miRNA-601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种miR‑601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用，属于生物医药领域。本发明专利技术提供了一种与骨关节炎相关的分子标记物miR‑601，核苷酸序列为5’‑UGGUCUAGGAUUGUUGGAGGAG‑3’（SEQ ID No.1）。该标志物在骨关节炎患者中表达下调，通过对miR‑601进行特异性的检测能达到诊断OA的目的；并且通过OA软骨细胞增值能力和细胞凋亡能里的检测发现，miR‑601能够提高OA软骨细胞增殖能力、降低OA软骨细胞凋亡。因此，利用检测miR‑601不仅能够快速有效的做到骨关节炎的早期检测，而且为miR‑601靶向治疗提供了重要依据。

【技术实现步骤摘要】
miRNA-601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及miR-601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用。
技术介绍
骨关节炎（osteoarthritis，OA）是发生在老年人群体中一种常见的退行性关节疾病，给患者家庭和社会带来巨大的负担（NelsonAE.Osteoarthritisyearinreview2017:clinical.OsteoarthritisCartilage.2018,26(3):319-325.）。骨关节炎的主要病理特征包括有关节软骨侵蚀、滑膜炎和软骨下骨退化，但其确切发生机制尚不清楚（HunterDJ,Bierma-ZeinstraS.Lancet.2019,393(10182):1745-1759.）。现有研究表明，负荷过度、创伤、炎症系统失衡、抗炎通路的受损等多种病理因素共同参与了骨关节炎的发生和发展，导致细胞衰老、细胞密度降低、分泌活性异常、细胞外基质（ECM）降解、关节软骨发育受损等（RobinsonWH,LepusCM,WangQetal.Low-gradeinflammationasakeymediatorofthepathogenesisofosteoarthritis.NatRevRheumatol.2016,12(10):580-92.）。保守治疗是目前OA的主要治疗手段，主要局限于控制疼痛。多种药物，如非甾体抗炎药、环氧合酶-2(COX-2)抑制剂、氨基葡萄糖、类固醇和透明质酸(PhilpAM,DavisET,JonesSW.Developinganti-inflammatorytherapeuticsforpatientswithosteoarthritis.Rheumatology(Oxford).2017,56(6):869-881.)已被应用于临床上延缓OA的进展，但这些药物仅限于疼痛控制，并不能逆转骨关节炎，且长期使用均具有显著副作用（CutoloM,BerenbaumF,HochbergM,etal.Commentaryonrecenttherapeuticguidelinesforosteoarthritis.SeminArthritisRheum.2015,44(6):611-617.）。关节置换是治疗晚期OA的主要手段，虽然其效果显著，但费用昂贵且有一定的使用年限（ZhangW,OuyangH,DassCR,etal.Currentresearchonpharmacologicandregenerativetherapiesforosteoarthritis.BoneRes.2016,4:15040.）。MicroRNAs(miRNAs)是一类全长约19-23个核苷酸的内源性非编码单链RNA分子，其主要通过与降解靶mRNA或干扰翻译调控基因表达水平，进而参与多种生物学过程。大量研究证实miRNA在肿瘤、炎症、糖尿病等疾病的发生发展中扮演重要角色。近来发现miRNA参与骨关节炎的发生发展（TavallaeeG,RockelJS,LivelyS,etal.MicroRNAsinSynovialPathologyAssociatedWithOsteoarthritis.FrontMed(Lausanne).2020,7:376.），因此，发现骨关节炎特异性miRNA有望为OA的诊疗提供一种新的治疗方法或者检测手段。尽管越来越多的miRNA作为人类疾病的生物标志物及治疗靶点被发现，寻找OA中特异表达的、参与软骨细胞增殖能力与凋亡的miRNA，阐明其作用机理，对于开发以miRNA为策略的OA的诊断、治疗具有及其重要的意义和应用前景。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供了miR-601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用，包括制备诊断OA的试剂盒和治疗OA的药物。利用miR-601检测骨关节炎不仅能够快速有效的做到早期检测，而且为miR-601靶向治疗OA提供了重要依据。为了实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案。本专利技术提供了miR-601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用，其特征在于，所述miR-601核苷酸序列为5’-UGGUCUAGGAUUGUUGGAGGAG-3’（SEQIDNo.1）。进一步地，所述miR-601的核苷酸序列进一步被部分替换或增减后保持所述miR-601的活性。本专利技术还提供了一种miR-601作为分子标记物在诊断疗骨关节炎的试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒包含用于特异性检测miR-601的引物和探针；优选地，所述miR-601特异性引物如下所示的序列：5'-TGGTCTAGGATTGTTGGA-3'（SEQIDNo.2）5'-CAGTGCGTGTCGTGGAGT-3'（SEQIDNo.3）。本专利技术还提供了一种miR-601作为分子标记物在用于制备靶向治疗骨关节炎的药物中的应用，其特征在于，所述药物包含miR-601的促进软骨细胞增殖和抑制软骨细胞凋亡的活性。进一步地，一种miR-601作为分子标记物在用于制备靶向治疗骨关节炎的药物中的应用，其特征在于，所述miR-601进一步被修饰，修饰后的miR-601保持所述miR-601的活性。优选地，所述修饰选自核糖修饰、碱基修饰、磷酸骨架修饰中的至少一种。进一步地，所述的一种miR-601作为分子标记物在用于制备靶向治疗骨关节炎的药物中的应用，其特征在于，所述药物可根据需要制备成各种剂型，包括但不限于溶液剂、片剂、颗粒剂、贴剂、胶囊剂、膏剂、气雾剂或栓剂。进一步地，所述的一种miR-601作为分子标记物在用于制备靶向治疗骨关节炎的药物中的应用，其特征在于，所述药物的施用途径不受限制，包括但不限于关节腔、口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、舌下含化、鼻腔喷雾、直肠灌注、口腔喷雾、皮肤局部或全身经皮用药。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下。本专利技术公开了一种与骨关节炎相关的分子标记物miR-601，并进一步证实miR-601在骨关节炎患者中表达下调，通过对miR-601进行特异性的检测能达到诊断OA的目的；并且通过OA软骨细胞增值能力和细胞凋亡能里的检测发现，miR-601能够提高OA软骨细胞增殖能力、降低OA软骨细胞凋亡。因此，利用检测miR-601不仅能够快速有效的做到骨关节炎的早期检测，而且为miR-601靶向治疗提供了重要依据。附图说明图1骨关节炎患者miR-601的表达情况。图2ROC曲线评价miR-601对OA的诊断价值。图3miR-601模拟物转染效果验证。图4miR-601对OA软骨细胞增殖能力的影响。图5miR-601对OA软骨细胞凋亡的影响。具体实施方式下面将结合本专利技术的实施例和附图，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。若未特别指明，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.miR-601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用，其特征在于，所述miR-601核苷酸序列为5’-UGGUCUAGGAUUGUUGGAGGAG-3’（SEQ ID No.1）。/n

【技术特征摘要】
1.miR-601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用，其特征在于，所述miR-601核苷酸序列为5’-UGGUCUAGGAUUGUUGGAGGAG-3’（SEQIDNo.1）。


2.根据权利要求1所述的miR-601作为分子标记物在诊断和治疗骨关节炎中的应用，其特征在于，所述miR-601的核苷酸序列进一步被部分替换或增减后保持所述miR-601的活性。


3.一种miR-601作为分子标记物在诊断疗骨关节炎的试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒包含用于特异性检测miR-601的引物和探针。


4.根据权利要求3所述的一种miR-601作为分子标记物在诊断疗骨关节炎的试剂盒中的应用，其特征在于，所述miR-601特异性引物如下所示的序列：
5'-TGGTCTAGGATTGTTGGA-3'（SEQIDNo.2）
5'-CAGTGCGTGTCGTGGAGT-3'（SEQIDNo.3）。


5.一种miR-601作为分子标记物在用于制备靶向治疗骨关节...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙明立，
申请(专利权)人：沈阳体育学院，
类型：发明
国别省市：辽宁;21