一种稳定性高的干细胞细胞表面标志物检测方法技术

本发明专利技术涉及充质干细胞鉴定领域，尤其涉及一种稳定性高的干细胞细胞表面标志物检测方法。包括以下步骤：S1：分别将8种抗体与缓冲液混合配制得到8组抗体工作液，备用；S2：取干细胞均分于8个样品管中，分别加入缓冲液，离心4～6min，弃上清，得到8组细胞样本；S3：向8组细胞样本中分别加入8组抗体工作液避光孵育20～30min；S4：孵育结束后加入缓冲液，离心4～6min，弃上清后加入缓冲液重悬4～6min检测。本发明专利技术的检测方法不但可以稳定的使用CD73、CD90、CD105用于鉴定干细胞，并且还筛选出一种在干细胞细胞表达稳定性强的细胞表面标准物CD44与CD73、CD90、CD105共同用于鉴定、分选合格的干细胞。格的干细胞。

【技术实现步骤摘要】
一种稳定性高的干细胞细胞表面标志物检测方法


[0001]本专利技术涉及一种稳定性高的干细胞细胞表面标志物检测方法，属于细胞鉴
，所属IPC分类号为C12N5/0775。

技术介绍

[0002]在临床研究中，对某个特定细胞群的细胞进行定性定量分析或对特定的细胞群进行功能变化的测定的时候，需要将特定的细胞群与其他细胞分开，这时就需要根据细胞表面的标志物将其分开，细胞标志物是我们用来对细胞定义和分选的重要标志。间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞，它能够发育成硬骨、软骨、脂肪和其他类型的细胞，因此已成为细胞治疗的重要候选种子细胞。
[0003]根据2006年ISCT提出鉴定人来源间充质干细胞的标准之一：间充质干细胞群体表达CD73、CD90、CD105作为细胞表面的特异性抗原，其阳性表达量需要大于等于95％，现有实验室操作中，检测细胞表面标志物CD73、CD105的阳性表达量大于等于95％，满足标准，但是CD90的阳性表达大概率出现阳性表达不足的情况，这给鉴定本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种稳定性高的干细胞细胞表面标志物检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：分别将8种抗体与缓冲液混合配制得到8组抗体工作液，备用；S2：取干细胞均分于8个样品管中，分别加入缓冲液，离心4～6min，弃上清，得到8组细胞样本；S3：向8组细胞样本中分别加入8组抗体工作液避光孵育20～30min；S4：孵育结束后加入缓冲液，离心4～6min，弃上清后加入缓冲液重悬4～6min检测。2.根据权利要求1所述的一种稳定性高的干细胞细胞表面标志物检测方法，其特征在于，所述8种抗体分别为PE anti
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human CD73、PE anti
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human CD90、PE anti
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mouse/human CD44、PE anti
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CD105、PE anti
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human HLA
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DR、PE anti
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human CD34、PE anti
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human CD45、PE anti
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human CD31。3.根据权利要求1所述的一种稳定...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱灏，
申请(专利权)人：达瑟儿上海生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：