一种在原生质体细胞中高效表达目标基因的方法技术

技术编号:28660948 阅读:44 留言:0更新日期:2021-06-02 02:34
本发明专利技术公开了一种在原生质体细胞中高效表达目标基因的方法。所述方法包括如下步骤:以DNA分子作为启动子来启动目标基因的表达,所述DNA分子为如下1)或2)或3):1)SEQ ID No.3所示的DNA分子;2)与1)限定的核苷酸序列具有99%以上、95%以上、90%以上、85%以上或者80%以上同源性,且具有启动子功能的DNA分子;3)在严格条件下与1)或2)限定的核苷酸序列杂交,且具有启动子功能的DNA分子。通过实验证明:该DNA分子可高效与稳定的驱动目标基因在苹果原生质体细胞中进行表达,突破了在苹果原生质体细胞中应用CaMV 35S启动子部分基因不表达,部分基因表达较弱的技术局限。

【技术实现步骤摘要】
一种在原生质体细胞中高效表达目标基因的方法
本专利技术涉及植物生物技术与生物化学领域,尤其涉及一种在原生质体细胞中高效表达目标基因的方法。
技术介绍
苹果是蔷薇科苹果亚科苹果属植物,营养价值很高,富含矿物质和维生素,含钙量丰富,有助于代谢掉体内多余盐分,苹果酸可代谢热量,防止下半身肥胖。苹果中营养成分可溶性大,容易被人体吸收,故有“活水”之称。它有利于溶解硫元素,使皮肤润滑柔嫩。我国是世界上最大的苹果生产和消费国,面积和产量均居世界首位。对苹果中重要功能基因的研究,有助于揭示其细胞信号转导的分子机理及对逆境的响应机制。胚性愈伤组织作为一种良好的试验试材,广泛应用于植物的遗传转化、再生植株等研究,是游离原生质体的良好试材;无细胞壁的原生质体的代谢过程、信号转导途径、对环境因素和外来刺激的反应等,都与完整的植物细胞或组织基本相同,通过向原生质体细胞中导入目标基因或目标基因与报告基因融合的DNA,利用报告基因在植物原生质体中的瞬时表达可以快速准确地进行相关基因功能、蛋白质互作及细胞代谢过程等研究,为在细胞水平上研究植物的生理变化、基因表达、信本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.DNA分子,为如下1)或2)或3):/n1)SEQ ID No.3所示的DNA分子;/n2)与1)限定的核苷酸序列具有99%以上、95%以上、90%以上、85%以上或者80%以上同源性,且具有启动子功能的DNA分子;/n3)在严格条件下与1)或2)限定的核苷酸序列杂交,且具有启动子功能的DNA分子。/n

【技术特征摘要】
20200302 CN 20201013512841.DNA分子,为如下1)或2)或3):
1)SEQIDNo.3所示的DNA分子;
2)与1)限定的核苷酸序列具有99%以上、95%以上、90%以上、85%以上或者80%以上同源性,且具有启动子功能的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)限定的核苷酸序列杂交,且具有启动子功能的DNA分子。


2.含有权利要求1所述DNA分子的生物材料,为下述B1)至B11)中的任一种:
B1)含有权利要求1所述DNA分子的表达盒;
B2)含有权利要求1所述DNA分子的重组载体;
B3)含有B1)所述表达盒的重组载体;
B4)含有权利要求1所述DNA分子的重组微生物;
B5)含有B1)所述表达盒的重组微生物;
B6)含有B2)所述重组载体的重组微生物;
B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物;
B8)含有权利要求1所述DNA分子的转基因细胞系;
B9)含有B1)所述表达盒的转基因细胞系;
B10)含有B2)所述重组载体的转基因细胞系;
B1...

【专利技术属性】
技术研发人员:王宪璞张芮刘秀霞张彬彬辛丽王立双陈学森吴树敬
申请(专利权)人:山东农业大学
类型:发明
国别省市:山东;37

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