本发明专利技术公开了一种MicroRNA‑302c‑3p作为NLRP3抑制剂的应用；本发明专利技术通过在线生物信息学数据库筛选和鉴定直接靶向NLRP3的miRNA，并通过多种实验验证筛选出最显著的miR‑302c‑3p；miR‑302c‑3p通过直接结合NLRP3mRNA的特定位点抑制内皮炎症和焦亡；并通过尾静脉注射miR‑302c‑3p agomir后，ApoE‑/‑小鼠的主动脉炎症和焦亡均得到改善；研究表明，miR‑302c‑3p/NLRP3在内皮细胞中具有新的调控信号通路及其作用机制；MicroRNA‑302c‑3p能够直接结合NLRP3mRNA的特定位点抑制NLPR激活，进而抑制内皮炎症和焦亡，可达治疗动脉粥样硬化的目的。
【技术实现步骤摘要】
MicroRNA-302c-3p作为NLRP3抑制剂的应用
本专利技术涉及NLRP3抑制剂
，具体涉及一种MicroRNA-302c-3p作为NLRP3抑制剂的应用。
技术介绍
动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种慢性炎症性疾病，伴有脂质积聚和内皮功能障碍。早期诊断对于亚临床动脉粥样硬化至关重要，因为亚临床动脉粥样硬化的潜伏期相当长，且与心血管疾病密切相关。Ox-LDL是动脉粥样硬化性心血管疾病进展的关键因素。简单地说，ox-LDL被内皮细胞的模式识别受体识别，并通过触发级联氧化应激和炎症反应引起内皮功能障碍，这是早期动脉粥样硬化的特征。从这个意义上说，内皮细胞炎症和免疫的及时干预可以延缓动脉粥样硬化。NLRP3炎性小体是一种多聚蛋白复合体，在细胞内发挥先天免疫信号平台的作用，是炎症和免疫的关键中介。其激活招募caspase-1前体，并触发自身蛋白水解裂解活化caspase-1，导致gasderminD(GSDMD)的裂解和膜破裂，伴有炎症性程序性细胞死亡，称为焦亡。同时释放细胞因子白细胞介素(IL)-18和IL-1β。Duewell等发现NLRP3炎性小体被胆固醇晶体触发和激活，导致慢性炎症和动脉粥样硬化斑块的形成，这揭示了NLRP3炎性小体在动脉粥样硬化中的关键作用。此后，NLRP3炎性小体参与动脉粥样硬化的机制在单核细胞和巨噬细胞等免疫细胞中得到了广泛研究。然而，最近越来越多的研究报道NLRP3炎性小体也在内皮细胞中发挥重要作用。Zhuang等人证实内皮细胞Foxp1通过直接抑制NLRP3炎性小体激活来减轻内皮细胞炎症反应。此外，Zhang等人发现褪黑素在内皮细胞中发挥抗焦亡作用，这是通过调节LncRNAMEG3/miR-223/NLRP3轴来实现的。直接抑制NLRP3炎性小体激活不仅可以抑制IL-18和IL-1β的分泌，还可以抑制细胞焦亡的发生，进一步降低局部炎症的级联反应。越来越多的NLRP3炎性小体抑制剂被发现，如MCC950、BHB和OLT1177,可阻断NLRP3炎性小体的激活，减少IL-18、IL-1β的释放，从而延缓炎症性疾病进展。因此，NLRP3可能是心血管疾病的有效治疗靶点。非编码RNA(ncRNAs)是细胞功能和疾病进展的新型调控因子。近来，越来越多的证据表明，ncRNA在心血管疾病中起着关键的调节作用。MicroRNAs(miRNAs)是目前研究最彻底、高度保守的ncRNAs之一，其长度为20-25个核苷酸，在转录后通过沉默靶mRNA阻碍基因表达，从而涉及多种关键的细胞过程和疾病。miRNA作为炎症的传感器和内皮稳态的保护因子，调节内皮细胞的功能。在这方面，新兴文献表明，miRNA也微调NLRP3炎症小体激活的过程，这是通过在翻译水平上降低NLRP3表达来实现的.然而，哪些miRNA在心血管领域对NLRP3功能影响最大仍有待进一步研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种MicroRNA-302c-3p作为NLRP3抑制剂的应用，MicroRNA-302c-3p能够直接结合NLRP3mRNA的特定位点能够抑制NLPR激活，进而抑制内皮炎症和焦亡，可达治疗动脉粥样硬化的目的。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：本专利技术第一方面提供一种MicroRNA-302c-3p作为NLRP3抑制剂的应用。本专利技术通过在线生物信息学数据库筛选和鉴定直接靶向NLRP3的miRNA，并通过多种实验验证筛选出最显著的miR-302c-3p；miR-302c-3p通过直接结合NLRP3mRNA的特定位点抑制内皮炎症和焦亡；并通过尾静脉注射miR-302c-3pagomir后，ApoE-/-小鼠的主动脉炎症和焦亡均得到改善；研究表明，miR-302c-3p/NLRP3在内皮细胞中具有新的调控信号通路及其作用机制。本专利技术第二方面提供一种NLRP3抑制剂，所述抑制剂包括MicroRNA-302c-3p。本专利技术第三方面提供一种MicroRNA-302c-3p和/或所述抑制剂在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用。本专利技术第四方面提供一种治疗动脉粥样硬化的药物，所述药物包含治疗有效量的MicroRNA-302c-3p和/或所述抑制剂。优选地，所述药物的剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、注射剂和颗粒冲剂。优选地，所述药物还包括药学上可接受的辅料。与现有技术相比，本专利技术的有益效果至少包括：本专利技术通过在线生物信息学数据库筛选和鉴定直接靶向NLRP3的miRNA，并通过多种实验验证筛选出最显著的miR-302c-3p；miR-302c-3p通过直接结合NLRP3mRNA的特定位点抑制内皮炎症和焦亡；并通过尾静脉注射miR-302c-3pagomir后，ApoE-/-小鼠的主动脉炎症和焦亡均得到改善；研究表明，miR-302c-3p/NLRP3在内皮细胞中具有新的调控信号通路及其作用机制；MicroRNA-302c-3p能够直接结合NLRP3mRNA的特定位点抑制NLPR激活，进而抑制内皮炎症和焦亡，可达治疗动脉粥样硬化的目的。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。在所有附图中，类似的元件或部分一般由类似的附图标记标识。附图中，各元件或部分并不一定按照实际的比例绘制。图1A：4个独立miRNA差异分析数据库的维恩图揭示了21个可能直接靶向NLRP3的miRNA；图1B1：健康动脉组织(n＝10)和动脉粥样硬化样本(n＝14)中miR-302c-3p水平的qRT-PCR分析；图1B2：健康动脉组织(n＝10)和动脉粥样硬化样本(n＝14)中miR-421水平的qRT-PCR分析；图1B3：健康动脉组织(n＝10)和动脉粥样硬化样本(n＝14)中miR-490-5p水平的qRT-PCR分析；图1B4：健康动脉组织(n＝10)和动脉粥样硬化样本(n＝14)中miR-876-5p水平的qRT-PCR分析；图1C：健康动脉组织(7例)和动脉粥样硬化组织(12例)NLRP3水平的qRT-PCR分析；图1D：RNA荧光原位杂交检测miR-302c-3p在人正常动脉和动脉粥样硬化动脉中的表达；图1E：qRT-PCR分析100μg/mLox-LDL处理HUVEC中miR-302c-3p的表达(0、6、12和24小时)；图1F：qRT-PCR分析100μg/mLox-LDL处理HUVEC中NLRP3,caspase-1和IL-1β的表达(0、6、12和24小时)；图2A：不同物种中NLRP33’UTR与miR-302c-3p结合序列的预测；图2B：qRT-PCR检测miR-302c-3p模拟物和抑制剂的转染效率；图2C：miR-302c-3p模拟物和抑制剂转染HUVECs后NLRP3mRNA水平表达量；图2D和E：miR-302c本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.MicroRNA-302c-3p作为NLRP3抑制剂的应用。/n
【技术特征摘要】
1.MicroRNA-302c-3p作为NLRP3抑制剂的应用。
2.一种NLRP3抑制剂，其特征在于，所述抑制剂包括MicroRNA-302c-3p。
3.MicroRNA-302c-3p和/或权利要求2所述的抑制剂在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用。
4.一...
【专利技术属性】
技术研发人员：于涛，褚现明，杨艳艳，柏宝辰，
申请(专利权)人：青岛大学附属医院，
类型：发明
国别省市：山东;37
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。