【技术实现步骤摘要】
自体皮肤成纤维细胞的制备方法
本专利技术涉及细胞培养
，尤其涉及自体皮肤成纤维细胞的制备方法。
技术介绍
皮肤是包被在肌肉外面的组织，覆盖全身，是人体的最大的器官，可分为表皮、真皮和皮下组织三层，并包含脂腺、汗腺、毛发、指(趾)甲等附属器官。皮肤成纤维细胞(fibroblast，Fbs)是构成皮肤真皮的主要结构成分，可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维、透明质酸等细胞外基质，对于保持皮肤强度和弹性、修复损伤及美容美体具有重要作用。其正常的增值分化是维持皮肤正常的结构和生理功能。人随着年龄的增长，皮肤成纤维细胞数量越来越少，活性越来越低，相应的其产生的胶原蛋白、弹性纤维、透明质酸这些物质就会减少，不足以支撑皮肤结构，导致真皮层变薄，皮肤开始松弛，失去弹性，出现皱纹。补充成纤维细胞能够从根源上解决面部皮肤衰老及损伤问题，让皮肤从初代细胞开始重生，因此，关于皮肤成纤维细胞的研究越来越受到人们的关注。现有的提取皮肤成纤维细胞尚有诸多缺点，例如消化时间长，操作步骤繁琐，进而显示出这些方法不够简便高效。例如CN...
【技术保护点】
1.自体皮肤成纤维细胞的制备方法，其特征在于，方法步骤如下：/nS1：切取一块人自体脸颊或耳后皮肤组织，将组织在无菌环境下完全浸泡于组织处理液中10-20min，将浸泡后的组织去除脂肪组织及结缔组织，剩余组织置于无菌培养皿中剪碎；/nS2：将剪碎后的组织加入37℃预热的含Hank’s平衡盐溶液的混合酶消化液进行消化，消化结束后加入终止消化液以终止消化；/nS3：将所得组织液合并至离心管中，离心，去除上清，向细胞沉淀加入细胞培养液，重悬至3-15ml作为原代细胞，后转移至培养皿培养，得到P
【技术特征摘要】
1.自体皮肤成纤维细胞的制备方法，其特征在于，方法步骤如下：
S1：切取一块人自体脸颊或耳后皮肤组织，将组织在无菌环境下完全浸泡于组织处理液中10-20min，将浸泡后的组织去除脂肪组织及结缔组织，剩余组织置于无菌培养皿中剪碎；
S2：将剪碎后的组织加入37℃预热的含Hank’s平衡盐溶液的混合酶消化液进行消化，消化结束后加入终止消化液以终止消化；
S3：将所得组织液合并至离心管中，离心，去除上清，向细胞沉淀加入细胞培养液，重悬至3-15ml作为原代细胞，后转移至培养皿培养，得到P0成纤维细胞；
S4：将P0代细胞接种至培养瓶中，培养结束后收集细胞，得到P1代成纤维细胞，取样并计数细胞的数量和活率。
2.根据权利要求1所述的自体皮肤成纤维细胞的制备方法，其特征在于，所述S1中组织处理液为含有0.8-1.2％双抗的0.9％生理盐水。
3.根据权利要求1所述的自体皮肤成纤维细胞的制备方法，其特征在于，所述S1中剪碎后组织的大小为0.1-0.3mm3。...
【专利技术属性】
技术研发人员：李怡林，
申请(专利权)人：纳美细胞科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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