一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种农用枯草芽孢杆菌水分散粒剂，以及其制备方法与应用，属于农业微生物技术领域。该枯草芽孢杆菌水分散粒剂采用特定的培养基发酵，活菌数高。并通过添加保护剂的方式喷雾干燥，干燥收率高。最终与载体造粒，形成水分散剂。本发明专利技术所制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂未添加外源有机润湿剂、分散剂，不影响孢子正常萌发，不危害植物生长。本发明专利技术所制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂可有效提高肥料利用率，降低化肥使用量。降低化肥使用量。

【技术实现步骤摘要】
一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及一种农用枯草芽孢杆菌水分散粒剂，以及其制备方法与应用，属于农业微生物


技术介绍

[0002]化学肥料在促进粮食和农业生产发展中起了不可替代的作用，为粮食的丰收和农民的增收保驾护航。由于施肥技术水平参差不齐，不合理施肥现象普遍存在，盲目过多使用化学肥料，不但造成不可再生资源的浪费和环境的污染，而且果蔬品质和产量也没有得到相应的提高。
[0003]微生物属于可再生资源，且有益菌种较多，对环境无污染，近几年微生物肥料品种越来越多，是肥料结构发展中主要的中坚力量。枯草芽孢杆菌广泛分布在土壤及腐败的有机物中,具有孢子休眠期、生殖生长期两个生长时期，在生长环境恶劣、营养物质缺乏等不适宜的环境下进入孢子休眠期，并且形成具有极强抗逆作用、在高温、酸碱等极性环境下亦可生存的芽胞，从而适应环境得以生存，且枯草芽孢杆菌能分泌枯草菌素、多粘菌素、短杆菌肽，合成淀粉酶、蛋白酶、维生素等活性物质，抑制病菌生长，改善果蔬品质，降低化肥使用量，提高肥料利用率，将其制成制剂，可作为优质的微生物肥料用于农业种植中。
[0004]目前含枯草芽孢杆菌的微生物肥料主要有液剂、粉剂和颗粒剂。因液剂产品含有大量水分，孢子在水溶液中萌发，会出现产气和有效菌数衰减等问题，不适合长期储运；粉剂产品使用过程中易产生扬尘，造成环境污染和人体损害，使用效果不佳；颗粒剂产品因存在水中分散性差、粒度大等问题，仅可以用于底施，不适合滴管和叶喷，限制了其使用层面。
[0005]水分散粒剂具有使用方便、无粉尘飞扬、不污染环境、安全等特点，能较快地崩解、分散，形成高悬浮的固液分散体系，能很好的解决微生物液剂、粉剂、颗粒剂的缺陷，是一种优良的微生物肥料剂型。经检索发现，仅以玉米淀粉和玉米浆粉为碳氮源的发酵工艺中发酵活菌数低，中国专利文献CN101935624B发酵液活菌数150亿cfu/mL。水分散粒剂制备过程中均加入有机润湿剂、分散剂、不溶载体等外源物质，这些物质基本不能被植物吸收利用，过多使用会对作物生长产生危害，且在使用中会起泡过多，影响使用，有机润湿剂和分散剂会对孢子萌发产生抑制作用。如中国专利文献CN110612979A、CN109997877A、CN104396950B等制备的微生物水分散粒剂，在制备过程中均加入有机润湿剂、分散剂。中国专利文献CN102870822B实施例二在制备木霉菌厚垣孢子生物农药水分散粒剂过程中未加入有机润湿剂，所制备的水分散粒剂悬浮率低（43.2%），不利于叶喷使用，且会局部浓度过高，对叶片产生灼伤。

技术实现思路

[0006]针对以上现有技术的不足，为提高发酵质量、微生物肥料的安全性、有效性及方便使用性，本专利技术提供一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法。所制备的枯草芽孢杆菌活菌数高，喷雾干燥收率高，水分散粒剂兼有不易飞散、货架期长、起泡量少、易于溶解分散，
且产品效果稳定易于保存等特点，同时使用方式多样化，既可以常规的沟施、穴施、撒施，更适用于微滴灌、飞防等集约化农业中的微生物制剂。
[0007]一种枯草芽孢杆菌水分散粒剂及制备方法，包括如下步骤：（1）菌种活化：将低温保存的枯草芽孢杆菌菌株接种于营养琼脂平板培养基上，于35
‑
38℃培养24
‑
36h；（2）种子液制备：挑取步骤（1）中大菌落转接到种子培养基上，摇床200
‑
300rpm，于35
‑
38℃培养15
‑
20h，作为种子液；所述种子培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖1
‑
2％，蛋白胨1
‑
1.5％，酵母粉0.6
‑
1％，牛肉膏0.5
‑
0.7％，氯化钠0.4
‑
0.6％，其余为水；（3）发酵培养：按照1
‑
5％的接种量向发酵培养基中接入步骤(2)制备的种子液，通气量为0.4
‑
1.5vvm，搅拌速度为200
‑
500rpm，温度35
‑
38℃，培养时间为30
‑
40h，得到发酵液；所述发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：5
‑
9%玉米淀粉（60
‑
70℃水解1
‑
2h）、7000活力单位淀粉酶（淀粉用量的0.01
‑
0.03%）、5
‑
8%玉米浆干粉、0.1
‑
0.5%葡萄糖、0.1
‑
0.5%碳酸钙、0.1
‑
0.2%硫酸镁、0.05
‑
0.1%磷酸氢二钠、0.02
‑
0.05%硫酸锰、0.02
‑
0.05%硫酸锌，其余为水，调pH6.0
‑
8.0；（4）喷雾干燥：向发酵液中加入保护剂1和保护剂2，搅拌0.5
‑
1h至保护剂完全溶解，过80
‑
100目筛，再以进风口温度150
‑
200℃，出风口温度50
‑
90℃条件进行喷雾干燥，得到枯草芽孢杆菌菌粉；所述保护剂组成成分及其重量百分比为：保护剂1：包括但不限于硫酸钾、氯化钾等可溶无机盐中的一种或几种混合，添加量为发酵液总量的2
‑
4%；保护剂2：包括但不限于葡萄糖、蔗糖、乳糖、糖醇、氨基酸粉等可溶有机物中的一种或几种混合，添加量为发酵液总量的2
‑
4%；（5）制粒：将载体1和载体2粉碎过80
‑
100目筛，与步骤（4）所制得的菌粉混合均匀，加入到沸腾造粒内，进行沸腾造粒，沸腾时喷入3
‑
10%水，待观察到基本都已成为较为均匀微粒时，停机取出，得到枯草芽孢杆菌水分散粒剂；所述载体组成成分及其重量百分比为：载体1：包括但不限于磷酸二氢钾、氯化钾等可溶无机盐中的一种或几种混合，添加量为总量的40
‑
80%；载体2：包括但不限于葡萄糖、蔗糖、糊精、可溶淀粉、氨基酸粉、黄腐酸粉、玉米浆干粉等可溶有机物中的一种或几种混合，添加量为总量的10
‑
40%，其余为枯草芽孢杆菌菌粉。
[0008]本专利技术的技术特点及优良效果：1.本专利技术发酵工艺，发酵液中活菌数高（200
‑
280亿cfu/mL），干燥收率高（≥90%）；2.本专利技术发酵过程、制粒过程采用全水溶物料，含有微量元素、中量元素、大量元素及有机养分，均可作为孢子萌发和植物生长的营养原料，益于孢子萌发和植物吸收及成长；3.本专利技术所制备的枯草芽孢杆菌水分散粒剂未添加外源有机润湿剂、分散剂，不影响孢子正常萌发，不危害植物生长；4.本专利技术制粒所用原料只需要普通粉碎即可，不需要过气流粉碎机，降低能耗和设备投入；
5.本专利技术制备工艺成粒率高，40
‑
60目占比≥80%6.本专利技术所制备的枯草芽孢杆菌水分散本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种枯草芽孢杆菌发酵液，其特征在于，制备方法包含以下步骤：（1）菌种活化：将低温保存的枯草芽孢杆菌菌株接种于营养琼脂平板培养基上，于35
‑
38℃培养24
‑
36h；（2）种子液制备：挑取步骤（1）中大菌落转接到种子培养基上，摇床200
‑
300rpm，于35
‑
38℃培养15
‑
20h，作为种子液；（3）发酵培养：按照1
‑
5％的接种量向发酵培养基中接入步骤(2)制备的种子液，通气量为0.4
‑
1.5vvm，搅拌速度为200
‑
500rpm，温度35
‑
38℃，培养时间为30
‑
40h，得到发酵液。2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌分散粒剂，其特征在于，所述种子培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖1
‑
2％，蛋白胨1
‑
1.5％，酵母粉0.6
‑
1％，牛肉膏0.5
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0.7％，氯化钠0.4
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0.6％，其余为水。3.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌分散粒剂，其特征在于，所述的发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：5
‑
9%玉米淀粉、玉米淀粉用量的0.01
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0.03%的淀粉酶、5
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8%玉米浆干粉、0.1
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0.5%葡萄糖、0.1
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0.5%碳酸钙、0.1
‑
0.2%硫酸镁、0.05
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0.1%磷酸氢二钠、0.02
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0.05%硫酸锰、0.02
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0.05%硫酸锌，其余为水，调pH至6.0
‑
8.0。4.一种枯草芽孢杆菌菌粉...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭中信，郭仲成，王茂超，郭倩，
申请(专利权)人：山东京青农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：