LAG-3单克隆抗体或其抗原结合片段及相关用途制造技术

提供抑制LAG-3免疫抑制功能的单克隆抗体或其抗原结合片段及相关用途。进一步地，提供包含所述LAG-3抗体CDR区的小鼠源抗体、嵌合抗体、以及其作为抗肿瘤药物的用途。以及其作为抗肿瘤药物的用途。

【技术实现步骤摘要】
LAG-3单克隆抗体或其抗原结合片段及相关用途
[0001]本专利技术涉及特异性结合免疫调节性受体淋巴细胞活化基因-3（LAG-3）的单克隆抗体及其抗原结合片段，所述抗-LAG-3 抗体CDR 区的嵌合抗体，以及本专利技术的抗体及其抗原结合片段的药物组合物在免疫相关疾病（比如肿瘤）治疗和诊断中的用途。
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技术介绍

[0003]人体通过免疫系统清除肿瘤细胞并抑制肿瘤形成，其中T细胞介导的细胞免疫发挥关键作用。通常，抗原递呈细胞将抗原加工处理降解为抗原肽片段并通过MHC分子将抗原肽递呈给T细胞，启动和激活效应性T细胞，促进T细胞向肿瘤组织迁移，识别并清除肿瘤细胞。当肿瘤细胞使人体免疫系统受到抑制，不能正常杀伤肿瘤细胞，使得肿瘤细胞得以幸存。肿瘤免疫治疗是通过激活免疫系统，恢复机体抗肿瘤免疫反应，从而控制或清除肿瘤的治疗方法。已知包括PD-1和CTLA-4等在内的T细胞共刺激和共抑制分子在调节T细胞活化中发挥重要作用（Chen等，Nature Rev. Immunol. 2013，13：227-242）。
[0004]淋巴细胞活化基因3（1ymphocyte activation gene-3，LAG-3）由Triebel等在1990年首次发现，是免疫球蛋白超家族（immunoglobulins superfamily，IgSF）成员，是免疫负性调控因子。LAG-3主要在活化的T细胞和NK细胞中表达（Triebel等，J Exp Med 1990，171：1393-1405）。研究表明，LAG-3通过下调CD3/TCR活化途径发挥作用。已知的LAG-3配体包括MHCII、Galectin-3和FGL-1。另外，LAG-3在Treg细胞功能方面发挥作用（Pardoll等2012，Nature Reviews Cancer 12:252-264）。
[0005]体外研究显示，LAG-3可抑制抗原依赖性T细胞增殖、活化和动态平衡，其在肿瘤等免疫相关疾病的发生发展中发挥重要作用。用抗-LAG-3抗体阻断LAG-3与MHCII的结合后，T细胞的增殖、活化以及Th1细胞因子的分泌均有改善，有助于T细胞免疫功能的恢复，从而用于疾病比如肿瘤的治疗（Grosso等，J Clin Invest 2007，117:3383-3392；Gandhi等，Blood 2006，108:2280-2289）。
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技术实现思路

[0007]本专利技术提供了与人和/或食蟹猴LAG-3特异性结合的抗体（小鼠源或嵌合形式）和相应的抗原结合片段。本专利技术的抗体可用于各种应用，比如检测LAG-3蛋白、监测免疫细胞LAG-3的表达情况以用于疾病的诊断、靶向表达LAG-3分子的免疫细胞并调节LAG-3活性、刺激患有肿瘤疾病的受试者中的抗原特异性T细胞反应从而用于肿瘤的治疗。
[0008]本专利技术中抗-LAG-3抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，其中：重链可变区包含SEQ ID NO：5的重链CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO：7的重链CDR2氨基酸序列、和SEQ ID NO：9的重链CDR3氨基酸序列；以及轻链可变区包含SEQ ID NO：11的轻链CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO：13的轻链CDR2氨基酸序列、以及SEQ ID NO：15的轻链CDR3氨基酸序列；或者重链可变区包含SEQ ID NO：21的重链CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO：23的重
链CDR2氨基酸序列、和SEQ ID NO：25的重链CDR3氨基酸序列；以及轻链可变区包含SEQ ID NO：27的轻链CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO：29的轻链CDR2氨基酸序列、以及SEQ ID NO：31的轻链CDR3氨基酸序列；或者重链可变区包含SEQ ID NO：37的重链CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO：39的重链CDR2氨基酸序列、和SEQ ID NO：41的重链CDR3氨基酸序列；以及轻链可变区包含SEQ ID NO：43的轻链CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO：45的轻链CDR2氨基酸序列、以及SEQ ID NO：47的轻链CDR3氨基酸序列；或者重链可变区包含SEQ ID NO：53的重链CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO：55的重链CDR2氨基酸序列、和SEQ ID NO：57的重链CDR3氨基酸序列；以及轻链可变区包含SEQ ID NO：59的轻链CDR1氨基酸序列、SEQ ID NO：61的轻链CDR2氨基酸序列、以及SEQ ID NO：63的轻链CDR3氨基酸序列。
[0009]本专利技术的一些具体实施方案中，所述抗体是全长抗体，比如IgG4抗体。
[0010]本专利技术的一些具体实施方案中，所述抗原结合片段是Fab。
[0011]本专利技术的一些具体实施方案中，所述抗体是嵌合抗体。
[0012]本专利技术的一些具体实施方案中，重链可变区包含与SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：33或SEQ ID NO：49所示序列具有至少75％相同性的氨基酸序列。
[0013]本专利技术的一些具体实施方案中，轻链可变区包含与SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：35或SEQ ID NO：51所示序列具有至少75％相同性的氨基酸序列。
[0014]本专利技术的一些具体实施方案中，重链可变区包含SEQ ID NO：1所示序列，且轻链可变区包含SEQ ID NO：3所示序列。
[0015]本专利技术的一些具体实施方案中，重链可变区包含SEQ ID NO：17所示序列，且轻链可变区包含SEQ ID NO：19所示序列。
[0016]本专利技术的一些具体实施方案中，重链可变区包含SEQ ID NO：33所示序列，且轻链可变区包含SEQ ID NO：35所示序列。
[0017]本专利技术的一些具体实施方案中，重链可变区包含SEQ ID NO：49所示序列，且轻链可变区包含SEQ ID NO：51所示序列。
[0018]本专利技术的一些具体实施方案中，抗-LAG-3抗体或其抗原结合片段包含重链恒定区和/或轻链恒定区；其中抗体重链恒定区为小鼠抗体的重链恒定区或人抗体的重链恒定区，和/或抗体轻链恒定区为小鼠抗体的轻链恒定区或人抗体的轻链恒定区。
[0019]本专利技术提供了药学上的有效抗体，该抗体可以特异性结合人LAG-3。具体的，该药学上有效的人抗体可与T细胞和其他免疫细胞表面的LAG-3结合。
[0020]本专利技术的一些具体实施方案中，所述抗-LAG-3抗体或其抗原结合片段，抑制LAG-3结合人MHCII类分子。
[0021]本专利技术的再一方面涉及分离的核酸，所述核苷酸序列编码如本专利技术所述的抗-LAG-3抗体的重链可变区、轻链可变区、以及CDR区。
[0022]本专利技术的再一方面涉及载体，所述载体分子编码本专利技术所述的抗-LAG-3抗体或其抗原结合片段的重链、本专利技术所述的抗-LAG-3抗体或其抗原结合片段的轻链、本专利技术所述的抗-LAG-3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抑制LAG-3结合人MHCII的抗-LAG3抗体或其抗原结合片段，所述抗
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LAG3抗体或其抗原结合片段包含重链可变区（HCVR）和轻链可变区（LCVR），其中：（a）HCVR结构域的重链互补性决定区（HCDR1、HCDR2和HCDR3），所述免疫球蛋白链包含在SEQ ID NO：5、7、9、21、23、25、37、39、41、53、55、57中所示的氨基酸序列；和/或（b）LCVR结构域的轻链互补性决定区（LCDR1、LCDR2和LCDR3），所述免疫球蛋白链包含在SEQ ID NO：11、13、15、27、29、31、43、45、47、59、61、63中所示的氨基酸序列。2.如权利要求1的抗-LAG-3抗体或其抗原结合片段，其为包含以下的抗体：（1）HCVR包含如SEQ ID NO：5所示的HCDR1、如SEQ ID NO：7所示的HCDR2、以及如SEQ ID NO：9所示的HCDR3；和/或LCVR包含如SEQ ID NO：11所示的LCDR1、如SEQ ID NO：13所示的LCDR2、以及如SEQ ID NO：15所示的LCDR3；或者（2）HCVR包含如SEQ ID NO：21所示的HCDR1、如SEQ ID NO：23所示的HCDR2、以及如SEQ ID NO：25所示的HCDR3；和/或LCVR包含如SEQ ID NO：27所示的LCDR1、如SEQ ID NO：29所示的LCDR2、以及如SEQ ID NO：31所示的LCDR3；或者（3）HCVR包含如SEQ ID NO：37所示的HCDR1、如SEQ ID NO：39所示的HCDR2、以及如SEQ ID NO：41所示的HCDR3；和/或LCVR包含如SEQ ID NO：43所示的LCDR1、如SEQ ID N...

【专利技术属性】
技术研发人员：马一明，李家鹏，
申请(专利权)人：勤浩医药苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：