一种特异性的乳酸菌培养基及其培养方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种特异性的乳酸菌培养基及其培养方法和应用，该培养基包括：每1L自来水中加入胰蛋白胨8～12g、牛肉膏10～15g、酵母提取物8～12g、麦芽提取物30～60g、葡萄糖10～15g、柠檬酸氢二铵1.5～2.5g、磷酸氢二钾1.5～2.5g、一水硫酸锰0.1～0.2g、七水硫酸镁0.5～0.7g、吐温80 1～2mL、L

【技术实现步骤摘要】
一种特异性的乳酸菌培养基及其培养方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种特异性的乳酸菌培养基及其培养方法和应用。

技术介绍

[0002]研究发现自然界中尚存在90％以上未有合适培养方法的微生物，使用传统的细菌培养方法仅能培养其中的一小部分细菌。应用传统方法培养出的微生物都是已知微生物，对新的微生物物种的培养基成分、分离、培养方法的研究和报道较少。微生物培养困难是与抵制培养的特殊原因，包括温度、pH、氧气、营养等众多因素有关，微生物新种的培养具有众多的技术挑战。
[0003]乳酸菌泛指一大类能够发酵糖类产生大量乳酸的细菌，在自然界分布极为广泛，具有丰富的物种多样性，目前约有200余种。乳酸菌具有调节胃肠道菌群、改善胃肠道功能、提高食物消化率和生物效价、降低血清胆固醇、控制内毒素、抑制肠道内腐败菌生长、提高机体免疫力等多种生理功能。
[0004]传统酿造食醋采用开放式发酵、原辅料不经过灭菌处理，酿造过程中微生物种类及其丰富，许正宏等学者对镇江香醋醋醅中微生物群落结构进行解析发现该过程中有上百种微生物参与发酵。乳酸菌普遍存在于食醋发酵过程中，尤其是传统固态酿造食醋，乳酸菌占比可达到60％以上，对产品品质具有重要影响。深入研究不同类型乳酸菌培养基、分离和培养方法及其应用对食醋酿造行业具有重要意义。因此，创新培养基配方和培养方法，更好的培养乳酸菌具有重要意义。
[0005]目前，许多不同的乳酸菌对培养基和培养方法具有独特的需求，即使同一种乳酸菌的不同菌株之间，在培养基和培养方法上也具有较大的差异。如专利CN202010877453.8公开了一种乳酸菌分离培养基配方及培养方法，虽然其所培养目的乳酸菌与新种乳酸菌HSLZ
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的16S rRNA序列具有100％的一致性，但其目的乳酸菌在论文(Lactobacillus jinshani sp.nov.,isolated from solid
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state vinegar culture of Zhenjiang aromatic vinegar.Antonie van Leeuwenhoek)公开的乳酸菌HSLZ
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的培养基配方上无法生长。且专利CN 202010877453.8中目的乳酸菌在其固体平板上需培养7
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14天，培养时间较长；培养基配方极其复杂、操作不便、成本高，液体培养中需要添加30余种物质，其中仅维生素就有9种；含有酒醅浸出液且用量大，易导致培养基的稳定性差，酒醅浸出液一般人员难以获得，整体应用性不强。专利CN 202011227512.3公开了一种乳酸菌Z
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1的培养基配方和分离方法，但其培养时间较长，固体平板上需要7天后形成肉眼可见菌落；培养基成分复杂，液体培养中需要添加近20种物质；操作复杂，需要单独配制含有大量复合维生素B的溶液，使用前需过膜除菌，且需要乳酸和乙酸2种酸调节pH值；需要自制麸皮浸出液，培养基稳定性差。

技术实现思路

[0006]专利技术目的：针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种新型特异性的乳酸菌培养基，本专利技术的培养基主要针对新型乳酸菌，是一种专一、高效、稳定、方便的新型乳酸菌培养基配方，可以快速高效培养乳酸菌。
[0007]本专利技术还提供了一种新型乳酸菌的培养基的培养方法和应用。
[0008]技术方案：为了实现上述目的，本专利技术所述的特异性的乳酸菌液体培养基，所述培养基中包括以下原料：每1L自来水中加入胰蛋白胨8～12g、牛肉膏10～15g、酵母提取物8～12g、麦芽提取物30～60g、葡萄糖10～15g、柠檬酸氢二铵1.5～2.5g、磷酸氢二钾1.5～2.5g、一水硫酸锰0.1～0.2g、七水硫酸镁0.5～0.7g、吐温801～2mL、L
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半胱氨酸盐酸盐1～2g、维生素B
2 1～3mg，最后加入乙酸调节至总酸4～6g/100mL。
[0009]其中，所述乳酸菌为乳酸菌Acetilactobacillus jinshanensis HSLZ
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和Lactobacillus sp.HSCY 2073。
[0010]本专利技术所述特异性的乳酸菌固体培养基，所述培养基中包括以下原料：每1L自来水中加入胰蛋白胨8～12g、牛肉膏10～15g、酵母提取物8～12g、麦芽提取物30～60g、葡萄糖10～15g、柠檬酸氢二铵1.5～2.5g、磷酸氢二钾1.5～2.5g、一水硫酸锰0.1～0.2g、七水硫酸镁0.5～0.7g、吐温80 1～2mL、L
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半胱氨酸盐酸盐1～2g、维生素B
2 1～3mg，加入琼脂粉20～25g，最后加入乙酸调节至总酸4～6g/100mL。
[0011]其中，所述乳酸菌为乳酸菌Acetilactobacillus jinshanensis HSLZ
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和Lactobacillus sp.HSCY 2073。
[0012]本专利技术所述的特异性的乳酸菌液体培养基的培养方法，包括如下步骤：
[0013]在培养基中接种菌株后，在培养基的液面上方残留空气的高度＜0.5cm，且培养基的装液量＞90％，密封不漏气，培养温度30～35℃。
[0014]本专利技术所述的特异性的乳酸菌固体培养基的培养方法，包括如下步骤：
[0015]在培养基中接种菌株后，置于厌氧培养箱中培养，厌氧培养箱中氧气含量＜10ppm，培养湿度75～85％，培养温度30～35℃。
[0016]本专利技术所述的特异性的乳酸菌液体培养基或者所述的乳酸菌的固体培养基在快速大量培养乳酸菌中的应用。
[0017]本专利技术中乳酸菌Acetilactobacillus jinshanensis HSLZ
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为商业菌株(CICC6269)，是一株乳酸菌新种(Lactobacillus jinshani sp.nov.,isolated from solid
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state vinegar culture of Zhenjiang aromatic vinegar.Antonie van Leeuwenhoek)。
[0018]乳酸菌Lactobacillus sp.HSCY 2073保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地点为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏登记入册的编号为CGMCC NO.18982，保藏日期为2019年11月21日。其是一株乙酸和乙醇耐受性强、产不挥发酸效果优、产乙醛、乙酸乙酯、乙酸异丁酯、乙酸异戊酯、3
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甲基戊酸乙酯等5种果香类香气物质含量高的乳酸菌，可以适应食醋酿造的高酸、高醇、寡营养等恶劣环境，耐高酸的能力强，即能产不挥发酸以提高食醋滋味的柔和性，同时又能提高具有良本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种特异性的乳酸菌液体培养基，其特征在于，所述培养基中包括以下原料：每1L自来水中加入胰蛋白胨8～12g、牛肉膏10～15g、酵母提取物8～12g、麦芽提取物30～60g、葡萄糖10～15g、柠檬酸氢二铵1.5～2.5g、磷酸氢二钾1.5～2.5g、一水硫酸锰0.1～0.2g、七水硫酸镁0.5～0.7g、吐温80 1～2mL、L
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半胱氨酸盐酸盐1～2g、维生素B
2 1～3mg，最后加入乙酸至4～6g/100mL。2.根据权利要求1所述的特异性的乳酸菌液体培养基，其特征在于，所述乳酸菌优选为乳酸菌Acetilactobacillus jinshanensis HSLZ
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和Lactobacillus sp.HSCY 2073。3.一种特异性的乳酸菌固体培养基，其特征在于，所述培养基中包括以下原料：每1L自来水中加入胰蛋白胨8～12g、牛肉膏10～15g、酵母提取物8～12g、麦芽提取物30～60g、葡萄糖10～15g、柠檬酸氢二铵1.5～2.5g、磷酸氢二钾1.5～2.5g、一水硫酸锰0.1～0.2g、七水硫...

【专利技术属性】
技术研发人员：李信，李国权，张俊红，陆平，杨乐云，熊锋，王芸，
申请(专利权)人：江苏恒顺醋业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：