四价抗体药物偶联物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种抗体药物偶联物(ADC)或其药学上可接受的盐。所述ADC包括四价单克隆抗体，所述四价单克隆抗体通过化学接头与细胞毒性药物偶联。所述单克隆抗体包括两条长链和四条短链。单克隆抗体包括两个长链和四个短链。每条所述长链包括第一片段和第二片段，所述第一片段位于所述长链的N端附近，所述第二片段位于所述长链的C端附近。每个所述第一片段和每个所述第二片段与一条所述短链配对，从而形成抗原结合片段结构域，因此形成对同一抗原具有特异性的四个抗原结合片段结构域。本发明专利技术还提供了包括ADC的药物组合物以及使用所述组合物治疗疾病的方法。组合物治疗疾病的方法。

【技术实现步骤摘要】
四价抗体药物偶联物及其应用
[0001]交叉引用
[0002]本申请要求2020年4月11日提交的美国临时申请63/008,726的优先权，其全文通过引用并入本文。
[0003]本申请要求2020年4月29日提交的美国专利申请16/862,042的优先权，其全文通过引用并入本文。
[0004]序列表引用
[0005]本申请包含以ASCII形式通过EFS
‑
Web提交的序列表，其名称为“BLISS001US_ST25.txt”，大小为108KB，在2020年4月27日生成，序列表的全文通过引用并入本文。

技术介绍

[0006]抗体是抵抗外来病原体的关键免疫分子。单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)技术的发展使单克隆抗体在疾病的研究、诊断和治疗中得到了广泛的应用。第一代mAb(主要是单特异性、二价mAb)的治疗用途在多种疾病(包括癌症、自身免疫性疾病和传染性疾病)的治疗中取得了成功。但是，许多疾病(例如实体瘤)已显示出对基于抗体的疗法较强的抗性。
[0007]为了提高效价、改善安全性并获得mAb的非天然特性，已开发出修饰的、具有多价特性的新形式的mAb。例如，已经开发了新的三价和四价抗体，以通过增强的生物分布和功能性亲和力来最大化肿瘤靶向能力。例如，已经产生了用于癌症免疫疗法的四价抗体，其中两个结合部分可以与癌细胞表面上的靶分子反应，而另外两个结合部分则与细胞毒性T细胞或自然杀伤(NK)细胞反应。
[0008]抗体药物偶联物(ADC)是与活性药物化学连接的mAb，因此，既具有mAb的特异性靶向作用，又具有细胞毒性药物的抗癌能力。选择特定mAb
‑
药物组合的能力以及在mAb与药物连接方面的进展为靶向癌症提供了新的可能性，同时最大限度地减少了健康组织的暴露。到2019年，FDA总共批准了七个ADC，包括：ado
‑
trastuzumab emtansine(Kadcyla
TM
)、brentuximab vedotin(Adcetris
TM
)、inotuzumab ozogamicin(Besponsa
TM
)、gemtuzumab ozogamicin(Mylotarg
TM
)、polatuzinumab vegotin piiq(Polivy
TM
)、Enfortumab vedotin(Padcev
TM
)和Trastuzumab deruxtecan(Enhertu
TM
)。所有这些都涉及细胞毒性药物与二价mAb的偶联。除了已批准上市的七种ADC药物外，大量ADC也正在临床开发中。
[0009]HER2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2，人类表皮生长因子受体2)也称为Neu、ErbB
‑
2、CD340或p185，是ERBB2基因编码的表皮生长因子受体(EGFR/ErbB)家族的成员。该基因的获得性体细胞改变导致在人类乳腺癌、膀胱癌、胃癌和肺癌中分别发生约20
‑
25％、23
‑
80％、10
‑
30％和20％的扩增和过表达。扩增和过表达导致与HER2相关的增殖刺激增加。增殖刺激的增加导致肿瘤生长增强。因此，增强的或组成型的HER2活性被认为是表达HER2的人肿瘤细胞中恶性肿瘤的驱动力。罗氏(Roche)公司开发了靶向HER2的曲妥珠单抗(Trastuzumab)和帕妥珠单抗(Pertuzumab)，它们通过阻止HER2必要的二聚化或与HER家族其他成员(EGFR、HER3和HER4)的异源二聚化来抑制酪氨酸激酶信号通路，反过来减缓
了HER2过表达(HER2阳性)癌细胞的生长。为了进一步提高靶向HER2的抗体疗法的治疗获益，罗氏推出了Trastuzumab emtansine(T
‑
DM1)，该药物将曲妥珠单抗的抗肿瘤活性与抗微管剂DM1相结合。
[0010]表皮生长因子受体(Epidermal growth factor recepotr,EGFR，也称为HER1或c
‑
erbB
‑
1)是170kDa的跨膜糖蛋白，是细胞表面受体酪氨酸激酶家族的成员。EGFR在许多上皮肿瘤中被异常激活，包括在非小细胞肺癌、乳腺癌、大肠癌、头颈癌和前列腺癌中的那些。EGFR的异常激活可能是由于受体的过表达、基因扩增、激活突变、受体配体的过表达和/或EGFR活性调节剂的缺失引起的。
[0011]通过阻断受体胞外结构域上的EGFR结合位点或抑制细胞内酪氨酸激酶活性来中断EGFR信号传导，可以阻止表达EGFR的肿瘤的生长并改善患者的病情。抗EGFR抗体通过结合细胞表面的受体来干扰配体结合，从而发挥抗肿瘤作用，从而抑制了其下游信号传导途径。嵌合单克隆抗体C225(或cetuximab，西妥昔单抗)包含鼠mAb225的可变区和人IgG1的恒定区，可在世界各地用于治疗伊立替康难治性结肠癌。
[0012]批准用于EGFR的裸抗(即西妥昔单抗、尼莫妥珠单抗、帕尼单抗和尼西单抗)在恶性肿瘤中显示出治疗作用，但通常与化学疗法药物联合使用以达到显著的临床疗效。由于裸抗的活性欠佳，抗体药物偶联物(Antibody
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drug conjugate,ADC)作为下一代疗法可能会增加抗体的抗肿瘤活性。在EGFR靶向治疗中，尚无商业批准的ADC，但数个ADC已进入临床试验。AVID
‑
100是由美登木素生物碱与抗EGFR抗体连接而成，被开发用于治疗I/II期的上皮肿瘤患者。ABT
‑
414由通过可裂解接头与抗EGFRvIII抗体连接的单甲基澳瑞他汀F组成，已在III期中显示出对表达扩增的EGFR和EGFRvIII的肿瘤的显著疗效(van den Bent et al.,2017)。所有临床阶段的靶向EGFR的ADC均使用常规的二价抗EGFR mAb作为靶向抗体。
[0013]专利技术简述
[0014]一方面，本公开提供了抗体药物偶联物(Antibody
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drug conjugate,ADC)，其包括：四价单克隆抗体[或四聚体(tetrabody)]，所述四价单克隆抗体通过化学接头与细胞毒性药物偶联；其中，所述单克隆抗体包括：两条长链和四条短链；其中每条所述长链包括第一片段和第二片段，所述第一片段位于所述长链的N端附近，所述第二片段位于所述长链的C端附近，每个所述第一片段和每个所述第二片段与一条所述短链配对，从而形成抗原结合片段结构域，因此形成对同一抗原具有特异性的四个抗原结合片段结构域。
[0015]在所述ADC的一些实施方案中，所述两条长链彼此相同，并且所述四条短链彼此相同。在一些实施方案中，所述两条长链可以彼此不同。在一些实施方案中，所述四条短链可以彼此不完本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗体药物偶联物(ADC)或其药学上可接受的盐，其包括：四价单克隆抗体，所述四价单克隆抗体通过化学接头与细胞毒性药物偶联；其中，所述单克隆抗体包括：两条长链和四条短链；其中每条所述长链包括第一片段和第二片段，所述第一片段位于所述长链的N端附近，所述第二片段位于所述长链的C端附近，每个所述第一片段和每个所述第二片段与一条所述短链配对，从而形成抗原结合片段结构域，因此形成对同一抗原具有特异性的四个抗原结合片段结构域。2.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，所述两条长链是相同的，并且其中所述四条短链是相同的。3.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，每条所述长链的所述第一片段和所述第二片段具有相同的序列。4.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，每条所述长链的所述第一片段和所述第二片段具有不同的序列。5.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，每条所述长链包括具有天然人IgG1、IgG2、IgG4同种型之一的CH2
‑
CH3结构域序列的子序列，所述子序列位于所述第一片段和所述第二片段之间。6.如权利要求5所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，所述子序列具有一个或多个突变。7.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，每条所述短链包括天然人IgG同种型的VL
‑
CL(λ)或VL
‑
CL(κ)的序列。8.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，每条所述短链包括VH
‑
CH1的序列，其中CH1是人IgG同种型。9.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，至少一条所述长链的至少一个所述第一片段或所述第二片段包括天然人IgG1、IgG2或IgG4同种型的VL
‑
CL(κ)序列。10.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中：(a)每条所述长链包含如SEQ ID NO:1所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:2所示的序列；或者(b)每条所述长链包含如SEQ ID NO:3所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:4所示的序列；或者(c)每条所述长链包含如SEQ ID NO:5所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:6所示的序列；或者(d)每条所述长链包含如SEQ ID NO:7所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:8所示的序列；或者(e)每条所述长链包含如SEQ ID NO:9所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:10所示的序列；或者(f)每条所述长链包含如SEQ ID NO:11所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:12所示的序列；或者(g)每条所述长链包含如SEQ ID NO:13所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:14所示的序列；或者
NO:33所示的序列。15.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，所述第二片段通过柔性肽接头与所述长链的其余部分连接，所述柔性肽接头包括(G
x
S)
y
序列的一个或多个重复单元，其中x为1到6(包含)之间的整数，而y是0到8(包含)之间的整数。16.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，所述抗原选自EGFR、HER2和c
‑
MET组成的组。17.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，每条所述短链包含选自由SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:24组成的组中的序列。18.如权利要求1所述的ADC或其药学上可接受的盐，其中，每条所述长链包含选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:23组成的组中的序列。19.ADC或其药学上可接受的盐，其包含：单克隆抗体，所述单克隆抗体通过化学接头与细胞毒性药物偶联，所述单克隆抗体包括两条相同的长链和四条相同的短链；其中：(a)每条所述长链包含如SEQ ID NO:1所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:2所示的序列；或者(b)每条所述长链包含如SEQ ID NO:3所示的序列，并且每条所述短链包含如SEQ ID NO:4所示的序列；或者(c)每条所述长链包含如SEQ ID ...

【专利技术属性】
技术研发人员：周宇虹，魏紫萍，
申请(专利权)人：百力司康生物医药杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：