用于免疫疗法的神经元氧化物合酶抑制剂制造技术

本文公开了用于向有需要的受试者施用免疫疗法和用于治疗有需要的受试者的方法和组合物，其中在所述方法中向受试者施用有效量的nNOS抑制剂以用于在受试者中诱导免疫治疗反应和用于治疗受试者。所公开的方法和组合物可用于治疗患有细胞增殖性疾病或病症例如黑色素瘤的受试者。素瘤的受试者。素瘤的受试者。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于免疫疗法的神经元氧化物合酶抑制剂
[0001]关于联邦资助的研究或开发的声明
[0002]本专利技术是在美国国立卫生研究院授予的GM049725下在政府支持下完成的。政府对本专利技术享有一定的权利。
[0003]相关专利申请的交叉引用
[0004]本申请根据35 U.S.C.
§
119(e)要求2018年12月5日提交的美国临时申请号62/775,534的优先权，其内容通过引用整体并入本文。
技术背景
[0005]本专利技术的领域涉及向有需要的受试者施用免疫疗法的方法。特别地，本专利技术的领域涉及神经元一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂在向患有细胞增殖性疾病和病症例如癌症特别是黑色素瘤的受试者施用免疫疗法的方法中的用途。
[0006]近几十年来，人皮肤黑色素瘤(CM)的发病率持续增加，使这种疾病成为日益严重的公共卫生问题。黑色素瘤占所有皮肤癌病例的不到1％，但占皮肤癌死亡的绝大多数。具有高基因组突变率(43)，它是最致命和最具侵袭性的皮肤癌形式，远端转移患者的五年生存率为15
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20％(1)。(参见例如，Lawrence等人,“Mutational heterogeneity in cancer and the search for new cancer
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associated genes,”Nature 499:214
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218,2013；和2017.Key Statistics for Melanoma Skin Cancer American Cancer Society.https://www.cancer.org/cancer/melanoma
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skin
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cancer/about/key
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stati stics.html，2017年4月17日；它们的内容通过引用整体并入本文)。与手术切除相结合的早期鉴定为患者带来最佳结果。(参见，例如，Rutkowski,等人,“Surgery of Primary Melanomas,”Cancers.2010年6月；2(2):824
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841；和Voss等人,“Improving outcomes in patients with melanoma strategies to ensure an early diagnosis,”Patient Relat Outcome Meas.2015；6:229
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242；它们的内容通过引用整体并入本文)。由于该疾病利用了多种耐药机制，传统细胞毒性化疗的效率非常有限，由于其作用机制缺乏特异性，其也与严重的毒性有关。
[0007]由人免疫细胞产生的干扰素
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γ(IFN
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γ)已被显示在黑色素瘤的发展和进展中起作用。本专利技术人已发现IFN
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γ诱导神经元一氧化氮合酶(nNOS)的表达。此外，专利技术人已经发现，通过抑制nNOS，被IFN
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γ上调的信号转导和转录激活因子1和3(STAT 1/3)的表达被抑制，以及PD
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L1的表达被抑制。PD
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L1增加与免疫抑制相关的黑色素瘤进展。
[0008]本专利技术人首次证明了神经元一氧化氮合酶在IFN
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γ刺激的黑色素瘤进展中的体外和体内作用，这强烈暗示使用nNOS选择性抑制剂作为用于治疗黑色素瘤的创新的新一类方法。本专利技术人的研究还证明了nNOS在调节IFN
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γ诱导的PD
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L1表达方面的重要新作用，这将nNOS鉴定为使用nNOS选择性抑制剂开发用于黑色素瘤患者的有效免疫疗法的新靶点。因此，本专利技术人发现通过抑制nNOS可以有效地抑制黑色素瘤的生长。
[0009]本专利技术人的发现提示用于治疗黑色素瘤。然而，本专利技术人的发现也可能提示用于治疗生长或进展受nNOS表达增加刺激的任何细胞增殖性疾病或病症。特别地，本专利技术人的发现提示用于治疗生长或进展受IFN
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γ诱导的nNOS表达和随后的受试者中免疫调节蛋白
(例如PD
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L1)表达刺激的细胞增殖性疾病和病症。

技术实现思路

[0010]本文公开了用于向有需要的受试者施用免疫疗法和用于治疗有需要的受试者的方法和组合物，其中在所述方法中向受试者施用有效量的nNOS抑制剂以用于在受试者中诱导免疫治疗反应和用于治疗受试者。所公开的方法和组合物可用于治疗患有细胞增殖性疾病或病症例如黑色素瘤的受试者。
[0011]所公开的方法和组合物可用于治疗患有其生长或进展受IFN
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γ刺激的细胞增殖性疾病或病症(例如黑色素瘤)的受试者。该方法通常包括向受试者施用有效量的nNOS抑制剂以降低受试者中免疫调节蛋白的表达，例如有效量的nNOS抑制剂以降低受试者中PD
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L1的表达。
[0012]在所公开的方法中，向受试者施用nNOS抑制剂。在所公开的方法中，还可以向受试者施用额外的治疗剂，例如PD
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L1抑制剂或PD
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1抑制剂。
附图说明
[0013]图1.A)通过基质胶侵袭测定检测的IFN
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γ对黑色素瘤侵袭潜能的影响。所呈现的数据来自用IFN
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γ处理的A375转移性黑色素瘤细胞。*，与对照相比，p<0.05。B)粘附分析。将A375黑色素瘤细胞接种在成纤维细胞单层的顶部，并与IFN
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γ一起孵育1小时，然后进行MTT测定。*，与对照相比，p<0.05。
[0014]图2.A
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C)IFN
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α和IFN
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γ处理对人原代黑色素瘤WM3211细胞(A
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B)和转移性黑色素瘤A375细胞中nNOS表达水平的影响。C)IFN
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α和IFN
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γ对A375转移性黑色素瘤细胞的nNOS表达的不同影响。A375细胞用500单位/mL的IFN
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α或IFN
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γ处理48小时，并收集全细胞裂解物。对样品进行针对nNOS的蛋白质印迹分析。通过检测肌动蛋白进行蛋白质上样的控制。D)在IFN
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α或IFN
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γ处理24小时后，使用DAF
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FM荧光探针通过酶标仪检测细胞内一氧化氮水平。E)IFN
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γ诱导的nNOS表达在nNOS耗尽的黑色素瘤细胞中被废除。用shRNA
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nNOS转染的A375细胞用IFN
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γ处理24小时，然后进行蛋白质印迹分析。
[0015]图3.A)IFN
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γ对黑色素瘤中STAT3和磷酸
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STAT3表达水平的影响。A375细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种治疗有需要的受试者的细胞增殖性疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的神经元一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂以治疗细胞增殖性疾病或病症。2.权利要求1的方法，其中有效量的nNOS抑制剂有效诱导受试者的免疫治疗反应，包括PD
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L1表达的降低。3.权利要求1的方法，其中所述受试者患有黑色素瘤。4.权利要求1的方法，其中所述受试者患有黑色素瘤并且表现出IFN
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γ刺激的黑色素瘤进展或处于发展IFN
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γ刺激的黑色素瘤进展的风险中。5.权利要求1的方法，其中所述受试者患有黑色素瘤并且表现出以nNOS表达水平升高为特征的黑色素瘤或处于发展以nNOS表达水平升高为特征的黑色素瘤的风险中。6.权利要求1的方法，其中所述受试者患有黑色素瘤并且表现出以程序性死亡配体1(PD
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L1)表达水平升高为特征的黑色素瘤或处于发展以程序性死亡配体1(PD
‑
L1)表达水平升高为特征的黑色素瘤的风险中。7.权利要求1的方法，其中所述nNOS抑制剂是具有下式的化合物MAC
‑3‑
190：或其合适的药用盐、溶剂化物或水合物。8.权利要求1的方法，其中所述nNOS抑制剂是具有下式的化合物HH044：或其合适的药用盐、溶剂化物或水合物。9.权利要求1的方法，其还包括向所述受试者施用IFN
‑
α。10....

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：查普曼大学，
类型：发明
国别省市：