一种筛选高灵敏度单克隆抗体配对的方法技术

本发明专利技术提供一种筛选高灵敏度单克隆抗体配对的方法，包括以下步骤：S1，将含第一抗体的阳性细胞置于无血清培养基中培养，收集细胞上清，包被在固相载体上，添加抗原进行反应，洗涤，得抗原抗体固相结合物；S2，将含第二抗体的阳性细胞置于无血清培养基中培养，收集细胞上清，加入第二抗体的分子标记进行标记，得第二反应母液；S3，将第二反应母液稀释后加入步骤S1得到的抗原抗体固相结合物中，反应后加分子标记的酶标二抗，显色反应，判断第一抗体和第二抗体的配对活性。该方法流程短，节约成本。节约成本。

【技术实现步骤摘要】
一种筛选高灵敏度单克隆抗体配对的方法


[0001]本专利技术涉及一种筛选高灵敏度单克隆抗体配对的方法，属于免疫检测


技术介绍

[0002]免疫检测试剂常见的实现方法有四种：夹心法、直接法、间接法和竞争法。其中，夹心法中的双抗体夹心法是最为常用的一种。双抗体夹心法是将含有已知抗体(捕获抗体)的样品吸附包被在固相载体上，洗涤一次；加待测抗原，如两者是特异的，则发生结合，再加入与待测抗原呈特异反应的酶联抗体(标记抗体)，使一单位的抗原同时结合两单位的抗体形成“夹心”；最后加入该酶的底物，根据产生的有色酶解产物颜色的深浅来判断待测抗原的含量。
[0003]对双抗体夹心法来说，开发高灵敏度单克隆抗体配对至关重要。目前，筛选单克隆抗体配对的方法主要是应用已知的抗体原料，然后利用不同的标记方法在不同的应用平台建立ELISA、CLIA、RIA等免疫分析方法，来评估筛选抗体配对的应用可行性。但是这些方法只能基于已知有较优的包被抗体原料的基础上开展的，需要事先通过传统的单克隆抗体筛选方法筛选出单克隆抗体，再进行抗体配对筛选，一个单克隆抗体从正常免本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种筛选高灵敏度单克隆抗体配对的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，将含第一抗体的阳性细胞置于无血清培养基中培养，收集细胞上清，包被在固相载体上，添加抗原进行反应，洗涤，得抗原抗体固相结合物；S2，将含第二抗体的阳性细胞置于无血清培养基中培养，收集细胞上清，加入第二抗体的分子标记进行标记，得第二反应液母液；S3，将第二反应液母液稀释后加入步骤S1得到的抗原抗体固相结合物中，反应后进行洗涤，加入分子标记的酶标二抗，加入该酶的显色底物进行显色反应，判断第一抗体和第二抗体的配对活性。2.根据权利要求1所述的筛选高灵敏度单克隆抗体配对的方法，其特征在于，步骤S1中，所述固相载体为酶标板。3.根据权利要求1所述的筛选高灵敏度单克隆抗体配对的方法，其特征在于，步骤S2中，所述分子标记为DNP、生物素、吖叮酯、HRP...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐伟玲，陈自敏，杨晴，刘嘉祺，陈志鸿，童勋章，郭清顺，熊君辉，
申请(专利权)人：厦门英博迈生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：