一种植入级Ⅱ型胶原蛋白的制备方法技术

本发明专利技术属于Ⅱ型胶原蛋白制备领域，具体涉及一种植入级Ⅱ型胶原蛋白的制备方法。本发明专利技术采用碱处理的步骤代替了盐酸胍去除蛋白多糖的步骤，完全避免了盐酸胍导致的胶原蛋白变性问题；采用本发明专利技术的方法能够制备得到非变性、保持良好三重螺旋结构的Ⅱ型胶原蛋白，且制备Ⅱ型胶原蛋白纯度达到95％以上，内毒素含量低于0.5Eu/mL，多糖含量低于0.01mg/mL，达到医用植入级标准；可用于制备软骨损伤修复药品、医疗器械、保健食品等。保健食品等。保健食品等。

【技术实现步骤摘要】
一种植入级Ⅱ型胶原蛋白的制备方法


[0001]本专利技术属于Ⅱ型胶原蛋白制备领域，具体涉及一种植入级Ⅱ型胶原蛋白的制备方法。

技术介绍

[0002]Ⅱ型胶原蛋白是广泛存在于动物骨骼、关节、肌腱等结缔组织中的一种蛋白质，它主要由软骨细胞产生，在软骨中的含量最高，是关节软骨的主要结构蛋白，约占软骨组织干重的60％。Ⅱ型胶原蛋白具有良好的生物相容性、生物可降解性、促进细胞生长等性质，因此是一种广泛应用的生物医用材料。作为软骨的关键成分，Ⅱ型胶原蛋白的过度降解被认为是关节炎的关键诱因。大量研究表明，Ⅱ型胶原蛋白为主要成分的人工软骨支架，可用于治疗类风湿性关节炎。动物实验表明，口服Ⅱ型胶原蛋白对预防和治疗关节炎表现出明显的有益效果。因此，制备非变性、植入级的Ⅱ型胶原蛋白对于其临床应用具有重要意义。
[0003]Ⅱ型胶原蛋白通常是从鸡、猪、牛等动物的软骨中提取制备的。软骨中，除了Ⅱ型胶原蛋白外，还含有大量的蛋白多糖，其含量高达软骨组织湿重的10％
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15％，因此，如何去除蛋白多糖是Ⅱ型胶原蛋白提取过程中的关键步骤。Ⅱ型胶原蛋白具有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从含有Ⅱ型胶原蛋白的动物组织中去除蛋白多糖的方法，其特征在于，所述方法为：采用碱溶液对动物组织进行处理。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述动物组织为动物软骨。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碱溶液为氢氧化钠溶液，和/或氢氧化钾溶液。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法为：用0.01
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2.0M的氢氧化钠溶液浸泡处理动物软骨0.5
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72h。5.一种非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，所述方法包括下列步骤：动物软骨预处理、脱细胞、脱脂、碱处理、脱钙、酶解、盐析、纯化；但不包括盐酸胍处理步骤；所述纯化步骤包括透析、离子交换层析、疏水层析、分子筛、超滤中的任一种或几种的组合。6.如权利要求5所述的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，所述脱细胞步骤包括：用酸溶液，和/或盐溶液，和/或缓冲溶液，和/或表面活性剂，和/或过氧化物溶液处理动物软骨。7.如权利要求5所述的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，所述脱脂步骤包括：用正丁醇，和/或氯仿
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甲醇溶液，和/或氯仿
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甲醇
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水溶液，和/或乙醚，和/或正己烷，和/或丙酮，和/或乙醇
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正己烷溶液，和/或乙醇溶液，和/或表面活性剂处理动物软骨。8.如权利要求5所述的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，所述碱处理步骤为：用氢氧化钠溶液，和/或氢氧化钾溶液处理动物软骨。9.如权利要求5所述的非变性Ⅱ型胶原蛋白的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)动物软骨预处理：剔除动物软骨表面肌腱残留物，破碎后清洗；(2)脱细胞：依次用NaCl溶液、表面活性剂和过氧化物溶液对预处理后的动物软骨进行浸泡处理；(3)脱脂：用浓度为5％
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30％v/v的正丁醇溶液浸泡处理脱细胞后的动物软骨2
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【专利技术属性】
技术研发人员：肖建喜，杨霞霞，
申请(专利权)人：甘肃天际生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：