一种长非编码RNA及其在诊断/治疗类风湿关节炎中的应用制造技术

本发明专利技术公开了长非编码RNA(lncRNA)及其在诊断/治疗类风湿关节炎(RA)中的应用。所述lncRNA即lncRNA RP1‑90J20.8，本发明专利技术涉及其在评估RA关节炎症和关节破坏严重程度及靶点药物治疗中的应用；针对lncRNA RP1‑90J20.8检测的试剂可以协助RA诊断及评估和判断关节侵蚀破坏；靶向沉默lncRNA RP1‑90J20.8基因能够抑制关节破坏以及辅助RA的治疗。本专利明确了lncRNA RP1‑90J20.8在RA中的生物学功能和临床意义，为lncRNA RP1‑90J20.8作为RA辅助诊断、预测RA预后的标记物以及治疗新靶点提供充分的理论依据，在开发RA辅助诊断、预后评价、治疗药物方面具有很大的意义和应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种长非编码RNA及其在诊断/治疗类风湿关节炎中的应用
本专利技术属于生物医药
更具体地，涉及一种长非编码RNA及其在诊断/治疗类风湿关节炎中的应用。
技术介绍
类风湿关节炎(RA)是一种以进行性关节破坏为特征的慢性炎症性自身免疫病，其主要病理表现为滑膜炎和血管翳形成，进而导致关节软骨和骨破坏，最终出现关节畸形和功能丧失。流行病学调查显示，RA的全球发病率为0.5％-1％；我国最新的RA诊疗指南指出，我国大陆的地区发病率为0.42％，总患病人群约500万。对RA的低认知度和不规范的治疗导致了RA的高致残率，并且随着病程延长残疾的发生率也逐渐升高，不仅严重影响患者的生活质量，也为患者个人、家庭和社会带来沉重的经济负担。目前有效的治疗手段是RA患者一经确诊，应尽早应用改善病情抗风湿药(DMARDs)治疗。然而，尽管靶向治疗药物如生物DMARDs和小分子靶向合成DMARDs等显著提高了RA疗效，但其昂贵的费用限制了在我国RA患者中的应用。我国一项队列研究显示，我国生物DMARDs在RA中的使用率仅为8.3％，远低于欧美国家的使用率。同时，传统DMARDs如甲氨蝶呤等以及生物制剂的长期应用还可能导致感染、肝肾毒性、骨髓抑制及淋巴系统肿瘤等不良反应，进一步限制了其应用，因此临床上新的、高效低毒的RA靶向治疗药物还亟需开发。成纤维样滑膜细胞(FLS)是导致RA滑膜炎和关节软骨和骨破坏的关键效应细胞。RA-FLS具有类似肿瘤的生物学特征，包括增殖过度、更强的抗凋亡能力、分泌炎症因子和黏附分子的能力增强以及具有迁移性和侵袭性等。RA-FLS的持续增殖导致滑膜增生和血管翳形成，大量的炎症因子分泌促进了关节炎的持续发生，黏附分子和基质金属蛋白酶(MMPs)的分泌和细胞的迁移和侵袭性导致骨和软骨的侵蚀，最终使关节毁损，导致残疾。因此，针对RA-FLS的治疗对于缓解RA病情和抑制RA关节破坏有着重要意义。长非编码RNA(lncRNA)是指一类转录本长度大于200个核苷酸、不编码蛋白的非编码RNA亚类，可以通过与DNA、蛋白质、mRNA、microRNA等生物大分子相互作用，作为诱导分子、诱饵分子、支架分子等多种方式在染色质重构、基因转录和翻译以及蛋白修饰等多重水平调控基因表达及功能，在生命活动中发挥关键调控作用。目前关于lncRNA在RA-FLS的生物学功能中的作用研究尚不足。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供新的RA诊断、评估与治疗的靶点和方案。本专利技术目的是提供一种lncRNA在作为RA诊断或治疗靶点中的应用。本专利技术另一目的是提供识别所述lncRNA的标记物在制备RA诊断或治疗产品中的应用。本专利技术另一目的是提供所述lncRNA的抑制剂在制备RA诊断产品中的应用。本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：为研究lncRNA在RA发生发展中的作用，我们分析检测了RA患者(n＝5)和正常对照组患者滑膜FLS(n＝5)中差异表达的lncRNA，结果显示RA-FLS中lncRNARP1-90J20.8(lncRNARP1-90J20.8是一条长度为408nt的lncRNA，其位于人类染色体chr6(p25.2)上)表达较正常对照组患者滑膜FLS高11.84倍，表明lncRNARP1-90J20.8在类风湿关节炎发生发展过程中发挥重要作用且可作为诊断、病情评估及治疗的分子靶标。另外细胞功能学实验发现，在RA-FLS中敲减lncRNARP1-90J20.8的表达抑制RA-FLS增殖和迁移、侵袭能力，促进RA-FLS凋亡。综合实验结果显示：lncRNARP1-90J20.8在RA-FLS中高表达并促进RA-FLS活化，导致RA关节破坏，并具有作为RA诊断及治疗的分子标记物的应用前景。因此，本专利技术提供了新的用于协助诊断RA及评估和判断关节侵蚀破坏情况及作为治疗RA药物靶点，即LncRNARP1-90J20.8。所述lncRNARP1-90J20.8位于人类染色体chr6(p25.2)，基因长度为408bp，其核苷酸序列为SEQIDNO:1所示：tcctttgtgagatgccactatcgggggaaaccggatggcttcacagaaaaagttcgtttaaaggaaaatggtttaaggccaaggaaatacctagaaaacggaaagtcttgaaaccagagccggaaaaagaatgcctgtgtttcgaagttccttcttaggacgaaaccagctgaagctggcgaaatccaagatggcgcctctgaagagcctctggctttatcatcatcctgttctcatgctaaacaacatgtcgccatgacaacgactggaagagaccaagaagggacagaaaaaaaggggtttcttgattccgggaaaaatctccgttctttcccaaggaaagcacgaatattcccccccgtgctcttaatgcccagccccttcattaaagacaccctacctctgaaa因此，本专利技术要求保护：1.所述lncRNA(lncRNARP1-90J20.8)在作为RA诊断靶点方面的应用，以及在作为类风湿关节炎治疗靶点方面的应用。2.识别所述lncRNA(lncRNARP1-90J20.8)的标记物在制备RA诊断产品、或评估/判断关节侵蚀破坏情况的产品、或治疗产品中的应用。所述标记物包括但不限于：(1)结合lncRNARP1-90J20.8的引物/引物组，或荧光标记的结合lncRNARP1-90J20.8的探针；(2)结合lncRNARP1-90J20.8的小分子化合物；(3)结合lncRNARP1-90J20.8的生物大分子，所述的生物大分子包括但不限于：抗体或抗体功能片段、荧光标记的抗体或抗体功能片段、RNA结合蛋白或其功能片段、荧光标记的RNA结合蛋或其功能片段。作为一种可选择的优选方案，所述标记物为结合所述lncRNA的引物组RP1-90J20.8(F)和RP1-90J20.8(R)，核苷酸序列SEQIDNO.2和3所示：RP1-90J20.8(F)：SEQIDNO.2：TCCCTCTCAGACATTTATTGGTTCARP1-90J20.8(R)：SEQIDNO.3：CAGTGCACCTTAGGATGGGG上述产品包括试剂、试剂盒等。3.抑制所述lncRNA(lncRNARP1-90J20.8)的抑制剂在制备RA治疗药物中的应用。所述抑制剂包括但不限于：(1)抑制lncRNARP1-90J20.8的siRNA、shRNA或功能类似的干扰小RNA；(2)抑制lncRNARP1-90J20.8的小分子化合物：(3)抑制lncRNARP1-90J20.8的生物大分子，所述的生物大分子包括但不限于：抗体或抗体功能片段、高底物专一性的酶或其功能片段。作为一种可选择的优选方案，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.lncRNA RP1-90J20.8在作为类风湿关节炎诊断靶点方面的应用。/n

【技术特征摘要】
1.lncRNARP1-90J20.8在作为类风湿关节炎诊断靶点方面的应用。


2.lncRNARP1-90J20.8在作为类风湿关节炎治疗靶点方面的应用。


3.识别lncRNARP1-90J20.8的标记物在制备类风湿关节炎诊断产品、或评估/判断关节侵蚀破坏情况的产品中的应用；
所述标记物包括：
(1)结合lncRNARP1-90J20.8的引物/引物组，或荧光标记的结合lncRNARP1-90J20.8的探针；
(2)结合lncRNARP1-90J20.8的小分子化合物；
(3)结合lncRNARP1-90J20.8的生物大分子，所述的生物大分子包括：抗体或抗体功能片段、荧光标记的抗体或抗体功能片段、RNA结合蛋白或其功能片段、荧光标记的RNA结合蛋或其功能片段。


4.识别lncRNARP1-90J20.8的标记物在制备类风湿关节炎治疗产品中的应用，其特征在于，所述标记物同权利要求3中所示。


5.识别lncRNARP1-90J20.8的标记物在制备类风湿关节炎诊断产品、或评估/判断关节侵蚀破坏情况的产品中的应用，其特征在于，所述标记物为结合所述lncRNA的引物组RP1-90J20.8(F)和RP1-90J20.8(R)，核苷酸序列SEQIDNO.2和3所示：
RP1-90J20.8(F)：SEQIDNO.2：TCCCTCTCAGACATTTATTGGTTCA
RP1-90J20.8(R)：S...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴冽，马剑达，荆俊，吴滔，
申请(专利权)人：中山大学孙逸仙纪念医院，
类型：发明
国别省市：广东;44