抗CD137抗体及其应用制造技术

提供一种可以特异性结合CD137的抗体或其抗原结合片段，其轻链可变区和重链可变区包括一个或多个突变，也提供了所述抗体或其抗原结合片段在制备药物中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CD137抗体及其应用
本申请涉及生物医药领域，具体涉及一种能与CD137蛋白特异性结合的抗体或其抗原结合片段。
技术介绍
CD137蛋白(也称为4-1BB，TNFRSF9等)是肿瘤坏死因子受体超家族的成员，属于I型跨膜蛋白。CD137L是肿瘤坏死因子受体超家族的成员，属于II型跨膜蛋白。目前的研究结果表明，CD137L主要在活化的APC上表达，如树突状细胞(DC)，巨噬细胞和B细胞(Pollok，KE等，1994，Eur.J.Immunol.24：367-374)；而T细胞接受抗原特异性信号后可诱导CD137表达(Kwon，B.S.等，1989，PNAS86：1963-67)。已经充分证明了CD137在T细胞上的功能。在存在一定量CD3抗体的情况下，CD137信号的激活可诱导T细胞增殖和细胞因子(主要是IFN-γ)的合成，并抑制活化T细胞的凋亡，从而延长T细胞的寿命。然而，目前已研发的抗CD137抗体稳定性较低，且对肿瘤的抑制能力有限，因此亟待开发新的抗CD137药物以用于新药研发。
技术实现思路
本申请提供了一种特异性结合CD137的抗体或其抗原结合片段及其应用。本申请提供的抗CD137抗体具有下列性质中的一种或多种：1)可以特异性结合CD137蛋白；2)具有CD137激动剂活性；3)具有较高稳定性；4)具有较高纯度；5)能够用于治疗癌症。一方面，本申请包括一种特异性结合CD137的抗体或其抗原结合片段，其包括轻链可变区VL和重链可变区VH，其中与SEQIDNO:103所示的序列相比，所述VL包含一个或多个VL氨基酸突变，所述VL氨基酸突变发生在选自下组的一个或多个位置：V3，A10，K44，D71和V77。在某些实施方式中，与SEQIDNO:127所示的序列相比，所述VH包含一个或多个VH氨基酸突变，所述VH氨基酸突变发生在选自下组的一个或多个位置：Q13，N78，H84，D86，A90和F97。在某些实施方式中，所述VL氨基酸突变包含发生在位置A10和V77处的VL氨基酸突变。在某些实施方式中，所述VH氨基酸突变包含发生在位置Q13处的VH氨基酸突变。在某些实施方式中，所述VH氨基酸突变还包含发生在位置N78处的VH氨基酸突变。在某些实施方式中，所述VL氨基酸突变包含下列任一组位置处的VL氨基酸突变：1)V3，D71和V77；2)A10和V77；3)D71；4)A10，D71和V77；5)D71和V77；6)A10和D71；或7)V3，A10，K44，D71和V77。在某些实施方式中，所述VH氨基酸突变包含下列任一组位置处的VH氨基酸突变：1)N78；2)N78，H84，和D86；3)Q13，N78，H84和D86；4)Q13和N78；5)Q13，H84，D86，A90和F97或6)Q13，N78，H84，D86，A90和F97。在某些实施方式中，所述VL氨基酸突变和所述VH氨基酸突变分别包含下列任一组位置处的氨基酸突变：1)VL：V3，D71和V77，以及VH：N78；2)VL：D71，以及VH：N78、H84和D86；3)VL：D71和V77，以及VH：N78、H84和D86；4)VL：A10，D71和V77，以及VH：N78、H84和D86；5)VL：A10和D71，以及VH：Q13、N78、H84和D86；6)VL：V3，A10，K44，D71和V77，以及VH：Q13和N78；7)VL：A10和V77，以及VH：Q13，H84，D86，A90和F97或8)VL：A10和V77，以及VH：Q13，N78，H84，D86，A90和F97。在某些实施方式中，所述V3处的VL氨基酸突变选自：V3A，V3M，V3G。在某些实施方式中，所述A10处的VL氨基酸突变选自：A10V，A10L，A10I。在某些实施方式中，所述K44处的VL氨基酸突变选自：K44T，K44G。在某些实施方式中，所述D71处的VL氨基酸突变选自：D71N，D71Q。在某些实施方式中，所述V77处的VL氨基酸突变选自：V77I。在某些实施方式中，所述Q13处的VH氨基酸突变选自：Q13K，Q13R。在某些实施方式中，所述N78处的VH氨基酸突变选自：N78K，N78D，N78Q。在某些实施方式中，所述H84处的VH氨基酸突变选自：H84Q，H84E。在某些实施方式中，所述D86处的VH氨基酸突变选自：D86N，D86E。在某些实施方式中，所述A90处的VH氨基酸突变选自：A90T，A90S。在某些实施方式中，所述F97处的VH氨基酸突变选自：F97Y，F97W。在某些实施方式中，所述VL氨基酸突变包含下列任一组的VL氨基酸突变：1)V3A，D71N和V77I；2)A10V和V77I；3)D71N；4)A10V，D71N和V77I；5)D71N和V77I；6)A10V和D71N；或7)V3A，A10V，K44T，D71N和V77I。在某些实施方式中，所述VH氨基酸突变包含下列任一组的VH氨基酸突变：1)N78K；2)N78K，H84Q和D86N；3)Q13K，N78K，H84Q和D86N；4)Q13K和N78K；5)Q13K，H84Q，D86N，A90T和F97Y或6)Q13K，N78K，H84Q，D86N，A90T和F97Y。在某些实施方式中，所述VL氨基酸突变和所述VH氨基酸突变分别包含下列任一组的氨基酸突变：1)VL：V3A，D71N和V77I，以及VH：N78K；2)VL：D71N，以及VH：N78K，H84Q和D86N；3)VL：D71N和V77I，以及VH：N78K，H84Q和D86N；4)VL：A10V，D71N和V77I，以及VH：N78K，H84Q和D86N；5)VL：A10V和D71N，以及VH：Q13K，N78K，H84Q和D86N；6)VL：V3A，A10V，K44T，D71N和V77I，以及VH：Q13K和N78K；7)VL：A10V和V77I，以及VH：Q13K，H84Q，D86N，A90T和F97Y或8)VL：A10V和V77I，以及VH：Q13K，N78K，H84Q，D86N，A90T和F97Y。在某些实施方式中，所述VL包含SEQIDNO:104，106，108和110-114中任一项所示的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述VH包含SEQIDNO:128，130，132和134-138中任一项所示的氨基酸序列。在某些实施方式中，1)所述VL包含SEQIDNO:104所示的氨基酸序列，且所述VH包含SEQIDNO:128所示的氨基酸序列；2)所述VL包含SEQIDNO:106所示的氨基酸序列，且所述VH包含SEQIDNO:130所示的氨基酸序列；3)所述VL包含SEQIDNO:108所示的氨基酸序列，且所述VH包含SEQIDNO:132所示的氨基酸序列；4)所述VL包含SEQIDNO:110所示的氨基酸序列，且所述VH包含SEQIDNO:134所示的氨基酸序列；5)所述VL包含SEQIDNO:111所示的氨基本文档来自技高网...

【技术保护点】
特异性结合CD137的抗体或其抗原结合片段，其包括轻链可变区VL和重链可变区VH，其中与SEQ ID NO:103所示的序列相比，所述VL包含一个或多个VL氨基酸突变，所述VL氨基酸突变发生在选自下组的一个或多个位置：V3，A10，K44，D71和V77。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181019 CN PCT/CN2018/111086特异性结合CD137的抗体或其抗原结合片段，其包括轻链可变区VL和重链可变区VH，其中与SEQIDNO:103所示的序列相比，所述VL包含一个或多个VL氨基酸突变，所述VL氨基酸突变发生在选自下组的一个或多个位置：V3，A10，K44，D71和V77。


根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中与SEQIDNO:127所示的序列相比，所述VH包含一个或多个VH氨基酸突变，所述VH氨基酸突变发生在选自下组的一个或多个位置：Q13，N78，H84，D86，A90和F97。


根据权利要求1-2中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VL氨基酸突变包含发生在位置A10和V77处的VL氨基酸突变。


根据权利要求2-3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH氨基酸突变包含发生在位置Q13处的VH氨基酸突变。


根据权利要求2-4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH氨基酸突变还包含发生在位置N78处的VH氨基酸突变。


根据权利要求1-5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VL氨基酸突变包含下列任一组位置处的VL氨基酸突变：
1)V3，D71和V77；
2)A10和V77；
3)D71；
4)A10，D71和V77；
5)D71和V77；
6)A10和D71；或
7)V3，A10，K44，D71和V77。


根据权利要求2-6中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH氨基酸突变包含下列任一组位置处的VH氨基酸突变：
1)N78；
2)N78，H84，和D86；
3)Q13，N78，H84和D86；
4)Q13和N78；
5)Q13，H84，D86，A90和F97；或
6)Q13，N78，H84，D86，A90和F97。


根据权利要求2-7中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VL氨基酸突变和所述VH氨基酸突变分别包含下列任一组位置处的氨基酸突变：
1)VL：V3，D71和V77，以及VH：N78；
2)VL：D71，以及VH：N78，H84和D86；
3)VL：D71和V77，以及VH：N78，H84和D86；
4)VL：A10，D71和V77，以及VH：N78，H84和D86；
5)VL：A10和D71，以及VH：Q13，N78，H84和D86；
6)VL：V3，A10，K44，D71和V77，以及VH：Q13和N78；
7)VL：A10和V77，以及VH：Q13，H84，D86，A90和F97；或
8)VL：A10和V77，以及VH：Q13，N78，H84，D86，A90和F97。


根据权利要求1-8中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述V3处的VL氨基酸突变选自：V3A，V3M，V3G。


根据权利要求1-9中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述A10处的VL氨基酸突变选自：A10V，A10L，A10I。


根据权利要求1-10中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述K44处的VL氨基酸突变选自：K44T，K44G。


根据权利要求1-11中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述D71处的VL氨基酸突变选自：D71N，D71Q。


根据权利要求1-12中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述V77处的VL氨基酸突变选自：V77I。


根据权利要求2-13中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述Q13处的VH氨基酸突变选自：Q13K，Q13R。


根据权利要求2-14中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述N78处的VH氨基酸突变选自：N78K，N78D，N78Q。


根据权利要求2-15中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述H84处的VH氨基酸突变选自：H84Q，H84E。


根据权利要求2-16中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述D86处的VH氨基酸突变选自：D86N，D86E。


根据权利要求2-17中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述A90处的VH氨基酸突变选自：A90T，A90S。


根据权利要求2-18中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述F97处的VH氨基酸突变选自：F97Y，F97W。


根据权利要求1-19中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VL氨基酸突变包含下列任一组的VL氨基酸突变：
1)V3A，D71N和V77I；
2)A10V和V77I；
3)D71N；
4)A10V，D71N和V77I；
5)D71N和V77I；
6)A10V和D71N；或
7)V3A，A10V，K44T，D71N和V77I。


根据权利要求2-20中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述VH氨基酸突变包含下列任一组的VH氨基酸突变：
1)N78K；
2)N78K，H84Q和D86N；
3)Q13K，N78K，H84Q和D86N；
4)Q13K和N78K；<...

【专利技术属性】
技术研发人员：张欣，彭建建，付凯，马慧，潘晓龙，傅士龙，马树立，丁健，
申请(专利权)人：苏州丁孚靶点生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32