单环倍半萜类化合物及其用途制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，涉及单环倍半萜类化合物及其用途，具体涉及从药用植物灯盏细辛全草中分离得到的8个具有相同平面结构的单环倍半萜类化合物(四对对映异构体)，及其在制备抗血栓药物中的应用。所述的单环倍半萜类化合物或其盐是从菊科飞蓬属植物灯盏细辛(Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.)中同时分离得到的。其结构如下：其结构如下：其结构如下：

【技术实现步骤摘要】
单环倍半萜类化合物及其用途

：
[0001]本专利技术属于医药
，涉及单环倍半萜类化合物及其用途，具体涉及从药用植物灯盏细辛全草中分离得到的8个具有相同平面结构的单环倍半萜类化合物(四对对映异构体)，及其在制备抗血栓药物中的应用。

技术介绍

[0002]灯盏细辛，又名灯盏花、灯盏草、短茎飞蓬，为菊科植物短葶飞蓬Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.的干燥全草，多见于山地疏林下、草丛或向阳坡地。主要分布于我国云南、广西、四川、贵州和西藏等西南部地区，其性寒，味辛、微苦、温，归心、肝经，全草入药，具有散热解表、舒经治瘫、活血通络止痛、祛风散寒的功效，已收入2015年版《中国药典》。现代药理研究表明，灯盏细辛具有心脑血管保护、神经保护、抗氧化、抗癌等药理作用。
[0003]灯盏细辛为传统中药，主要用于治疗脑中风及其后遗症。自20世纪80年代，已开发了片剂和注射剂在临床上用于治疗脑栓塞、脑血栓形成、脑血栓引起的瘫痪、冠心病、心绞痛、急性肾功能衰退等，在临床上有非常确切的疗效。目前研究中，灯盏乙素(野黄芩苷)及二咖啡酰基奎宁酸酯类化合物是其中的主要有效成分。萜类天然产物结构的多样性决定了其生物活性多样性，我们不难从中发现一些研究报道关于萜类成分在心血管疾病中所发挥的重要作用。最有效的萜类包括潜在的高血压治疗药物citronellol,linalool，预防血栓形成的(+)-nootkatone和石竹烯氧化物，以及防止或改善心肌梗死的triptolide。一些临床试验也提供了萜类成分如sterol glycosides,ginsenosides and carotenoid等在心血管医药领域发挥的巨大潜力。但对于该类化合物的研究还很有限，有待于更进一步地研究。

技术实现思路
：
[0004]为了克服现有技术的缺陷，本专利技术提供了一系列单环倍半萜类化合物、异构体或其盐，其结构如下：
[0005][0006]进一步地，本专利技术提供了如下的单环倍半萜类化合物、异构体或其盐：
[0007][0008]所述的单环倍半萜类化合物、异构体或其盐是从菊科飞蓬属植物灯盏细辛(Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.)中同时分离得到的。
[0009]本专利技术提供了所述的单环倍半萜类化合物、异构体或其盐的制备方法，包括如下步骤：
[0010](1)灯盏细辛干燥全草以乙醇加热回流提取，合并提取液，浓缩得浸膏，浸膏采用二氯甲烷或三氯甲烷进行萃取得到二氯甲烷或三氯甲烷层及水层浸膏；
[0011](2)将水层浸膏经大孔吸附树脂柱使用乙醇-水系统(50％-80％)进行快速梯度洗脱，经硅胶薄层检识分为三个馏分A、B、C；
[0012](3)馏分C再经快速减压硅胶柱色谱以二氯甲烷/三氯甲烷-甲醇-水系统(9.0:1.0:0.0-1.0:1.0:0.8)进行快速梯度洗脱，经硅胶薄层检识进行合并后共得三个馏分C1、C2、C3；
[0013](4)馏分C1经聚酰胺柱色谱，以乙醇-水系统(60％-90％)进行梯度洗脱，共收集到三个组分C
1-1
、C
1-2
、C
1-3
。
[0014](5)所得组分C
1-1
经凝胶柱色谱以乙醇-水(60:40)进行等度洗脱，得到三个组C
1-1-1
、C
1-1-2
、C
1-1-3
。
[0015](6)组分C
1-1-2
经硅胶柱色谱以二氯甲烷/三氯甲烷-甲醇系统(50:1-1:1)进行梯度洗脱，经薄层检识和HPLC分析进行合并得到五个组分C
1-1-2-1-C
1-1-2-5
。
[0016](7)所得组分C
1-1-2-2
经ODS柱色谱以甲醇-水(20％-90％)进行梯度洗脱，得到六个组分C
1-1-2-2-1-C
1-1-2-2-6
。
[0017](8)利用半制备HPLC对组分C
1-1-2-2-5
以25％乙腈水系统进行洗脱，得到了一对差向异构体1和2，其平面结构如下：
[0018][0019]其中，步骤(1)中所述的乙醇为70-80％工业乙醇，提取2-3次。二氯甲烷或三氯甲烷与浸膏的体积比例为1:1，萃取3-4次。
[0020]进一步地，
[0021]对这对差向异构体1和2进行手性拆分得到化合物1a-1d和2a-2d。其手性制备拆分方法为：利用Daicel Chiralpak AD-H和Daicel Chiralpak IC手性色谱柱，流动相为正己烷-异丙醇混合溶剂，比例分别为8:1和5:1(v:v)，流速分别为2.00和0.45mL/min，紫外检测器检测波长为210nm。
[0022]本专利技术中所述的手性拆分条件，适用于化合物1和2。
[0023]本专利技术所得化合物的结构鉴定结果如下：
[0024]利用高分辨质谱、一维和二维NMR技术对化合物1、2的平面结构及相对构型进行确定。通过比较实测ECD和计算ECD谱图，Mosher's法对拆分后的光学纯化合物1a-1d和2a-2d的绝对构型进行确定。
[0025]化合物1:透明油状化合物，HRESI-MS给出准分子离子峰m/z 293.1769[M+Na]+
(calcd for C
15
H
26
O4,293.1723)，结合1H,
13
C NMR数据确定其分子式为C
15
H
26
O4，不饱和度为3。1H NMR(600MHz,CDCl3)谱中，低场区可见δ
H 6.41(1H,dd,J＝15.2,10.9,1.8Hz),6.12(1H,d,J＝10.9Hz),5.74(1H,d,J＝15.2Hz)为相互偶合烯氢信号,δ
H 4.17(1H,dd,J＝7.8,3.5Hz),3.80(1H,t,J＝7.2Hz)为两个连氧次甲基氢信号，δ
H 3.65(1H,dd,J＝11.2,3.9Hz),3.54(1H,dd,J＝11.2,7.8Hz)为一个连氧亚甲基氢信号。高场区可见4个甲基氢信号δ
H 1.77(3H,m),1.33(3H,s),1.22(3H,s),1.13(3H,s)，其余δ
H 1.90(1H,m),1.77(1H,m)和1.83(2H,m)为脂肪族氢信号。
13
C NMR(100MHz,CDCl3)和HSQC谱推测含有15个碳信号，提示化合物1为倍半萜。其中包括两组共轭的双键信号δ
C 140.0,135.9,125.7,122.3，五个连氧碳信号δ
C 85.8,83.0,77.0,71.4,65.4，六个sp3杂化碳δ
C 38.2,27.3,27.3,26.6,24.3,13本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.单环倍半萜类化合物、异构体或其盐：2.权利要求1所述的单环倍半萜类化合物、异构体或其盐：3.权利要求1所述的单环倍半萜类化合物或其盐的制备方法：(1)灯盏细辛干燥全草以乙醇加热回流提取，合并提取液，浓缩得浸膏，浸膏采用二氯甲烷或三氯甲烷进行萃取得到二氯甲烷或三氯甲烷层及水层浸膏；(2)将水层浸膏经大孔吸附树脂柱使用乙醇-水系统50％-80％进行快速梯度洗脱，经硅胶薄层检识分为三个馏分A、B、C；(3)馏分C再经快速减压硅胶柱色谱以二氯甲烷/三氯甲烷-甲醇-水系统进行快速梯度洗脱，经硅胶薄层检识进行合并后共得三个馏分C1、C2、C3；(4)馏分C1经聚酰胺柱色谱，以乙醇-水系统60％-90％进行梯度洗脱，共收集到三个组分C
1-1
、C
1-2
、C
1-3
。(5)所得组分C
1-1
经凝胶柱色谱以60％乙醇水进行等度洗脱，得到三个组C
1-1-1
、C
1-1-2
、C
1-1-3
。(6)组分C
1-1-2
经硅胶柱色谱以二氯甲烷/三氯甲烷-甲醇系统50:1-1:1进行梯度洗脱，经薄层检识和HPLC分析进行合并得到五个组分C
1-1-2-1-C
1-1-2-5
。(7)所得组分C
1-1-2-2
经ODS柱色谱以甲醇-水2...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玲芝，韩双，宋少江，
申请(专利权)人：沈阳药科大学，
类型：发明
国别省市：