一种间充质干细胞大规模培养方法技术

本发明专利技术涉及细胞培养增殖技术领域，尤其涉及一种间充质干细胞大规模培养方法，将干细胞制成单细胞悬液，接种于装有微载体的生物反应器中扩增。根据所需的细胞数量可以扩大细胞扩增规模，通过生物反应器级联放大，最终获取所需数量细胞，扩增后的细胞可以进行冻存或者直接进行应用。本发明专利技术可在较短时间内获取大量高质量的干细胞，可用于实验研究、生产应用或其他作用。本发明专利技术操作简便，人力需求少，扩增效率高，干细胞生长状态好，对干细胞的大规模培养及应用具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种间充质干细胞大规模培养方法
本专利技术涉及细胞培养增殖
，尤其涉及一种间充质干细胞大规模培养方法。
技术介绍
间充质干细胞是来源于发育早期的中胚层和外胚层，具有自我更新、多向分化、多方向分化潜能、造血支持以及免疫调控等特性的细胞，产生并释放营养性物质，通过旁分泌途径促进细胞修复及血管生成，在再生医学领域有重要作用。目前，主要从脂肪、骨髓、脐带、胎盘组织中提取间充质干细胞。间充质干细胞连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，在一定条件下，间充质干细胞可以分化成多种功能细胞或组织器官，适用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复的种子细胞，为临床治疗各种疾病，如神经系统疾病、肾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤等的治疗提供了新的途径。因此，对间充质干细胞进行体外培养，可以提供重要的医学材料。现有技术中，间充质干细胞临床使用量较大，使用传统培养瓶培养，耗材消耗量太大，且所需人工成本也较大，难以控制细胞均一性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服传统技术中存在的上述问题，提供一种间充质干细胞大规模培养方法。为实本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种间充质干细胞大规模培养方法，其特征在于，包括如下步骤：/n1)将复苏的间充质干细胞接种于合适规格的T-flask中，待细胞生长至80％-90％时，PBS清洗1-2遍，使用重组胰酶将细胞消化为单细胞悬液，使用胰酶抑制剂终止消化，在800-1200rpm下离心3-7min，使用培养基重悬，然后按照1×10

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞大规模培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)将复苏的间充质干细胞接种于合适规格的T-flask中，待细胞生长至80％-90％时，PBS清洗1-2遍，使用重组胰酶将细胞消化为单细胞悬液，使用胰酶抑制剂终止消化，在800-1200rpm下离心3-7min，使用培养基重悬，然后按照1×105/ml的接种量接种于生物反应器罐体中载有预处理微载体的玻璃罐体；
2)间充质干细胞接种之后，通过生物反应器控制搅拌，搅拌3-7min，停止20-40min为一个循环，循环4-8次，然后正常搅拌；
3)根据每日罐体内葡萄糖消耗情况，调整灌流速率，保证罐内细胞一直处于最佳生长状态；
4)5-6天后，根据对细胞数量的要求，直接使用重组胰酶消化获取细胞，进行冻存或者直接应用；或者使用球传球工艺，转移到更大规模生物反应器中，进一步扩大细胞规模。


2.根据权利要求1所述的间充质干细胞大规模培养方法，其特征在于：步骤1)中，终止消化后，在1000rpm下离心5min。


3.根据权利要求1所述的间充质干细胞大规模培养方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓晨，
申请(专利权)人：圣美基因科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11