CD86变体免疫调节蛋白及其用途制造技术

本文提供了变体CD86多肽、包含变体CD86多肽的免疫调节蛋白和编码此类蛋白质的核酸。所述免疫调节蛋白提供了针对多种免疫学和肿瘤学病症的治疗效用。提供了用于制备和使用此类蛋白质的组合物和方法。蛋白质的组合物和方法。蛋白质的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD86变体免疫调节蛋白及其用途
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求2018年11月30日提交的标题为“CD86变体免疫调节蛋白及其用途(CD86 VARIANT IMMUNOMODULATORY PROTEINS AND USES THEREOF)”的美国临时申请号62/774,131和2019年6月14日提交的标题为“CD86变体免疫调节蛋白及其用途(CD86 VARIANT IMMUNOMODULATORY PROTEINS AND USES THEREOF)”的美国临时申请号62/862,001的优先权，将其内容通过引用以其整体并入。通过引用并入序列表
[0002]本申请是与电子格式的序列表一起提交的。序列表以2019年11月27日创建的名为761612002840SeqList.txt的文件提供，其大小为599,034字节。将在电子格式的序列表中的信息通过引用以其整体并入。


[0003]本公开文本涉及用于在癌症和免疫疾病的治疗中调节免疫应答的治疗组合物。在一些方面，本公开文本涉及CD86的特定变体及其免疫调节蛋白，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含细胞外结构域或IgV结构域或其特异性结合片段，其中所述变体CD86多肽包含在未经修饰的CD86多肽或其特异性结合片段中的一个或多个氨基酸修饰，所述一个或多个氨基酸修饰对应于选自以下的关于SEQ ID NO:29中所示位置的一个或多个位置：13、18、25、28、33、38、39、40、43、45、52、53、60、68、71、77、79、80、82、86、88、89、90、92、93、97、102、104、113、114、123、128、129、132、133、137、141、143、144、148、153、154、158、170、172、175、178、180、181、183、185、192、193、196、197、198、205、206、207、212、215、216、222、223、或224。2.根据权利要求1所述的变体CD86多肽，其中所述氨基酸修饰包括氨基酸取代、缺失或插入。3.根据权利要求1或权利要求2所述的变体CD86多肽，其中所述未经修饰的CD86多肽是哺乳动物CD86多肽或其特异性结合片段。4.根据权利要求3所述的变体CD86多肽，其中所述未经修饰的CD86多肽是人CD86多肽或其特异性结合片段。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86多肽包含人CD86的细胞外结构域，其中所述一个或多个氨基酸修饰是在所述未经修饰的CD86多肽的细胞外结构域的一个或多个残基中。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述未经修饰的CD86多肽包含(i)SEQ ID NO:29中所示的氨基酸序列；(ii)与SEQ IDNO:29具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或(iii)其部分，所述其部分包含IgV结构域或所述IgV结构域的特异性结合片段。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述未经修饰的CD86包含SEQ ID NO:29中所示的氨基酸序列。8.根据权利要求6所述的变体CD86多肽，其中所述其部分包含所述IgV结构域的氨基酸残基33
‑
131或24
‑
134或所述IgV结构域的特异性结合片段。9.根据权利要求1
‑
6和权利要求8中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述未经修饰的CD86多肽包含(i)SEQ ID NO:123中所示的氨基酸序列；(ii)与SEQ ID NO:123具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或(iii)其部分，所述其部分包含IgV结构域或所述IgV结构域的特异性结合片段。10.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述未经修饰的CD86包含SEQ ID NO:123中所示的氨基酸序列。11.根据权利要求1
‑
6、8和9中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述未经修饰的CD86多肽包含(i)SEQ ID NO:122中所示的氨基酸序列；(ii)与SEQ ID NO:122具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或(iii)或其特异性结合片段。12.根据权利要求1
‑
6、8、9和11中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述未经修饰的CD86包含SEQ ID NO:122中所示的氨基酸序列。13.根据权利要求1
‑
12中任一项所述的变体CD86多肽，其中：所述特异性结合片段具有至少50、60、70、80、90、95个或更多个氨基酸的长度；或者所述特异性结合片段包含如下长度，所述长度为如SEQ ID NO:2的残基33
‑
131所示的IgV结构域的长度的至少80％。
14.根据权利要求1
‑
13中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86包含多达1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸修饰，任选地氨基酸取代、插入和/或缺失。15.根据权利要求1
‑
14中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述一个或多个氨基酸修饰是选自以下的一个或多个氨基酸取代：A13V、Q18K、Q25L、S28G、F33I、E38V、N39D、L40M、L40S、N43K、V45I、F52L、D53G、M60K、D68N、T71A、L77P、I79N、K80E、K80M、K80R、K82T、Q86K、Q86R、I88F、I88T、I89V、H90 L、H90Y、K92I、K93T、M97L、Q102H、N104S,F113S、S114G、N123D、V128A、Y129N、L132M、T133A、I137T、P141A、P143H、K144E、V148D、K153E、K153R、N154D、E158G、V170D、E172G、D175E、I178T、L180S、S181P、S183P、P185S、T192N、I193V、I196V、L197M、E198D、L205S、S206T、S207P、E212V、D215V、P216H、H222T或I223F、或其保守氨基酸取代。16.根据权利要求1
‑
15中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含选自以下的一个或多个氨基酸修饰：Q25L/T71A/H90Y、Q25L/D53G/E212V、Q25L/H90L、N43K/I79N/H90L/I178T/E198D、A13V/Q25L/H90L/S181P/L197M/S206T、Q25L/Q86R/H90L/K93T/L132M/V148D/S181P/P216H、Q25L/F33I/H90Y/V128A/P141A/E158G/S181P、Q25L/N39D/K80R/Q86R/I88F/H90L/K93T/N123D/N154D、Q25L/H90L/K93T/M97L/T133A/S181P/D215V、Q25L/Q86R/H90L/N104S、Q25L/L40M/H90L/L180S/S183P、Q18K/Q25L/F33I/L40S/H90L、Q25L/Q86K/H90L/I137T/S181P、Q25L/L77P/H90Y/K153R/V170D/S181P、Q25L/S28G/F33I/F52L/H90L/Q102H/I178T、Q25L/F33I/H90L/K144E/L180S、Q25L/F33I/H90L/K153E/E172G/T192N、Q25L/F33I/Q86R/H90Y/D175E/I196V/E198D、Q25L/V45I/D68N/H90L/S183P/L205S、E38V/S114G/P143H、H90Y/L180S、H90Y/Y129N、I89V/H90L/I193V、K80E/H90Y/H222T/I223F/P224L、K80M/I88T、K92I/F113S、M60K/H90L、Q25L/F33I/H90L、Q25L/F33I/Q86R/H90L/K93T、Q25L/H90L、Q25L/H90L/P185S、Q25L/H90L/P185S/P224L、Q25L/H90L/S179R、Q25L/H90Y/S181P/I193V、Q25L/K82T/H90L/T152S/S207P、Q25L/Q86R/H90L/K93T或S28G/H90Y。17.根据权利要求1
‑
14中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述一个或多个氨基酸修饰是在位置25和/或位置90处。18.根据权利要求1
‑
14和17中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述一个或多个氨基酸修饰包括Q25L、H90Y或H90L。19.根据权利要求1
‑
14和17中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述一个或多个氨基酸修饰包括在位置25和位置90处的修饰。20.根据权利要求19所述的变体CD86多肽，其中所述一个或多个氨基酸修饰选自Q25L/H90Y或Q25L/H90L。21.根据权利要求1
‑
20中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含选自以下的一个或多个氨基酸修饰：Q25L/T71A/H90Y、Q25L/D53G/E212V、Q25L/H90L、N43K/I79N/H90L/I178T/E198D、A13V/Q25L/H90L/S181P/L197M/S206T、Q25L/Q86R/H90L/K93T/L132M/V148D/S181P/P216H、Q25L/F33I/H90Y/V128A/P141A/E158G/S181P、Q25L/N39D/K80R/Q86R/I88F/H90L/K93T/N123D/N154D、Q25L/H90L/K93T/M97L/T133A/S181P/D215V、Q25L/Q86R/H90L/N104S、Q25L/L40M/H90L/L180S/S183P、Q18K/Q25L/F33I/L40S/H90L、Q25L/Q86K/H90L/I137T/S181P、Q25L/L77P/H90Y/K153R/V170D/S181P、Q25L/S28G/F33I/F52L/H90L/
Q102H/I178T、Q25L/F33I/H90L/K144E/L180S、Q25L/F33I/H90L/K153E/E172G/T192N、Q25L/F33I/Q86R/H90Y/D175E/I196V/E198D、Q25L/V45I/D68N/H90L/S183P/L205S/E212X、H90Y/L180S、H90Y/Y129N、I89V/H90L/I193V、K80E/H90Y/H222T/I223F/P224L、M60K/H90L、Q25L/F33I/H90L、Q25L/F33I/Q86R/H90L/K93T、Q25L/H90L、Q25L/H90L/P185S、Q25L/H90L/P185S/P224L、Q25L/H90L/S179R、Q25L/H90Y/S181P/I193V、Q25L/K82T/H90L/T152S/S207P、Q25L/Q86R/H90L/K93T、S28G/H90Y、A13V/Q25L/H90L、Q25L/H90L/K93T/M97L、Q25L/Q86R/H90L或I89V/H90L。22.根据权利要求1
‑
21中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰A13V/Q25L/H90L。23.根据权利要求1
‑
22中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰A13V/Q25L/H90L/S181P/L197M/S206T。24.根据权利要求1
‑
21中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰Q25L/H90L/K93T/M97L。25.根据权利要求1
‑
21和24中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰Q25L/H90L/K93T/M97L/T133A/S181P/D215V。26.根据权利要求1
‑
21和24中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰Q25L/Q86R/H90L。27.根据权利要求1
‑
21和26中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰Q25L/Q86R/H90L/N104S。28.根据权利要求1
‑
21中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰I89V/H90L。29.根据权利要求1
‑
21和28中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰I89V/H90L/I193V。30.根据权利要求1
‑
21中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰M60K/H90L。31.根据权利要求1
‑
21中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰Q25L/F33I/H90L。32.根据权利要求1
‑
21中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽包含一个或多个氨基酸修饰Q25L/H90L/P185S。33.根据权利要求1
‑
32中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86多肽包含展现与SEQ ID NO:29或其特异性结合片段至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。34.根据权利要求1
‑
33中任一项所述的变体CD86多肽，其中与所述未经修饰的CD86对CD28的胞外结构域的结合相比，所述变体CD86多肽以增加的亲和力特异性地结合至相同胞外结构域。35.根据权利要求34所述的变体CD86多肽，其中所述结合亲和力增加至少或至少约1.5倍、至少或至少约2.0倍、至少或至少约5.0倍、至少或至少约10倍、至少或至少约20倍、至少或至少约30倍、至少或至少约40倍、至少或至少约50倍、至少或至少约60倍、至少或至少约70倍、至少或至少约80倍、至少或至少约90倍、至少或至少约100倍、或至少或至少约125倍。
36.根据权利要求1
‑
35中任一项所述的变体CD86多肽，其中与所述未经修饰的CD86对CTLA
‑
4的胞外结构域的结合相比，所述变体CD86多肽以降低的亲和力特异性地结合至相同胞外结构域。37.根据权利要求36所述的变体CD86多肽，其中所述降低的结合亲和力是降低至少或至少约1.2倍、至少或至少约1.4倍、至少或至少约1.5倍、至少或至少约1.75倍、至少或至少约2.0倍、至少或至少约2.5倍、至少或至少约3.0倍、至少或至少约4.0倍、或至少或至少约5.0倍。38.根据权利要求1
‑
37中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86多肽以与所述未经修饰的CD86对CTLA
‑
4的胞外结构域的结合相同或相似的结合亲和力特异性地结合至相同胞外结构域，任选地其中所述相同或相似的结合亲和力是所述未经修饰的CD86的结合亲和力的从为或约90％至120％。39.根据权利要求1
‑
38中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86多肽包含全细胞外结构域。40.根据权利要求1
‑
39中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86多肽包含SEQ ID NO:85
‑
121中任一个中所示的氨基酸序列或其特异性结合片段、展现与SEQ ID NO:85
‑
121中任一个或其特异性结合片段至少95％序列同一性并且含有SEQ ID NO:85
‑
121中任一个中所示的相应SEQ ID NO的所述氨基酸修饰中的一个或多个的氨基酸序列。41.根据权利要求1
‑
40中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86多肽包含SEQ ID NO:141
‑
177中任一个中所示的氨基酸序列或其特异性结合片段、展现与SEQ ID NO:141
‑
177中任一个或其特异性结合片段至少95％序列同一性并且含有SEQ ID NO:141
‑
177中任一个中所示的相应SEQ ID NO的所述氨基酸修饰中的一个或多个的氨基酸序列。42.根据权利要求34
‑
41中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述CD28是人CD28。43.根据权利要求34
‑
42中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述CTLA
‑
4是人CTLA
‑
4。44.根据权利要求1
‑
43中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽是可溶性蛋白质。45.根据权利要求1
‑
44中任一项所述的变体CD86多肽，其中：所述变体CD86多肽缺乏CD86跨膜结构域和细胞内信号传导结构域；和/或所述变体CD86多肽不能在细胞表面上表达。46.根据权利要求1
‑
45中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽与多聚化结构域连接。47.根据权利要求46所述的变体CD86多肽，其中所述多聚化结构域是Fc结构域或其具有降低的效应子功能的变体。48.根据权利要求1
‑
47中任一项所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽与Fc结构域或其具有降低的效应子功能的变体连接。49.根据权利要求47或权利要求48所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域是人IgG1或者是其具有降低的效应子功能的变体。50.根据权利要求47
‑
49中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域包含SEQ ID NO:229中所示的氨基酸序列或展现与SEQ ID NO:229至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。
51.根据权利要求47
‑
50中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域是或包含SEQ ID NO:229中所示的氨基酸序列。52.根据权利要求47
‑
50中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域是包含选自以下的一个或多个氨基酸修饰的变体IgG1 Fc结构域：E233P、L234A、L234V、L235A、L235E、G236del、G237A、S267K、N297G、V302C和K447del，其每一个均依据EU编号。53.根据权利要求47
‑
50和52中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域包含氨基酸修饰L234A/L235E/G237A。54.根据权利要求47
‑
50、52和53中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域包含依据EU编号的氨基酸修饰C220S。55.根据权利要求47
‑
50和52
‑
54中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域包含依据EU编号的氨基酸修饰K447del。56.根据权利要求47
‑
50和52
‑
55中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域包含SEQ ID NO:230中所示的氨基酸序列或展现与SEQ ID NO:230至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性并且与人IgG1相比包含SEQ ID NO:230中所示的相应氨基酸修饰中的一个或多个的氨基酸序列。57.根据权利要求47
‑
50和52
‑
56中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述Fc结构域是或包含SEQ ID NO:230中所示的氨基酸序列。58.根据权利要求47
‑
57中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86多肽经由接头、任选地G4S接头与所述多聚化结构域或Fc间接连接。59.根据权利要求1
‑
43中任一项所述的变体CD86多肽，其中所述变体CD86多肽是还包含跨膜结构域的跨膜免疫调节蛋白，任选地其中所述跨膜结构域与所述变体CD86多肽的细胞外结构域(ECD)或其特异性结合片段直接或间接连接。60.根据权利要求59所述的变体CD86多肽，其中所述跨膜结构域包含如SEQ ID NO:2的残基248
‑
268所示的氨基酸序列或其功能变体，所述其功能变体展现与SEQ ID NO:2的残基248
‑
268至少85％序列同一性。61.根据权利要求59或权利要求60所述的变体CD86多肽，所述变体CD86多肽还包含胞质结构域，任选地其中所述胞质结构域与所述跨膜结构域直接或间接连接。62.根据权利要求61所述的变体CD86多肽，其中所述胞质结构域是或包含天然CD86胞质结构域。63.根据权利要求61或权利要求62所述的变体CD86多肽，其中所述胞质结构域包含如SEQ ID NO:2的残基269
‑
329所示的氨基酸序列或其功能变体，所述其功能变体展现与SEQ ID NO:2的残基269
‑
329至少85％序列同一性。64.根据权利要求61所述的变体CD86多肽，其中所述胞质结构域包含ITAM信号传导基序和/或是或包含CD3ζ的细胞内信号传导结构域。65.根据权利要求59或权利要求60所述的变体CD86多肽，其中所述多肽不包含胞质信号传导结构域和/或当在细胞上表达时不能介导或调节细胞内信号。66.一种免疫调节蛋白，所述免疫调节蛋白包含更换权利要求1
‑
58中任一项所述的第一变体CD86多肽和根据权利要求1
‑
58中任一项所述的第二变体CD86多肽。67.根据权利要求66所述的免疫调节蛋白，其中所述第一和第二变体CD86多肽经由接
头间接连接。68.根据权利要求66或权利要求67所述的免疫调节蛋白，其中所述第一和第二变体CD86多肽各自与多聚化结构域连接，由此所述免疫调节蛋白是包含所述第一和第二变体CD86多肽的多聚体。69.根据权利要求68所述的免疫调节蛋白，其中所述多聚体是二聚体、任选地同二聚体。70.根据权利要求66
‑
69中任一项所述的免疫调节蛋白，其中所述第一变体CD86多肽和所述第二变体CD86多肽是相同的。71.一种免疫调节蛋白，所述免疫调节蛋白包含直接或经由接头间接与包含免疫球蛋白超家族(IgSF)家族成员的IgSF结构域的第二多肽连接的根据权利要求1
‑
58中任一项所述的变体CD86多肽。72.根据权利要求71所述的免疫调节蛋白，其中所述IgSF结构域是亲和力修饰的IgSF结构域，所述亲和力修饰的IgSF结构域与所述IgSF家族成员的未经修饰的或野生型IgSF结构域相比包含一个或多个氨基酸修饰。73.根据权利要求72所述的免疫调节蛋白，其中所述IgSF结构域是亲和力修饰的IgSF结构域，相比于所述IgSF家族成员的未经修饰的或野生型IgSF结构域与其一个或多个同源结合配偶体的结合，所述亲和力修饰的IgSF结构域展现与相同的一个或多个同源结合配偶体中的一个或多个的改变的结合。74.根据权利要求73所述的免疫调节蛋白，其中相比于所述IgSF家族成员的未经修饰的或野生型IgSF结构域与其一个或多个同源结合配偶体的结合，所述IgSF结构域展现与相同的一个或多个同源结合配偶体中的一个或多个的增加的结合。75.根据权利要求71

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：高山免疫科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：