通过对CD163靶向灭活来改善猪类健康的方法技术

本发明专利技术涉及用于在动物（包括猪种群的动物）中预防猪繁殖和呼吸障碍综合症（PRRSv）的方法和组合物。本发明专利技术教导涉及其中CD163基因的至少一个等位基因已失活的猪，以及用于在基因编辑中失活CD163基因的具体方法和核酸序列。CD163基因的两个等位基因均失活的猪，对猪繁殖和呼吸障碍综合症（PRRSv）具有抵抗力。包含纯合CD163编辑基因的优良系保留了它们的优异特性。

【技术实现步骤摘要】
通过对CD163靶向灭活来改善猪类健康的方法相关申请的交叉引用本申请要求第63/020,128号、申请日为2020年5月5日的美国临时专利申请和第63/021,370号、申请日为2020年5月7日的美国临时专利申请的权益和优先权。第63/020,128号和第63/021,370号申请分别借引用全文并入于此。对以电子方式提交的序列表的引用序列表的正式副本通过EFS-Web以ASCII格式电子提交，该文件的文件名为“RD-12-2020-US2-SEQLST”，创建日期为2021年3月10日，大小为137058字节，与专利说明书同时提交。该ASCII格式文件所包含的序列表系专利说明书的一部分并在此通过引用方式完整纳入本申请。
本专利技术涉及改善猪类健康的方法。具体而言，本专利技术涉及通过对CD163进行靶向多核苷酸编辑来使猪类(Susscrofa)动物和良种系免受猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSv)感染的方法，用来防止感染并生成有抗性的动物、畜群和细胞系。
技术介绍
病毒感染是畜牧业发病率和死亡率的主要来源。具体而言本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种赋予猪PRRSV抗性的经编辑的CD163基因，其特征在于，所述编辑切除外显子7，且经编辑的基因包含SEQ ID NO: 453中所列的经修复的基因组序列。/n

【技术特征摘要】
20200505 US 63/020,128;20200507 US 63/021,3701.一种赋予猪PRRSV抗性的经编辑的CD163基因，其特征在于，所述编辑切除外显子7，且经编辑的基因包含SEQIDNO:453中所列的经修复的基因组序列。


2.根据权利要求1所述的经编辑的CD163基因，其特征在于，所述编辑使用SEQIDNOs:249和256中所列的gRNA序列来创建。


3.一种非生殖猪细胞，包含权利要求1或2所述的CD163基因。


4.一种细胞系，包含复数个根据权利要求3所述的细胞。


5.根据权利要求4所述的细胞系，其特征在于，所述细胞系是成纤维细胞系。


6.根据权利要求5所述的细胞，其特征在于，所述细胞源自PIC系2、PIC系3、PIC系15、PIC系19、PIC系27、PIC系62或PIC系65。


7.一种用于编辑猪CD163基因的成对的gRNAs，所述成对的gRNAs包含SEQIDNOs:249和256中列出的向导序列。


8.一种用于编辑猪CD163基因的CRISPR复合体，所述CRISPR复合体包含根据权利要求7所述的成对的gRNAs。


9.一种编辑猪CD163基因的方法，所述方法包含使用包含根据权利要求7所述的成对的gRNAs的CRISPR-CAS复合体。


10.一种制备PRSSV抗性猪细胞的方法，所述方法使用包含根据权利要求7所述的成对的gRNAs的CRISPR-CAS复合体。


11.一种生产PRSSV抗性猪类动物的方法，包含：
a)使用包含根据权利要求7所述的成对的gRNAs的CRISPR复合体编辑一个或复数个猪细胞的CD163基因；...

【专利技术属性】
技术研发人员：本杰明·比顿，布莱恩·伯格，迪伦·巴恩斯，马修·坎贝尔，安德鲁·马克·奇根，乔纳森·爱德华·莱特纳，马修·斯科特·库尔伯森，威廉·托马斯·克里斯蒂安森，
申请(专利权)人：吉纳斯公司，
类型：发明
国别省市：美国;US