一种新冠病毒核蛋白抗体和应用制造技术

技术编号:30704898 阅读:19 留言:0更新日期:2021-11-06 09:48
本发明专利技术提供了一种新冠病毒核蛋白抗体及应用,其重链可变区序列如SEQ ID NO:2所示,其轻链可变区序列如SEQ ID NO:3所示。该抗体具有广谱性。有广谱性。有广谱性。

【技术实现步骤摘要】
一种新冠病毒核蛋白抗体和应用


[0001]本专利技术涉及一种新冠病毒核蛋白抗体和应用,属于新冠病毒检测


技术介绍

[0002]2019新型冠状病毒(简称新冠病毒,英文名SARS

CoV

2),也称为严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS

CoV

2),是冠状病毒科乙型冠状病毒属,严重急性呼吸道综合征相关冠状病毒种的一个分型。新冠病毒是具有包膜的单股正链RNA病毒,也是已知基因组最大的RNA病毒之一,大约包含2.6

3.2万个碱基。新冠病毒在复制过程中,为了不断适应,会不断的发生突变,而在发生突变时会产生一些影响病毒传播力、致病性和免疫原性等特性的变异株。与2019年底最开始流行的新冠病毒野生型相比,各种突变的S

RBD都发生了较大的变化,此外,其N、M、E和orfab1等基因也发生了诸多变化。以目前流行的“Delta”变异病毒(B.1.617.2)为例,其N蛋白带有D63G/R203M/D377Y三个突变位点。
[0003]新型冠状病毒肺炎疫情开始以来,新冠病毒的检测主要有核酸检测、抗体检测和抗原检测等方法。但是,核酸检测和抗体检测是一种极为消耗人力和时间的检测方法,并且价格昂贵,对检测设备、环境以及检测人员都有很高的要求,只能在少数的专业机构开展,致使多数病毒携带者在感染早期并未能被及时鉴别发现。抗原检测具有的快速、准确且易于操作等优点,专业医技人员之外的其他医护人员也可以轻松掌握,并用以向患者提供快速的新冠检测服务,可以大大减轻医疗系统超负荷的状况,有利于将病毒传播的风险降低到最低限度,有助于推动全球各国实现对疫情的完全防控。
[0004]由于新冠病毒的高突变性,需要对各种突变病毒珠都有反应的广谱性抗体用于抗原检测。但是,现有的抗体,只是针对特定的病毒,难以满足其广谱性的要求。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供了一种新冠病毒核蛋白抗体和应用,可以有效解决上述问题。
[0006]本专利技术是这样实现的:
[0007]一种新冠病毒核蛋白抗体,其重链可变区序列如SEQ ID NO:2所示,其轻链可变区序列如SEQ ID NO:3所示。
[0008]作为进一步改进的,其重链包括重链CDR1、重链CDR2及重链CDR3,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4

6所示;其轻链包括轻链CDR1及轻链CDR3,其氨基酸序列如SEQ ID NO:7

8所示,其轻链CDR2序列为YTS。
[0009]作为进一步改进的,所述新冠病毒核蛋白抗体为以新冠病毒的N蛋白45

181位氨基酸多肽为免疫原制备的单克隆抗体。
[0010]一种检测新冠病毒的试剂盒,包括上述的新冠病毒核蛋白抗体。
[0011]一种新冠病毒核蛋白抗体,其重链可变区序列如SEQ ID NO:9所示,其轻链可变区序列如SEQ ID NO:10所示。
[0012]作为进一步改进的,其重链包括重链CDR1、重链CDR2及重链CDR3,其氨基酸序列如SEQ ID NO:11

13所示;其轻链包括轻链CDR1及轻链CDR3,其氨基酸序列如SEQ ID NO:14

15所示,其轻链CDR2序列为RAS。
[0013]作为进一步改进的,所述新冠病毒核蛋白抗体为以新冠病毒的N蛋白45

181位氨基酸多肽为免疫原制备的单克隆抗体。
[0014]一种检测新冠病毒的试剂盒,包括上述的新冠病毒核蛋白抗体。
[0015]一种检测新冠病毒的试剂盒,包括两种上述的新冠病毒核蛋白抗体。
[0016]本专利技术的有益效果是:
[0017]本专利技术的新冠病毒核蛋白抗体对多种新冠病毒的变异体抗原均具有反应,具有广谱性,能够实现对新冠病毒的多种突变体的有效检测。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施方式的技术方案,下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍,应当理解,以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例,因此不应被看作是对范围的限定,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0019]图1是本专利技术实施例1提供的SARS

CoV

2N蛋白的45

181位的抗原纯度鉴定图。
具体实施方式
[0020]为使本专利技术实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本专利技术实施方式中的附图,对本专利技术实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施方式是本专利技术一部分实施方式,而不是全部的实施方式。基于本专利技术中的实施方式,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式,都属于本专利技术保护的范围。因此,以下对在附图中提供的本专利技术的实施方式的详细描述并非旨在限制要求保护的本专利技术的范围,而是仅仅表示本专利技术的选定实施方式。基于本专利技术中的实施方式,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式,都属于本专利技术保护的范围。
[0021]在本专利技术的描述中,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本专利技术的描述中,“多个”的含义是两个或两个以上,除非另有明确具体的限定。
[0022]实施例1克隆SARS

CoV

2N蛋白的45

181位的抗原
[0023]采用pET

28a载体,在多克隆位点BamHI/EcoRI中引入目的基因成功构建pET28

45

181的抗原表达质粒,而后利用大肠杆菌表达体系大量制备。
[0024]SARS

CoV

2N蛋白的45

181位氨基酸序列如下所示:
[0025]LPNNTA SWFTALTQHG KEDLKFPRGQ GVPINTNSSP DDQIGYYRRA TRRIRGGDGK MKDLSPRWYF YYLGTGPEAG LPYGANKDGI IWVATEGALN TPKDHIGTRN PANNAAIVLQ LPQGTTLPKG FYAEGSRGGS Q(SEQ ID NO:1)。
[0026]收集菌液打超声破碎,将破碎液12000rpm,10℃离心10min,留取上清。上清过镍柱
纯化,利用250nm咪唑洗脱。纯化的抗原利用15%SDS

PAGE跑胶鉴定纯度,其结果本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新冠病毒核蛋白抗体,其特征在于,其重链可变区序列如SEQ ID NO:2所示,其轻链可变区序列如SEQ ID NO:3所示。2.根据权利要求1所述的新冠病毒核蛋白抗体,其特征在于,其重链包括重链CDR1、重链CDR2及重链CDR3,其氨基酸序列如SEQ ID NO:4

6所示;其轻链包括轻链CDR1及轻链CDR3,其氨基酸序列如SEQ ID NO:7

8所示,其轻链CDR2序列为YTS。3.根据权利要求1所述的新冠病毒核蛋白抗体,其特征在于,所述新冠病毒核蛋白抗体为以新冠病毒的N蛋白45

181位氨基酸多肽为免疫原制备的单克隆抗体。4.一种检测新冠病毒的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1至3任一项所述的新冠病毒核蛋白抗体。5.一种新冠病毒核蛋白抗体,其特征在于,其重链可变区序列如SEQ ID NO:9...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈自敏
申请(专利权)人:厦门英博迈生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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