针对SARS-CoV-2的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及免疫学领域和分子病毒学领域，特别是SARS

【技术实现步骤摘要】
针对SARS
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CoV
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2的抗体及其用途


[0001]本专利技术涉及免疫学领域和分子病毒学领域，特别是SARS
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CoV
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2的诊断、预防和治疗领域。具体而言，本专利技术涉及抗SARS
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CoV
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2的单克隆抗体，以及包含所述抗体的组合物(例如，诊断剂和治疗剂)。此外，本专利技术还涉及所述抗体的用途。本专利技术的抗体可用于诊断、预防和/或治疗SARS
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CoV
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2感染和/或由所述感染引起的疾病(例如，COVID
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19)。

技术介绍

[0002]冠状病毒(coronavirus)感染可导致人类发生呼吸系统疾病，轻症冠状病毒感染可导致流感样症状，重症感染则可发展为严重病毒性肺炎，威胁人类生命健康。冠状病毒可同时感染人类与动物，一些动物源冠状病毒如果突破宿主屏障感染人类，可能在人群中快速扩散并导致严重疾病。
[0003]目前，尚无批准用于预防或治疗SARS
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CoV
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2感染的特效药物。应对SARS
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CoV
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2感染引起的肺炎患者仅给予一般的支持性治疗，氧疗措施和抗病毒治疗，如α
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干扰素、洛匹那韦/利托那韦、磷酸氯喹等，这些措施带来的临床效果有限。研究发现，在新冠肺炎的恢复者体内通常伴随着较高水平的SARS
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CoV
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2中和抗体产生。在国家卫健委发布的新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)中，对病情进展较快、重型和危重型患者推荐进行康复者血浆治疗。有研究数据表明，对确证患有COVID
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19并同时伴有严重呼吸窘迫综合征(ARDS)的危重症患者使用含有中和抗体的康复期血浆治疗后，病人体内的病毒载量迅速降低，患者的临床症状得到有效改善。这些研究表明了体液免疫在SARS
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CoV
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2中的重要性，且表明了除了疫苗研发外，应当研制一种能够高效和特异性中和SARS
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CoV
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2的单克隆抗体，用于COVID
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19的短期预防和有效治疗，这对我国乃至全球防治COVID
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19具有重要意义。

技术实现思路

[0004]在本申请中，专利技术人首先开发了具有优良性质的兔源抗体，其特异性结合SARS
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CoV
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2的S蛋白的受体结合区(RBD)。在此基础上，专利技术人又付出了大量的创造性劳动，对该兔源抗体进行了深入的研究和改造，从而开发了该兔源抗体的人源化抗体。本专利技术的抗体能够中和SARS
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CoV
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2，阻断或抑制SARS
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CoV
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2与受体ACE2的结合。因此，本专利技术的抗体具有用于预防和/或治疗SARS
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CoV
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2感染或由SARS
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CoV
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2感染所导致的疾病的潜力，具有重大的临床价值。
[0005]本专利技术的抗体
[0006]在一个方面，本专利技术提供了一种抗体或其抗原结合片段，其特异性结合SARS
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CoV
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2的S蛋白的受体结合区(RBD)，所述抗体或其抗原结合片段包含：
[0007](a)包含下述3个根据Kabat编号系统定义的互补决定区(CDRs)的重链可变区(VH)：
[0008](i)VH CDR1，其由下述序列组成：SEQ ID NO:3，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，
[0009](ii)VH CDR2，其由下述序列组成：SEQ ID NO:4，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，和
[0010](iii)VH CDR3，其由下述序列组成：SEQ ID NO:5，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；
[0011]和/或，
[0012](b)包含下述3个根据Kabat编号系统定义的互补决定区(CDRs)的轻链可变区(VL)：
[0013](iv)VL CDR1，其由下述序列组成：SEQ ID NO:6，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，
[0014](v)VL CDR2，其由下述序列组成：SEQ ID NO:7，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，和
[0015](vi)VL CDR3，其由下述序列组成：SEQ ID NO:8，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列。
[0016]在某些实施方案中，(i)
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(vi)任一项中所述的置换为保守置换。
[0017]在某些实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段包含：如下3个根据Kabat编号系统定义的重链CDRs：序列为SEQ ID NO：3的VH CDR1，序列为SEQ ID NO：4的VH CDR2，序列为SEQ ID NO：5的VH CDR3；和/或，如下3个根据Kabat编号系统定义的轻链CDRs：序列为SEQ ID NO：6的VL CDR1，序列为SEQ ID NO：7的VL CDR2，序列为SEQ ID NO：8的VL CDR3。
[0018]在某些实施方案中，本专利技术的抗体或其抗原结合片段包含：
[0019](a)包含下述3个根据IMGT编号系统定义的互补决定区(CDRs)的重链可变区(VH)：
[0020](i)VH CDR1，其由下述序列组成：SEQ ID NO:9，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，
[0021](ii)VH CDR2，其由下述序列组成：SEQ ID NO:10，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，和
[0022](iii)VH CDR3，其由下述序列组成：SEQ ID NO:11，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；
[0023]和/或，
[0024](b)包含下述3个根据IMGT编号系统定义的互补决定区(CDRs)的轻链可变区(VL)：
[0025](iv)VL CDR1，其由下述序列组成：SEQ ID NO:12，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗体或其抗原结合片段，其特异性结合SARS
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CoV
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2的S蛋白的受体结合区(RBD)，所述抗体或其抗原结合片段包含：(a)包含下述3个互补决定区(CDRs)的重链可变区(VH)：(i)VH CDR1，其由下述序列组成：SEQ ID NO:3，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，(ii)VH CDR2，其由下述序列组成：SEQ ID NO:4，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，和(iii)VH CDR3，其由下述序列组成：SEQ ID NO:5，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；和/或，(b)包含下述3个互补决定区(CDRs)的轻链可变区(VL)：(iv)VL CDR1，其由下述序列组成：SEQ ID NO:6，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，(v)VL CDR2，其由下述序列组成：SEQ ID NO:7，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列，和(vi)VL CDR3，其由下述序列组成：SEQ ID NO:8，或与其相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个或3个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；优选地，(i)
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(vi)任一项中所述的CDR根据Kabat编号系统定义；优选地，(i)
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(vi)任一项中所述的置换为保守置换。2.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含：(a)如下3个重链CDRs：序列为SEQ ID NO：3的VH CDR1，序列为SEQ ID NO：4的VH CDR2，序列为SEQ ID NO：5的VH CDR3；和/或，如下3个轻链CDRs：序列为SEQ ID NO：6的VL CDR1，序列为SEQ ID NO：7的VL CDR2，序列为SEQ ID NO：8的VL CDR3；或，(b)如SEQ ID NO:1所示的重链可变区(VH)中含有的3个CDR；和/或，如SEQ ID NO:2所示的轻链可变区(VL)中含有的3个CDR；优选地，所述VH中含有的3个CDR和/或所述VL中含有的3个CDR由Kabat、IMGT或Chothia编号系统定义。3.权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其包含：(a)重链可变区(VH)，其包含选自下列的氨基酸序列：(i)SEQ ID NO：1所示的序列；(ii)与SEQ ID NO：1所示的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；或(iii)与SEQ ID NO：1所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；和(b)轻链可变区(VL)，其包含选自下列的氨基酸序列：(iv)SEQ ID NO：2所示的序列；(v)与SEQ ID NO：2所示的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1
个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；或(vi)与SEQ ID NO：2所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；优选地，(ii)或(v)中所述的置换是保守置换；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：包含如SEQ ID NO:1所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:2所示的序列的VL。4.权利要求1
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3任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其是人源化的；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含来源于人免疫球蛋白的框架区序列；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：来源于人重链胚系序列的重链框架区序列，以及来源于人轻链胚系序列的轻链框架区序列。5.权利要求4所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体或其抗原结合片段的VH包含：来源于重链胚系序列IGHV3
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53*04的重链框架区FR1、FR2和FR3，以及来源于重链胚系序列IGHJ1*01的重链框架区FR4；和，所述抗体或其抗原结合片段的VL包含：来源于轻链胚系序列IGKV1
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5*01的轻链框架区FR1、FR2和FR3，以及来源于轻链胚系序列IGKJ2*02的轻链框架区FR4。6.权利要求4或5所述的抗体或其抗原结合片段，其包含：(a)重链可变区(VH)，其包含选自下列的氨基酸序列：(i)SEQ ID NOs：15
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18任一项所示的序列；(ii)与SEQ ID NOs：15
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18任一项所示的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；或(iii)与SEQ ID NOs：15
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18任一项所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；和(b)轻链可变区(VL)，其包含选自下列的氨基酸序列：(iv)SEQ ID NO：19所示的序列；(v)与SEQ ID NO：19所示的序列相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失或添加)的序列；或(vi)与SEQ ID NO：19所示的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的序列；优选地，(ii)或(v)中所述的置换是保守置换；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：(1)包含如SEQ ID NO:15所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:19所示的序列的VL；(2)包含如SEQ ID NO:16所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:19所示的序列的VL；(3)包含如SEQ ID NO:17所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:19所示的序列的VL；或(4)包含如SEQ ID NO:18所示的序列的VH和包含如SEQ ID NO:19所示的序列的VL。7.权利要求1
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6任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其进一步包含来源于人免疫球
蛋白的恒定区；优选地，所述抗体或其抗原结合片段的重链包含来源于人免疫球蛋白(例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)的重链恒定区，所述抗体或其抗原结合片段的轻链包含来源于人免疫球蛋白(例如κ或λ)的轻链恒定区；优选地，所述抗体或其抗原结合片段包含：(a)人免疫球蛋白的重链恒定区(CH)或其变体，所述变体与其所源自的野生型序列相比具有一个或多个氨基酸的置换、缺失或添加或其任意组合(例如，至多20个、至多15个、至多10个、或至多5个氨基酸的置换、缺失或添加或其任意组合；例如1个，2个，3个，4个或5个氨基酸的置换、缺失...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈毅歆，罗文新，洪俊平，陈俊煜，蒋艺超，张雅丽，熊华龙，吴倩，王倩，张天英，袁权，夏宁邵，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：