一种基于多能干细胞分化制备角质细胞的培养液制造技术

本发明专利技术的一种基于多能干细胞分化制备角质细胞的培养液，包括第一阶段培养液和第二阶段培养液，所述第一阶段培养液包括：DMEM/F12基础培养液、KOSR、非必须氨基酸NEAA、L‑Glutamine、β‑巯基乙醇、SU6656、Retinoic acid、CHIR99021、hEGF和NKH477；第二阶段培养液包括：DMEM/F12基础培养液、KOSR、非必须氨基酸NEAA、L‑Glutamine、β‑巯基乙醇、BMP4和抗坏血酸。本发明专利技术的培养液可以在较短时间内获得由诱导多功能干细胞来源的成熟内皮细胞，此方法获得的初级角质细胞和成熟角质细胞纯度好、活率高、功能完善，具有潜在的临床应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种基于多能干细胞分化制备角质细胞的培养液
本专利技术属于细胞工程
，具体来说是一种基于多能干细胞分化制备角质细胞的培养液。
技术介绍
目前皮肤作为一个最大的人体器官，也是人体第一道屏障，具有阻止病原菌的入侵、防止机体脱水、调节体温和提供感知等多种作用。角质细胞位于复层上皮最深的基底层，有时被称为基底细胞或基底角质形成细胞。已知表皮中95％的细胞为角质细胞，鳞状角质形成细胞也存在于口腔和食道的粘膜，以及角膜、结膜和生殖器上皮细胞等也属于角质细胞。角质细胞维持表皮分化的各个阶段，并负责与皮肤的神经形成紧密连接(Tightjunctions)。它们还能支持真皮、表皮和淋巴细胞的朗格汉斯细胞(Langerhanscells)。角质形成细胞除了其结构作用外，还在免疫系统功能中发挥作用。皮肤作为第一道防线，角质形成细胞是生物体与其环境之间的屏障。除防止毒素和病原体进入生物体体内外，它们还防止体内水分、热量和其他重要成分的流失。同时，负责在没有损伤的情况下分泌抑制性细胞因子，刺激炎症应激，并激活朗格汉斯细胞(Langerhanscells)对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于多能干细胞分化制备角质细胞的培养液，其特征在于：包括第一阶段培养液和第二阶段培养液，所述第一阶段培养液包括：DMEM/F12基础培养液、KOSR、非必须氨基酸NEAA、L-Glutamine、β-巯基乙醇、SU6656、Retinoic acid、CHIR99021、hEGF和NKH477；第二阶段培养液包括：DMEM/F12基础培养液、KOSR、非必须氨基酸NEAA、L-Glutamine、β-巯基乙醇、BMP4和抗坏血酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于多能干细胞分化制备角质细胞的培养液，其特征在于：包括第一阶段培养液和第二阶段培养液，所述第一阶段培养液包括：DMEM/F12基础培养液、KOSR、非必须氨基酸NEAA、L-Glutamine、β-巯基乙醇、SU6656、Retinoicacid、CHIR99021、hEGF和NKH477；第二阶段培养液包括：DMEM/F12基础培养液、KOSR、非必须氨基酸NEAA、L-Glutamine、β-巯基乙醇、BMP4和抗坏血酸。


2.根据权利要求1所述的一种基于多能干细胞分化制备角质细胞的培养液，其特征在于：所述第一阶段培养液和第二阶段培养液中DMEM/F12基础培养液的体积比为1:0.9～1.3，所述第一阶段培养液和第二阶段培养液中KOSR的浓度为15％-30％，所述第一阶段培养液和第二阶段培养液中的非必须氨基酸NEAA的浓度为1％，所述第一阶段培养液和第二阶段培养液中L-Glutamine的浓度为0.5-1mM，所述第一阶段培养液和第二阶段培养液中β-巯基乙醇的浓度为0.05-1.20mM。


3.根据权利要求1所述的一种基于多能干细胞分化制备角质细胞的培养液，其特征在于：所述第一阶段培养液中SU6656的浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：高歌，周安宇，
申请(专利权)人：上海爱萨尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31