛存在的真菌毒素，它有多种衍生物，其中以黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)的毒性、致癌性最强。黄曲霉毒素主要存在于大豆、玉米、花生等粮油产品，在坚果和中药材中也有发现。黄曲霉毒素在我国主要粮食作物中均有污染的情况，对于花生玉米大豆粮油作物污染较严重，在动物饲料中尤为严重，动物饲料所用的植物性原料容易因为存储堆积不当操作造成霉变，容易导致黄曲霉毒素产生。AFB1的毒性作用极强，具有遗传毒性以及导致肝细胞癌的能力，AFB1与乙型肝炎病毒(HBV)具有协同作用，能够增加肝癌发生的风险并加速肝癌的发展。除此之外AFB1也可以促进包括HCV、酒精导致的肝硬化疾病发展为肝癌。除了遗传毒性与致癌作用外，AFB1还可能造成营养不良、生长迟缓和免疫功能下降，严重影响着人类的身体健康状况。
[0003]黄曲霉毒素B1当前的防控主要依靠控制黄曲霉毒素的来源来进行，比如通过改良种植技术、改良储存方法防止AFB1的产生，通过物理、化学、生物方式降解AFB1。此外，对于摄入黄曲霉毒素后的治疗也有一定的进展，如一些已知药物或化合物能抵抗AFB1毒性作用，但是无特效治疗药物，因此研究并开发新型的针对AFB1毒性作用的治疗药物对于养殖业及人畜健康极为重要。
[0004]申请人使用计算机辅助药物设计(computer aided drug design，CADD)，通过分子模拟对接筛选，发现一种已知的人工合成小分子化合物具有抗黄曲霉毒素B1毒性的作用，目前尚未有相关研究报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于一种化合物在制备抗黄曲霉毒素B1毒性的药物中的应用，旨在为临床提供一种潜在的治疗AFB1中毒的药物。
[0006]本专利技术中的化合物其结构式如下式(Ⅰ)所示：
[0007][0008]式(Ⅰ)中，R1代表氧原子或烷氧基；R2代表H、烷基、苯烷基、苯、烷氧基取代的苯。
[0009]进一步地，所述化合物的结构式如式(Ⅱ)
‑
(
Ⅴ
)所示：
[0010][0011]最佳的，所述化合物的结构式如式(Ⅱ)所示，该化合物的名称为1
‑
(1,3
‑
苯并二恶醇
‑5‑
酰氧基)
‑3‑
[4
‑
(2
‑
甲氧基苯基)
‑1‑
哌嗪基]‑2‑
丙醇；英文名(1
‑
(1，3
‑
benzodioxol
‑5‑
yloxy)
‑3‑
[4
‑
(2
‑
methoxyphenyl)
‑1‑
piperazinyl]‑2‑
propanol)；CAS号：380192
‑
64
‑
3。
[0012]本专利技术在多种细胞上验证了上述化合物的功能，结果表明：
[0013]化合物对正常细胞(猪肾细胞)没有显著的毒性作用，也不会影响细胞的生长，但是能降低黄曲霉毒素B1对正常细胞产生的毒性，提高细胞的存活率，降低黄曲霉毒素B1导致的细胞氧自由基水平和脂质过氧化产物丙二醛水平的提升，从而抵抗黄曲霉毒素B1的细胞毒性。
附图说明
[0014]图1：化合物M2处理PK
‑
15细胞后对细胞活性的影响。
[0015]图2：化合物M2对AFB1细胞毒性的抵制能力。
[0016]图3：化合物M2对AFB1致死PK
‑
15细胞IC
50
值的影响。
[0017]图4：化合物M2对AFB1导致的PK
‑
15细胞氧自由基ROS水平上升的影响。
[0018]图5：化合物M2对AFB1导致的PK
‑
15细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平上升的影响。图中，**P<0.05。
[0019]图6：8种化合物抵抗AFB1对人肝癌细胞系Huh7毒性的作用。图中，****P<0.001；***P<0.01。
[0020]图7：芝麻酚对AFB1细胞毒性的抵制能力。图中，***P<0.01。
具体实施方式
[0021]下面通过具体实施例对本专利技术进行详细说明。
[0022]试验材料：
[0023]1.化合物
[0024]试验中共使用了8种化合物，申请人将其命名为M1
‑
8，这些化合物均为已知化合物，可通过合成或商业途径获得。本实验购自SPECS公司。
[0025]芝麻酚购自阿拉丁。
[0026][0027]2.细胞
[0028]猪肾细胞系(Pig Kidney 15，PK
‑
15)购自美国菌种保藏中心(ATCC)，并由本实验室保存使用。
[0029]人肝癌细胞系(Huh
‑
7)来源于武汉大学中国典型培养物保藏中心。
[0030]3.试剂
[0031]Aflatoxin B1：购自Sigama。
[0032]DMEM培养基：Gibico。
[0033]胎牛血清：德国PAN。
[0034]CCK
‑
8试剂盒：上海碧云天生物技术有限公司。
[0035]ROS试剂盒：江苏凯基生物技术股份有限公司。
[0036]实施例1：M2对PK
‑
15细胞的毒性作用
[0037]1.野生型PK
‑
15细胞的培养
[0038]将对数生长期的PK
‑
15细胞从T25的细胞培养瓶消化下来后，根据细胞密度用含10％胎牛血清的DMEM完全培养基稀释至106个/mL的细胞悬浮液，将细胞混合均匀后用排枪接种到96孔板中，每个孔中加入100μL细胞悬浮液，在周围孔加入相同体积的PBS，轻轻拍打培养板的周围，使细胞分布均匀，待细胞沉淀到培养板底部后放入37℃，5％CO2的细胞培养箱中；待细胞长至50％
‑
60％，吸去培养基，用无菌PBS将细胞洗一遍，后加入无血清DMEM培养基，12h后待细胞周期同步化后吸去培养基。
[0039]2.细胞给药
[0040]M2用DMSO溶解，后用DMEM完全培养基进一步稀释成浓度为2、4、8、16、20、24、28、32μg/mL，96孔板中每孔加入100μL，每个剂量组设置6个平行孔，同时设空白组(不加细胞只加培养基)和对照组(加入与20μg/mL药物组同体积的DMSO)，在周围孔加入相同体积的PBS，放入培养箱中培养；加本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.结构式如下式(Ⅰ)所示的化合物在制备抗黄曲霉毒素B1毒性的药物中的应用,式(Ⅰ)中，R1代表氧原子或烷氧基；R2代表H、烷基、苯烷基、苯、烷氧基取代的苯。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述化合物的结构式如式(Ⅱ)
‑
(
Ⅴ
)所示：3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述化合物的结构式如式(Ⅱ)所示，该化合物的名称为1
‑
(1,3
‑
苯并二恶醇
‑5‑
酰氧基)
‑3‑
[4
‑
(2
‑
甲氧基苯基)
‑1‑
哌嗪基]
‑2‑
丙醇；英文名(1
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：王旭，胡嗣祎，赵书红，谢胜松，黄玲利，彭大鹏，郝海红，程古月，李新云，张金福，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：