一种非变性II型胶原蛋白的制备方法技术

技术编号:30541444 阅读:15 留言:0更新日期:2021-10-30 13:18
本发明专利技术公开了一种非变性II型胶原蛋白的制备方法和产品。以鸡胸软骨为原料,经选材、清洗、粉碎、酶解、干燥、粉碎、过筛等步骤,得到吸水倍数为10

【技术实现步骤摘要】
一种非变性II型胶原蛋白的制备方法


[0001]本专利技术公开的是一种从动物软骨中提取胶原蛋白的方法,涉及食品生物
,尤其涉及一种非变性II型胶原蛋白的制备方法。

技术介绍

[0002]胶原蛋白是一种广泛分布于哺乳动物体内的结构性蛋白,是构成皮肤、骨骼和关节等组织的重要组成部分,同时也是多细胞动物细胞外基质的主要成分之一。目前已知的胶原蛋白种类已有二十余种,根据组织分类可分为间隙胶原蛋白、基膜胶原蛋白和软骨胶原蛋白三大类,其中II型胶原蛋白主要分布于关节软骨中,少量存在于玻璃体、胚胎角膜等部位。
[0003]II型胶原蛋白是由三股缠绕的多肽链组成,由于其具备稳定的三螺旋结构,因此,在体内主要起到支撑器官、保护机体的作用。近年来的研究表明,II型胶原蛋白因其可作为关节的结构和功能性营养素,具有低免疫原性和生物相容性好等特点
[1],受到消费者的广泛关注。
[0004]目前市售的II型胶原蛋白产品,多为完全酶解的胶原蛋白产品。由于提取工艺和制剂工艺的局限,在酶、高温等因素作用下,II型胶原蛋白丧失原有的三螺旋结构,胶原蛋白被分解为20,000道尔顿以下的多肽和氨基酸,失去原有对类风湿关节炎和关节炎的预防及辅助治疗功能
[2]。
[0005]目前,国内外已公开多种非变性II型胶原蛋白的制备工艺,例如CN106916870A公开的一种含非变性II型胶原蛋白的软骨提取物的制备方法,通过脱脂、消毒、匀浆、酶解、过滤、干燥等步骤;其中,在所述酶解步骤中:将在匀浆步骤中获得的浆状物的pH调节为2.5~8.5,加入软骨重量的0.001%~2%的酶,加入软骨重量的1/20~1/500的木瓜和/或菠萝低温榨汁后过滤获得的清液,酶解12~48h。李洁,朱大开和龚辉(李洁, 朱大开, 龚辉. 非变性Ⅱ型胶原蛋白生产方法.),采用胃蛋白酶先对软骨除杂24h,再进行酶解提取24h得到可溶性非变性II型胶原蛋白。US7083820公开的一种生物活性产品的生产方法,鸡胸骨通过清洗、消毒、切碎、混合(无机盐)、干燥等步骤,其中上述所述步骤是在110℉以下操作,得到不改变生物活性产品原始结构的II型胶原蛋白。
[0006]但已公开的技术方法及制备的非变性II型胶原蛋白依然存在问题:一产品在溶液中悬浮性能差,易分层;二是产品制备提取经过蛋白酶或酶提取原料进行长时间的充分水解,非变性II胶原蛋白含量较低,且提取时间长,不利于工业生产推广。

技术实现思路

[0007]本专利技术提供了一种非变性II型胶原蛋白的制备方法,旨在解决上述问题中的一个或多个问题。
[0008]具体技术方案如下:本专利技术提供了一种非变性II型胶原蛋白的制备方法,它的特征是依次包括以下步
骤:(1)选材:所选原料为新鲜鸡胸软骨,手工剔除脂肪和肌肉后,切取距离鸡胸软骨尖端3厘米以内部分备用;(2)清洗:使用温度不高于37℃的清水清洗步骤(1)中切取备用的软骨;(3)粉碎:将步骤(2)中经清洗的软骨沥干后,使用粉碎机将软骨粉碎为2 mm以下的软骨颗粒;(4)酶解:向步骤(3)所得软骨颗粒中加水,加水量为软骨颗粒质量的0.5~3倍(m/V),使用酸液或碱液调节料液pH值在2.0~4.0之间,加入软骨颗粒重量1.0~5.0%的胃蛋白酶,酶解温度不超过37℃,搅拌并酶解0.5~2.0 h;酶解结束后,使用碱液调节pH值至8.5~9.5,静置15~60 min;(5)过滤:使用20 ~ 60目筛过滤步骤(4)中的酶解液,收集筛上物;(6)干燥:将筛上物进行真空干燥或冷冻干燥,干燥后获得干燥品;(7)粉碎:将干燥品进行粉碎,经60~200目筛网过筛,取筛下物,得非变性II型胶原蛋白粉末。
[0009]本专利技术的上述方案中,首先通过对原料进行选择,选取鸡胸软骨,并选择距离骨尖端3厘米以内,结合对工艺的改进,尤其是酶解步骤的改进,可以获得蛋白含量大于15%的非变性II型胶原蛋白。而且提取过程快速、简便:总提取时间不超过4 h。
[0010]更加优选,原料选用鸡胸软骨尖端1.5厘米以内。
[0011]作为优选,所述胃蛋白酶通过负载载体加入,所述负载载体为食品级二氧化硅。本方案中,胃蛋白酶通过负载载体的形式加入,能够有效控制酶解程度,结合胃蛋白酶的浓度以及酶解时间,得到的非变性II胶原蛋白含量高。
[0012]作为优选,所述胃蛋白酶与所述负载载体的添加比例为0.3~0.6:15。
[0013]作为优选,步骤(4)中在软骨颗粒中加水后,先进行打浆,再使用酸液或碱液调节料液pH值在2.0~4.0之间。
[0014]作为优选,打浆温度控制在25℃以下。
[0015]作为优选,步骤(2)中清洗次数为1~3次,每次10 ~15min。
[0016]作为优选,酶解温度为30℃~32℃。
[0017]通过本专利技术的提取方法获得非变性II型胶原蛋白。
[0018]与现有技术相比,本专利技术的优点在于:(1)提取过程快速、简便:总提取时间不超过4 h,与现有技术24 h以上的长时间提取相比,制备时间明显缩短;(2)非变性II型胶原蛋白含量高,产品性能好:通过本专利技术所述方法制备的非变性II型胶原蛋白,非变性II型胶原蛋白含量大于15%,在水溶液中吸水倍数为10~12倍,体积膨胀率为5~7倍;(3)在水溶液中悬浮性能好,不易分层,除可应用于硬胶囊、片剂外,还适合软胶囊、固体饮料、凝胶糖果等剂型。
附图说明
[0019]图1为本专利技术从动物软骨中提取的非变性II型胶原蛋白,在透射电镜下的天然胶
原蛋白特征性、规律性横纹组织图片。
具体实施方式
[0020]下面结合实施例进一步说明本专利技术的实质性内容,但并不以此限定本专利技术保护范围。尽管参照较佳实施例对本专利技术作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本专利技术的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本专利技术技术方案的实质和范围。
[0021]实施例1(1)选材:选择新鲜鸡胸骨,手工剔去脂肪和肌肉后,切取距离尖端1 cm以内部位的软骨1.0kg;(2)清洗:使用不高于37℃的清水清洗1~3次,每次10 min;沥干;(3)粉碎:将步骤(2)中经清洗的软骨沥干后,使用粉碎机将软骨粉碎为2 mm以下的软骨颗粒;(4)酶解:将步骤(3)所得软骨颗粒投入反应罐,加入1 L清水,温度控制在35℃,使用酸液或碱液调节料液pH值在3.0~4.0之间,加入20 g胃蛋白酶,搅拌并酶解2.0 h;酶解结束后,使用碱液调节pH值至9.0,静置30 min;(5)过滤:使用40目筛过滤步骤(4)中的酶解液,收集筛上物;(6)干燥:将筛上物进行冷冻干燥,干燥后获得干燥品S1,共计91.6 g。;(7)粉碎:将干燥品进行粉碎,经100目标准筛过筛,取筛下物。
[0022]采用《卫生部药品标准生化药品》89年版第一册氨基己糖法检测糖胺聚糖,糖胺聚糖含量为22.3%(以硫酸软骨素计,系数按2.82计);采用GB 5009.5的方法检测,总蛋白质含量为7本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非变性II型胶原蛋白的制备方法,其特征在于,依次包括以下步骤:(1)选材:所选原料为新鲜鸡胸软骨,手工剔除脂肪和肌肉后,切取距离鸡胸软骨尖端3厘米以内部分备用;(2)清洗:使用温度不高于37℃的清水清洗步骤(1)中切取备用的软骨;(3)粉碎:将步骤(2)中经清洗的软骨沥干后,使用粉碎机将软骨粉碎为2 mm以下的软骨颗粒;(4)酶解:向步骤(3)所得软骨颗粒中加水,加水量为软骨颗粒质量的0.5~3倍(m/V),使用酸液或碱液调节料液pH值在2.0~4.0之间,加入软骨颗粒重量1.0~5.0%的胃蛋白酶,酶解温度不超过37℃,搅拌并酶解0.5~2.0 h;(5)过滤:使用20 ~ 60目筛过滤步骤(4)中的酶解液,收集筛上物;(6)干燥:将筛上物进行真空干燥或冷冻干燥,干燥后获得干燥品;(7)粉碎:将干燥品进行粉碎,经60~200目筛网过筛,取筛下物,得非变性II型胶原蛋白粉末。2.根据权利要求1所述的一种非变性II型胶原蛋白的制备方法,其特征在于,原料选用鸡胸软骨尖端1.5厘米以内。3.根据权利要求1所述的一种非变性II型胶原蛋白的制备方法,其特征在于,酶解结...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱美红罗程王伙根
申请(专利权)人:福建恒杰生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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