一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)无菌采集人体脂肪；(2)胶原酶消化；(3)脂肪间充质干细胞分离与原代培养(4)脂肪间充质干细胞传代培养；(5)干细胞冻存；(6)干细胞质量检验；(7)干细胞入库。脂肪间充质干细胞是存在于脂肪组织的成体多潜能干细胞，在一定条件下可分化为骨、软骨、心肌、平滑肌、神经及内皮等多种组织细胞，并且脂肪组织来源丰富，体内的储备量大，取材相对容易，少量组织即可以获得大量的干细胞，衰亡率低等优势，因此建立脂肪间充质干细胞工作细胞库能够为细胞治疗提供良好的、充足的细胞来源，为临床应用提供潜在的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法
本专利技术涉及一种工作细胞库的制备方法，具体涉及一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法。
技术介绍
间充质干细胞(MesenchymalStemCells，MSCs)是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层。间充质干细胞最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。脂肪间充质干细胞(AdiposeMesenchymalStemCells,ADSC)是存在于脂肪组织的成体多潜能干细胞，在一定条件下可分化为骨、软骨、心肌、平滑肌、神经及内皮等多种组织细胞。由于脂肪组织来源丰富，体内的储备量大，取材相对容易，少量组织即可以获得大量的干细胞，衰亡率低等优势，因此人脂肪间充质干细胞在临床上具有很高的应用价值本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)无菌采集人体脂肪；/n(2)胶原酶消化；/n(3)脂肪间充质干细胞分离与原代培养；/n(4)脂肪间充质干细胞传代培养；/n(5)脂肪间充质干细胞冻存；/n(6)脂肪间充质干细胞质量检验；/n(7)脂肪间充质干细胞入库。/n

【技术特征摘要】
1.一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)无菌采集人体脂肪；
(2)胶原酶消化；
(3)脂肪间充质干细胞分离与原代培养；
(4)脂肪间充质干细胞传代培养；
(5)脂肪间充质干细胞冻存；
(6)脂肪间充质干细胞质量检验；
(7)脂肪间充质干细胞入库。


2.根据权利要求1所述的一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法，其特征在于，所述无菌采集脂肪之后需要进行油脂去除处理，包括：首先将脂肪组织转入离心管中，加入质量分数为0.9％的氯化钠注射液，离心后分层，收集上层脂肪组织并用质量分数为0.9％的氯化钠注射液反复洗涤4-6次。


3.根据权利要求1所述的一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法，其特征在于，所述脂肪间充质干细胞分离与原代培养包括以下步骤：(1)用无血清培养体系重悬细胞，接种培养至恒温恒湿CO2培养箱中；(2)24-48h后，观察细胞贴壁情况，若看到30％及以上的梭状细胞贴壁可进行半量换液；(3)后续每隔2-3天全量换液；(4)培养至5-7天可观察到贴壁细胞融合度达到80％及以上，则可进行收获传代至工作库细胞冻存。


4.根据权利要求3所述的一种脂肪间充质干细胞工作细胞库的制备方法，其特征在于，所述培养箱的条件为温度37℃、5％CO2，湿度94～96％。

【专利技术属性】
技术研发人员：朱灏，
申请(专利权)人：达瑟儿上海生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31