一种O-琥珀酰巯基转移酶突变体及其在L-甲硫氨酸合成中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种O

【技术实现步骤摘要】
一种O
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琥珀酰巯基转移酶突变体及其在L
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甲硫氨酸合成中的应用
(一)

[0001]本专利技术涉及一种来源于紫色杆菌(Chromobacterium violaceum)的O
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琥珀酰巯基转移酶突变体、工程菌及其在催化合成L
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甲硫氨酸中的应用。
(二)
技术介绍

[0002]L
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甲硫氨酸人体和动物所必需的唯一含硫氨基酸，体内无法合成，必须通过食物获取，具有非常重要的生理功能，在医药、食品、饲料等行业应用广泛。近年来，蛋氨酸的全球市场年需求量逐年递增，其产业步入市场黄金期，同时也带来生产技术和成本等方面的挑战。目前蛋氨酸的主要生产方法为化学合成，然而过程中使用氢氰酸等高挥发有毒底物，反应条件苛刻，且关键核心技术被国外巨头垄断，较高的技术壁垒和资金壁垒阻碍其他企业进入。随着合成生物学的快速发展，构建微生物细胞工厂成为天冬氨酸家族氨基酸绿色高效生产的重要手段。但是目前，以葡萄糖为原料，从头合成L
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甲硫氨酸的生产强度和糖酸转化率都还处于较低水本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种O
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琥珀酰巯基转移酶metZ突变体，其特征在于所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第113位、第212位进行单突变或双突变获得的。2.如权利要求1所述的O
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琥珀酰巯基转移酶metZ突变体，其特征在于所述突变体是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第113位丝氨酸突变为丙氨酸，同时第212位赖氨酸突变为色氨酸。3.一种权利要求1所述O
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琥珀酰巯基转移酶metZ突变体编码基因构建的重组基因工程菌。4.如权利要求3所述的重组基因工程菌，其特征在于所述重组基因工程菌以E.coli BL21(DE3)为宿主菌。5.一种权利要求1所述O
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琥珀酰巯基转移酶metZ突变体在L
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甲硫氨酸合成中的应用。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述的应用是：以含O
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琥珀酰巯基转移酶metZ突变体基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体提取的粗酶液为催化剂，以O
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琥珀酰
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L
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高丝氨酸为底物，以甲硫醇钠盐为甲硫基供体，以pH5.0～9.0的缓冲液为反应介质构成反应体系，在温度20～45℃条件下进行转化反应，反应液分离纯化，获得L
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甲硫氨酸；所述粗酶液是将湿菌体用pH5.0～9.0的缓冲液重悬超声破碎，离心，取上清液即为粗酶液。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述反应体系中，底物加入终浓度为50
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【专利技术属性】
技术研发人员：汤晓玲，赵凯旋，柳志强，郑裕国，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：