外泌体在促进壁蜕膜间充质干细胞生长中的应用制造技术

本发明专利技术公开了人脐带间充质干细胞外泌体在促进壁蜕膜间充质干细胞生长中的应用，及一种促进壁蜕膜间充质干细胞生长的方法。本发明专利技术将人脐带间充质干细胞外泌体与PDB‑MSCs共同培养后，PDB‑MSCs的细胞增殖能力强、细胞形态良好、细胞活力强，即本发明专利技术的人脐带间充质干细胞外泌体可提高PDB‑MSCs的质量，有效提高PDB‑MSCs分泌细胞因子VEGF和SCF的能力，从而可解决PDB‑MSCs多次传代增殖能力下降、细胞活力差等问题，进而有效有利于PDB‑MSCs的大规模培养和临床应用。

【技术实现步骤摘要】
外泌体在促进壁蜕膜间充质干细胞生长中的应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种外泌体在促进壁蜕膜间充质干细胞生长中的应用，以及一种促进壁蜕膜间充质干细胞生长的方法。
技术介绍
壁蜕膜间充质干细胞(Parietaldecidualbasalis-mesenchymalstemcells，PDB-MSCs)具有间充质干细胞的多向分化潜能、低免疫原性等共同特点。与其它来源的间充质干细胞相比，PDB-MSCs来源于母体，和母体有更好的相容性，纯度更均一，成脂分化能力比围产期其它组织来源的间充质干细胞强；又有报道表明，PDB-MSCs比脐带间充质干细胞分泌更多的血管内皮生长因子(VEGF)和干细胞生长因子(SCF)，表明PDB-MSCs具有促进血管再生和细胞分裂等功能，证明PDB-MSCs对组织损伤修复有重要作用。PDB-MSCs在干细胞临床应用中将有较好前景。但目前，PDB-MSCs的应用还面临一些问题：现有方法和技术能分离纯度较高的PDB-MSCs，但在传代后PDB-MSCs易衰老，细胞扁平，增殖缓慢或停止增殖，失去分化能力等，因此需要本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人脐带间充质干细胞外泌体在促进壁蜕膜间充质干细胞生长中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.人脐带间充质干细胞外泌体在促进壁蜕膜间充质干细胞生长中的应用。


2.如权利要求1所述的人脐带间充质干细胞外泌体在促进壁蜕膜间充质干细胞生长中的应用，其特征在于，所述人脐带间充质干细胞外泌体是由P5代人脐带间充质干细胞分泌的。


3.如权利要求2所述的人脐带间充质干细胞外泌体在促进壁蜕膜间充质干细胞生长中的应用，其特征在于，所述人脐带间充质干细胞外泌体的制备方法，包括：
S1、将P4代的人脐带间充质干细胞按9000～12000个/cm2的浓度接种于培养瓶中，加入20～30ml无血清增殖培养基进行培养；
S2、培养至90％融合度时，收集上清液，得到第一上清液；
S3、将第一上清液离心，收集上清液，得到第二上清液；
S4、将第二上清液过滤，得到滤渣，将滤渣离心并收集底部沉淀，用0.8～1.5mlPBS重悬沉淀，最后通过过滤，滤渣即为人脐带间充质干细胞外泌体。


4.如权利要求3所述的人脐带间充质干细胞外泌体在制备壁蜕膜间充质干细胞生长试剂中的应用，其特征在于，所述P4代人脐带间充质干细胞的制备方法包括：
S11、用组织保护液清洗脐带组织表面血液，去除表皮和血管组织，取出华通胶，清洗后剪碎成1～2mm3碎块，采用组织贴壁法接种培养；
S2、原代细胞培养至70％融合度时进行传代培养，培养至P4代。


5.如权利要求4所述的人脐带间充质干细胞外泌体在制备壁蜕膜间充质干细胞生长试剂中的应用，其特征在于，步骤S12中，每代细胞增殖融...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘小翠，蒙燕瑶，唐淑艳，许峻荣，雅思敏，杨景利，王进辉，
申请(专利权)人：广东唯泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44